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重组人骨保护素抑制破骨细胞及促进羟磷灰石修复去势大鼠下颌骨缺损的研究被引量：5: 2018年; 目的探讨转染人骨保护素(h OPG)基因的大鼠骨髓间充质干细胞(r BMSCs)复合羟磷灰石(HA)支架对去势大鼠下颌骨缺损的修复作用。方法将重组腺病毒p DC316-h OPG-EGFP转染r BMSCs,蛋白质印迹法和骨磨片试验分别检测h OPG的表达水平和抑制破骨细胞功能;构建骨质疏松大鼠模型,分别将HA支架、未转染r BMSCs复合HA支架、转染r BMSCs复合HA支架植入大鼠下颌骨骨缺损,6周后通过抗酒石酸酸性磷酸酶、苏木精-伊红染色检测骨缺损区破骨细胞及骨修复情况。结果体外携载有h OPG基因的腺病毒成功转染r BMSCs,转染后的r BMSCs表达具有抑制破骨细胞活性功能的h OPG;表达h OPG的r BMSCs复合HA支架后骨缺损处破骨细胞明显减少,成骨增多。结论转染h OPG基因的r BMSCs在体内外均具有抑制破骨细胞功能的作用,且转染r BMSCs复合HA支架可促进骨质疏松大鼠的下颌骨缺损修复。; 廖锋刘士博刘瑶刘航航胡建刘显; 关键词：骨保护素骨缺损骨再生

重组人骨保护素联合替硝唑治疗牙周炎小鼠的疗效及与血清RANKL、MCP-1水平的相关性研究被引量：3: 2018年; 目的:探究重组人骨保护素联合替硝唑治疗牙周炎小鼠的疗效及对血清RANKL、MCP-1水平的影响。方法:80只SPF级清洁的小鼠随机分为4组,各20只,模型组、替硝唑组和重组人骨保护素组使用Kimura等报道的方法建模,替硝唑组小鼠接受替硝唑灌胃,重组人骨保护素组在替硝唑组的基础上在牙周袋间隙注入重组人骨保护素治疗。观察并记录四组小鼠牙周变化情况,并进行牙龈评级。苏木精-伊红(HE)染色法显观察上皮组织形态。使用酶联免疫吸附法检测血清中IL-4、IL-6、RANKL和MCP-1水平。结果:干预后模型组出现严重炎症反应,包括红肿、出血以及深牙周袋,牙齿明显松动,替硝唑组和重组人骨保护素组小鼠基本恢复,并且重组人骨保护素组小鼠牙龈评级优于替硝唑组和模型组(P<0.05)。HE染色结果显示干预后模型组组织出现水肿、血管扩张以及大量的炎性浸润,替硝唑组和重组人骨保护素组小鼠的上皮结构完整且排列较为紧密、有序。干预后替硝唑组和重组人骨保护素组的IL-4显著高于模型组而IL-6显著低于模型组(P<0.05),并且干预后重组人骨保护素组IL-4显著高于替硝唑组而IL-6显著低于替硝唑组(P<0.05)。干预后替硝唑组和重组人骨保护素组均显著降低,重组人骨保护素组RAKNL和MCP-1显著低于模型组(P>0.05)。结论:重组人骨保护素联合替硝唑对牙周炎小鼠的牙龈和牙齿具有更好的治疗效果,并且可以降低血清中RAKNL和MCP-1水平,抑制骨吸收,保护牙齿。; 陈一莫安春谢永林邵艳玲; 关键词：牙周炎替硝唑核因子ΚB受体活化因子配体单核细胞趋化蛋白-1

仙灵骨葆胶囊联合重组人骨保护素治疗激素性股骨头坏死82例临床研究被引量：2: 2017年; 目的:观察仙灵骨葆胶囊联合重组人骨保护素治疗激素性股骨头坏死的临床疗效。方法:将164例激素性股骨头坏死患者按随机数字表法分为观察组和对照组各82例,对照组患者采用重组人骨保护素治疗,观察组加用仙灵骨葆胶囊联合治疗,观察比较两组患者临床效果。结果:观察组患者髋关节Harris评分优良率为89.02%,明显高于对照组的76.83%,差异具有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,两组患者股骨颈、股骨粗隆、Ward's三角密度均有不同程度增加,且观察组明显高于对照组(P<0.05);两组患者血栓素B2(TXB2)、血浆P选择素以及血栓调节蛋白(TM)均有不同程度的下降,且观察组明显低于对照组(P<0.05);两组患者6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)均有不同程度的上升,且观察组明显高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:重组人骨保护素与仙灵骨葆胶囊联合使用可有效改善患者凝血机制,增强髋关节功能,提高股骨头局部骨密度,值得临床推广应用。; 时中洋; 关键词：激素性股骨头坏死

