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一种基因改造的线粒体促凋亡蛋白及提取制备方法: 本发明提供了一种基因改造的线粒体促凋亡蛋白，涉及基因工程技术领域，促凋亡蛋白TOM20‑Linker‑BH3的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。提取制备方法包括人工合成促凋亡蛋白的基因序列；促凋亡蛋白的基因片段插入...; 孙庆丰潘光锦樊嘉李全民傅向东

促凋亡蛋白BAK的功能及在病毒感染中作用的研究进展: 2023年; BAK蛋白从属于BCL-2家族,是细胞凋亡途径中的关键蛋白。BAK蛋白在凋亡信号的刺激下被激活,并在线粒体上集聚成簇后诱导细胞色素c等促凋亡物质释放,通过caspase级联反应放大凋亡信号,最终诱导细胞死亡。目前的BAK研究普遍用于针对癌细胞凋亡逃逸及病毒对机体细胞免疫的逃逸过程,而病毒等病原体与BAK之间的作用机制、影响胞内凋亡和炎症通路的激活以及炎性因子活化的研究较少。因此对BAK蛋白结构、功能和BAK可能介导的相关通路进行介绍,并对其在病毒感染研究中的作用进展进行了分析,以期为促凋亡蛋白BAK在病毒感染中作用的深入研究提供一些理论基础。; 徐炜民邓鑫伍锐; 关键词：促凋亡蛋白 BAK 细胞凋亡病毒感染

促凋亡蛋白Bax和Bak通过Nrf2/GPX4信号通路调控铁死亡被引量：2: 2023年; 为探究促凋亡蛋白Bak/Bax对erastin诱导铁死亡的调控机制,以野生型(WT)、Bak/Bax双敲除(Bak/Bax-DKO)、Bax敲除(Bax-KO)和Bak敲除(Bak-KO)的小鼠成纤维细胞(MEFs)为实验对象,利用CCK-8和流式细胞术检测细胞存活率和活性氧(ROS)的生成量,利用试剂盒测定GSH/GSSG水平,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western Blot)检测相关基因和蛋白的表达水平。结果显示:与野生型细胞相比,敲除Bak和Bax显著抑制erastin诱导的铁死亡,RT-qPCR和Western Blot检测发现,相比WT细胞,Bak/Bax-DKO细胞中核因子NF-E2相关因子2(Nrf2)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白、GPX4 mRNA表达水平明显升高。进一步研究发现:与Bak/Bax双敲除类似,敲除Bax也显著抑制erastin诱导的铁死亡,促进GPX4的蛋白表达水平;而敲除Bak对erastin诱导的铁死亡及GPX4的蛋白表达水平无明显影响。结果表明,促凋亡蛋白Bax和Bak通过Nrf2/GPX4信号通路抑制erastin诱导的铁死亡,且Bax在其中起主导作用。; 韩靖赵国平

表达促凋亡蛋白Bid的重组耻垢分枝杆菌的构建及其对巨噬细胞凋亡的影响: 2022年; 目的构建表达并分泌外源性促凋亡蛋白Bid的重组耻垢分枝杆菌,并研究其对小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡的影响。方法运用生物信息技术对小鼠Bid蛋白质的理化性质、分泌属性、保守结构域及蛋白相互作用网络等进行分析,应用无缝克隆技术及传统酶切酶连方式构建pMV261-ASP(BamHI)-10His、pMV261-ASP(BamHI)-Bid-10His、pMV261-ASP(EcoRI)-10His、pMV261-ASP(EcoRI)-Bid-10His重组质粒,并电转化入耻垢分枝杆菌;通过BCA蛋白定量及免疫印迹技术分析蛋白表达情况,采用AnnexinV-FITC/PI双染法流式检测Bid重组耻垢分枝杆菌对RAW264.7小鼠巨噬细胞凋亡的影响。结果小鼠Bid蛋白是一种等电点为4.80的亲水性蛋白质,其中亮氨酸所占比例最高,为11.3%,色氨酸含量最低,为0.5%;二级结构中,α-螺旋(Hh)、无规则卷曲(Cc)、β-折叠(Ee)、β-转角(Tt)所占比例依次为65.13%、27.69%、4.10%、3.08%;Bid蛋白不具有跨膜结构域及信号肽,属于非分泌性蛋白质,具有死亡保守结构域,可与Caspase8、Bcl-2、Granzyme B等凋亡相关蛋白发生相互作用;本次构建的ASP-Bid重组耻垢分枝杆菌可以表达并分泌目标蛋白,且可增强RAW264.7小鼠巨噬细胞凋亡的比例。结论表达外源基因Bid的重组耻垢分枝杆菌可以促进巨噬细胞凋亡发生,这可为新型结核病预防疫苗的研发提供新的思路与技术。; 逄亚宁杨国平孟余吴利先李光华; 关键词：结核病耻垢分枝杆菌信号肽 BID

促凋亡蛋白NOXA在结直肠癌中的泛素化降解调控机制研究: 背景结直肠癌已成为全球第三大致死性癌症,每年致死病例约占所有癌症死亡人数的十分之一,且发病率及死亡率逐年上升,肿瘤耐药性和异质性仍然是结直肠癌治疗面临的主要挑战。NOXA是一种BH3-only促凋亡蛋白,通过线粒体凋亡途...; 许首芳; 关键词：NOXA 细胞凋亡结直肠癌

参芪复方对GK大鼠骨骼肌线粒体膜电位及相关促凋亡蛋白的影响研究被引量：6: 2021年; 目的探讨参芪复方对自发性糖尿病(Goto-Kakizaki,GK)大鼠骨骼肌线粒体膜电位及相关凋亡蛋白的影响。方法采用高脂饲料喂养GK大鼠,建立糖尿病大鼠动物模型,造模成功后将GK大鼠随机分为模型组、罗格列酮组、参芪复方组,每组10只;10只Wistar大鼠作为空白对照组,普通饲料喂养。罗格列酮组灌胃给予0.67 mg/(kg·d)罗格列酮混悬液,参芪复方组灌胃给予14.33 g生药/(kg·d)参芪复方混悬液,空白对照组、模型组均每日灌胃给予同等体积生理盐水,连续给药8周。采用流式细胞检测线粒体膜电位;RT-qPCR和Western blot检测大鼠腓肠肌凋亡诱导因子(Aapoptosis inducing factor,AIF)、细胞色素C(Cytochrome c,Cyt c)、第二个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活因子(Second mitochondrial activator of caspase/direct IAP binding protein with low PI,Smac/DIABLO)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)的蛋白和mRNA表达情况。结果与空白对照组比较,模型组GK大鼠腓肠肌线粒体膜电位降低(P <0.05),AIF、Cyt c、Smac/DIABLO、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达、mRNA表达增加(P <0.05);与模型组比较,罗格列酮组和参芪复方组线粒体膜电位均升高(P <0.05),罗格列酮组AIF、Cyt c、Smac/DIABLO、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达、mRNA表达均降低(P <0.05),参芪复方组AIF、Cyt c、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达、mRNA表达降低(P <0.05),Smac/DIABLO蛋白表达降低(P <0.05),Smac/DIABLO mRNA表达具有下降趋势,但差异无统计学意义(P> 0.05)。结论参芪复方可通过上调线粒体膜电位,抑制促凋亡蛋白AIF、Cyt c、Smac/DIABLO从线粒体内释放出来,进而抑制Caspase-9、Caspase-3表达,减少骨骼肌细胞凋亡,发挥骨骼肌保护作用。; 曹纪辉吴贤波丁若兰冯树贵朱海燕; 关键词：参芪复方骨骼肌病变凋亡

电针对颅脑损伤大鼠脑组织中促凋亡蛋白Bad、Bak、Bax的影响被引量：3: 2021年; 目的探索电针治疗对颅脑损伤(TBI)大鼠损伤脑组织中诱导细胞凋亡蛋白Bad、Bak、Bax的影响。方法将100只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组(10只)、假手术组(30只)、模型组(30只)、电针组(30只)。采用改良Feeney自由落体法制备TBI大鼠模型,于造模后24h介入电针治疗(取"百会、水沟、内关、曲池、足三里、涌泉"穴,1次/天,共14天),分别于电针干预后3天、7天、14天取材,用免疫荧光法检测损伤脑组织中Bad、Bak、Bax蛋白的表达量。结果电针干预后各时间点,假手术组大鼠损伤脑组织中Bad、Bak、Bax的表达与空白组间相比P>0.05,模型组的表达量均高于假手术组(P<0.05);在干预后7天、14天相应时间点,电针组大鼠损伤脑组织中Bad、Bak、Bax的表达量低于模型组(P<0.05)。结论电针干预可下调TBI大鼠模型损伤脑组织中促凋亡蛋白Bad、Bak、Bax的表达。; 张容超王瑞辉杜旭李娜刘奇郭新荣王东; 关键词：电针颅脑损伤凋亡

编码促凋亡蛋白的核酸的膳食受控表达: 本发明涉及编码促凋亡蛋白的核酸的膳食受控表达。本发明公开了核酸在制造用于在不良事件的情况下消除输注的细胞的药剂中的用途，所述输注的细胞包含所述核酸并且被施用给需要癌症治疗或再生医学的个体，通过向所述个体提供缺乏至少一种必...; 皮埃尔·法富尔努; 文献传递

一种肿瘤细胞耐受促凋亡蛋白质分子数目绝对定量的测量方法: 本发明提供了一种肿瘤细胞耐受促凋亡蛋白质分子数目绝对定量的测量方法。本方法通过EGFP标记促凋亡蛋白质，并通过流式细胞术测量肿瘤细胞所能耐受促凋亡蛋白质分子时的EGFP数值，通过FITC标记的荧光微球以及FITC与EGF...; 戴海明王宏志江海河王姝洁; 文献传递

编码促凋亡蛋白的核酸的膳食受控表达: 本发明涉及用于在个体中编码促凋亡蛋白的核酸的受控表达的核酸，其包括：‑调节性多核苷酸，所述调节性多核苷酸包含最小启动子和至少一种AARE(氨基酸应答元件)核酸，在摄入缺乏至少一种必需氨基酸的膳食后所述调节性多核苷酸在个体...; 皮埃尔·法富尔努; 文献传递

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