重组人骨保护素Fc融合蛋白对骨质疏松性骨折早期愈合的影响被引量：5: 2016年; 目的通过对去势的骨质疏松(OP)大鼠股骨骨折模型局部应用重组人骨保护素Fc融合蛋白(OPG-Fc),探讨调节骨保护素(OPG)和核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的表达变化对OP性骨折早期愈合的影响。方法以去势方法建立OP雌性SD大鼠模型,选择75只OP大鼠随机分成实验组、对照组及假手术组,每组25只。建立大鼠股骨骨折模型,实验组骨折局部注射OPG-Fc,对照组骨折局部注射生理盐水,假手术组单纯切开至股骨后缝合,不形成骨折,于术后第7天、第14天、第28天、第42天、第56天5个时间节段分批行心脏采血并处死模型,血清标本行血清碱性磷酸酶(ALP)的分光光度法测定;股骨骨折处标本切片后通过HE染色观察骨折愈合情况,免疫组织化学染色分析破骨细胞数量变化情况;分别于第28天及第56天测定各组骨密度(BMD)将各组测得数据进行统计学分析。结果大体标本HE染色实验组骨痂形成及改造较对照组提前,对照组骨折愈合明显迟延,免疫组织化学染色显示在第7天、第14天、第28天各个时间节段实验组破骨细胞计数值均低于对照组(P<0.05);ALP血清浓度在假手术组各个时间点波幅很小,对照组浓度于术后第14天开始升高,至第28天至高峰,随后渐降,实验组大鼠ALP血清浓度变化规律与对照组的变化相似,但在第14和28天时数值增高明显(P<0.05),第42天及第56天实验组和对照组破骨细胞计数值及ALP浓度值均趋同,差异无统计学意义(P>0.05);BMD在第28天和第56天时对照组明显低于实验组(P<0.05)。结论 OPG-Fc具有成骨活性增高与破骨活性降低的双重作用,促进骨折愈合,尤其在OP性骨折早期治疗中具有重要意义。; 沈业彤张学斌吴丽红刘果彤王琳陶敏燕徐凤琳; 关键词：骨质疏松性骨折愈合核因子-ΚB受体活化因子配体

重组人骨保护素对激素性股骨头坏死患者骨密度及髋关节Harris评分的影响被引量：23: 2016年; 目的:探讨重组人骨保护素对于激素性股骨头坏死患者的骨密度和髋关节Harris评分的影响。方法:选取我院骨科已经确诊的110例激素性股骨头坏死患者,随机分为对照组(给予仙灵骨葆胶囊)和观察组(给予仙灵骨葆胶囊和重组人骨保护素),连续治疗4周,检测并比较两组患者治疗前后的骨密度、髋关节Harris评分、血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、Ⅱ型胶原羧基端端肽(CTX-Ⅱ)水平以及复发率变化。结果:与对照组相比较,观察组患者腰椎骨和股骨近端的骨密度较高平(P<0.05);髋关节Harris评分总有效率(92.73%)显著高于对照组(76.36%)(P<0.05)。两组血清TRAP及CTX-Ⅱ水平显著低于治疗前,且试验组血清TRAP及CTX-Ⅱ水平显著低于对照组(P<0.05),与对照组相比,观察组复发率较低(P<0.05)。结论:重组人骨保护素能够抑制骨吸收,提高骨密度和强度,改善髋关节功能,有望成为激素性股骨头坏死的新型治疗方法。; 杨登峰阮文辉谢鹏程延石宇; 关键词：激素性股骨头坏死骨密度髋关节功能

重组人骨保护素对牙周炎大鼠牙槽骨RANKL、OPG蛋白表达的影响被引量：14: 2015年; 目的探讨重组人骨保护素(rhOPG)对牙周炎大鼠牙槽骨RANKL、OPG蛋白表达的影响,为rhOPG应用于牙周炎的治疗提供实验依据。方法选择22只Wistar大鼠,采用随机数字表法选择2只健康大鼠作为健康组;其余20只作为实验组,建立牙周炎大鼠模型,再将其分为实验对照组(n=10)和rhOPG组(n=10),rhOPG组大鼠于上颌第2磨牙牙周袋间隙局部注入10mg/kg rhOPG治疗。实验对照组大鼠于相同部位注射等体积灭菌注射用水。采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)检测牙槽骨RANKL、OPG蛋白的表达。结果与健康组比较,实验组大鼠牙槽骨OPG表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.05),而RANKL表达水平两组差异无统计学意义(P>0.05)。与实验对照组比较,rhOPG组大鼠牙槽骨组织OPG蛋白的表达水平明显上调,而RANKL蛋白的表达明显下调(P<0.05)。治疗后rhOPG组大鼠牙槽骨中OPG表达水平明显高于治疗前,而RANKL表达水平明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 rhOPG能调节牙周炎大鼠牙槽骨RANKL、OPG的表达。; 钟雯怡武岐山高丽刘琪陈芳柴松宏; 关键词：骨保护素牙周炎核因子ΚB受体活化因子

人骨保护素在CHO细胞内初步稳定表达: 2014年; 目的构建人OPG的稳定表达载体,并在DHFR-型CHO细胞内稳定表达。方法用RT-PCR的方法获得人全长OPG的编码基因,并将其克隆入载体pcDNA3.1-DHFR/CT-GFP,鉴定无误后,转染DHFR-型CHO细胞,经MTX筛选获得阳性表达OPG的细胞株。结果成功构建人OPG的稳定表达载体,并获得阳性表达OPG的细胞株。结论全长人OPG基因可以在CHO细胞内成功稳定表达,这为OPG的功能研究及临床应用奠定物质基础。; 孟凡星李瑞香臧晓怡; 关键词：骨保护素二氢叶酸还原酶中国仓鼠卵巢细胞

重组人骨保护素与重组核因子κb活化因子受体蛋白对破骨前体细胞分化的影响被引量：13: 2013年; 目的:对比重组人骨保护素(rhOPG-Fc)与重组核因子κb活化因子受体蛋白(rhRANK)对破骨前体细胞分化的影响。方法:采用成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养,在地塞米松、1,25(OH)2VitD3诱导下生成破骨细胞的方法。研究分3组:rhRANK组:10-5g/L;rhOPG-Fc组:10-5g/L;空白对照组。作用9d后观察破骨细胞数目和形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数。结果:在空白对照组,小鼠成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养6d后,开始出现多核细胞,9d时可见大量成熟多核细胞,经TRAP染色证实为成熟破骨细胞,而rhRANK组及rhOPG-Fc组TRAP染色阳性多核细胞数较对照组均减少,特别是rhRANK组减少更明显。骨片吸收陷窝计数显示rhRANK组及rhOPG-Fc组较对照组也明显减少,而相对来说,rhRANK组较rhOPG-Fc组更少。结论:rhOPG-Fc与rhRANK均可以有效抑制破骨前体细胞分化成为成熟破骨细胞,且rhRANK较rhOPG-Fc抑制效果更明显。; 熊琦张里程张立海姚琦唐佩福; 关键词：骨保护素细胞分化

重组人骨保护素对聚乙烯颗粒刺激的人工关节置换术患者外周血IL-6和TNF-α表达的影响被引量：4: 2013年; 目的:探讨重组人骨保护素(rhOPG)对聚乙烯颗粒刺激的人工关节置换术患者外周血IL-6和TNF-α表达的影响,分析rhOPG防止关节置换术后假体无菌性松动的应用价值。方法:收集2009年1月-2011年3月我院收治的人工关节置换术患者的外周血清60份,采用梯度离心法分离出单个核细胞,并将其随机分成5组,每组12份。对照组:单个核细胞,模型组:单个核细胞+1×109/mL聚乙烯颗粒,低剂量组:单个核细胞+1×109/mL L聚乙烯颗粒+10 ng/mL rhOPG,中剂量组:单个核细胞+1×109/mL聚乙烯颗粒+100 ng/mL rhOPG,高剂量组:单个核细胞+1×109/mL聚乙烯颗粒+1000 ng/mL rhOPG。通过酶联免疫酶联免疫法(ELISA)测定各组细胞上清液中白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,并进行组间比较。结果:(1)模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组的IL-6、TNF-α含量均显著高于对照组(P<0.05)。(2)低剂量组、中剂量组、高剂量组的IL-6、TNF-α浓度均较模型组低(P<0.05)。(3)随着rhOPG浓度的增加,IL-6和TNF-α含量逐渐降低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:rhOPG可抑制聚乙烯颗粒刺激的人工关节置换术患者外周血IL-6和TNF-α的表达,可有助于防治人工关节置换术后的无菌性关节松动。; 郑鸿何冰曾荣谭宏昌钟环; 关键词：人工关节置换术假体松动白细胞介素-6 肿瘤坏死因子

重组人骨保护素片段OPG^(179)与人血清白蛋白在毕赤酵母中的融合表达被引量：4: 2011年; 目的:在毕赤酵母中融合表达人骨保护素(OPG)片段OPG179与人血清白蛋白(HSA)。方法:通过RT-PCR扩增获得OPG179基因,构建表达质粒pHILD2-rhOPG179-HSA,转化至毕赤酵母菌中进行表达、纯化,对分泌表达产物进行SDS-PAGE及Western印迹检测。结果:酶切鉴定与测序结果显示重组表达质粒pHILD2-rhOPG179-HSA正确;经Western印迹检测,融合蛋白rhOPG179-HSA的相对分子质量约为97×103,符合预期值;rhHSA-OPG179在毕赤酵母中的表达量约为80 mg/L。结论:表达并纯化制备了重组骨保护素片段与人血清白蛋白的融合蛋白,为后续的生物学活性研究奠定了一定的基础。; 刘俊丽刘波宋淑军司少艳谭小青吴军景青萍张建中; 关键词：人骨保护素人血清白蛋白融合蛋白毕赤酵母

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