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CRISPRa介导的间充质干细胞制备胰岛素分泌细胞的方法
本发明提供了一种胰岛素分泌细胞的制备方法,所述的制备方法包括激活间充质干细胞中的内源转录因子Pdx1、NeuroD1和/或Pax4的表达,使间充质干细胞跨胚层分化,获得的胰岛素分泌细胞可以高效分泌胰岛素。且,所述的制备方...
刘俊王旭林文龙桂智
一种诱导脐带间充质干细胞分泌细胞因子的组合物及其应用
本发明公开了一种诱导脐带间充质干细胞分泌细胞因子的组合物,包括以下重量份的成分:L‑谷氨酰胺3.5‑5.5份、铁苋菜提取物1.4‑3.8份、维生素C7.5‑10份、石杉碱甲3.2‑5.1份、胰岛素10‑15份。本发明提供...
岳俊丽陈敏
一种提高间充质干细胞分泌细胞外囊泡产量的方法及应用
本发明公开了一种提高间充质干细胞分泌细胞外囊泡产量的方法及应用,涉及生物材料、工程化外泌体技术领域,本发明利用压电生物材料产生的无线电信号刺激细胞,增加间充质干细胞分泌细胞外囊泡的产量,不转入外源性基因、无小分子药物、纳...
李秋柏徐柳月范桂芬陈智超任文翔
一种促进CIK细胞分泌细胞因子的体外培养方法及其培育的CIK细胞
本发明涉及细胞培养技术领域。本发明提供了一种促进CIK细胞分泌细胞因子的体外培养方法及其培育的CIK细胞,所述体外培养方法包括如下步骤:(1)将单个核细胞用第一培养液重悬,培养后得到细胞悬液;(2)将细胞悬液中的培养基更...
杨业国苏晓萍刘维康叶茂郑荣杰王仕米邓佐成
重编程诱导犬脂肪间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化
2024年
本研究旨在利用转基因技术诱导脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,AMSCs)分化为胰岛素分泌细胞(insulin producing cells,IPCs),通过干细胞疗法达到临床治疗糖尿病的目的。本试验首先验证了Hnf1b基因在体外诱导犬AMSCs向IPCs分化中的作用,在此基础上联合胰岛细胞发育过程中起关键作用的级联调控因子Pdx1、Ngn3、Pax4、Nkx6.1,组成三种不同的多基因共表达腺病毒感染犬AMSCs,重编程其向IPCs分化,通过检测筛选出最佳诱导组合。结果表明,Hnf1b基因对体外诱导犬AMSCs向IPCs分化具有促进作用。pAdEasy-Hnf1b-Pdx1-Ngn3(A)、pAdEasy-Hnf1b-Pdx1-Ngn3-Pax4(B)、pAdEasy-Hnf1b-Pdx1-Ngn3-Nkx6.1(C)三种组合的多基因共表达腺病毒载体,在感染犬AMSCs 25 d后,A、B、C三组均形成胰岛样细胞团,且B组数量最多,双硫腙染色着色最深;高糖刺激下B组的胰岛素分泌量极显著高于A组和C组。A、B、C三组的胰岛细胞发育相关基因表达量显著升高;B组Pdx1基因的表达量显著高于A组和C组,Pcsk1基因表达量极显著高于C组;Ins基因的表达量显著高于A组。综上所述,Hnf1b基因对体外诱导犬AMSCs向IPCs分化具有促进作用,Hnf1b、Pdx1、Ngn3和Pax4基因联合诱导效率最佳。该研究结果为探究干细胞向IPCs分化的更高效方法提供新参考,也为糖尿病的临床治疗提供新思路。
朱明德陈奕静戴鹏秀张翊华张欣珂
关键词:胰岛素分泌细胞
亲脂性他汀在制备治疗抗体分泌细胞相关自身免疫病药物中的应用
本发明公开了亲脂性他汀在制备治疗抗体分泌细胞相关自身免疫病药物中的应用。本发明证实亲脂性他汀类药物通过抑制RAB蛋白的香叶基香叶基化干扰浆细胞的抗体分泌过程,破坏蛋白稳态,诱发内质网应激(Endoplasmic reti...
陆前进王来尹昊媛蒋娇李骐霖吴骏辉曹淑梅苏晓语李文锐
诱导人脂肪干细胞分化为胰岛素分泌细胞:三种不同诱导分化方案的比较
2024年
目的将脂肪干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞是糖尿病治疗的新策略。目前已报道的诱导分化方案效率差异较大。本研究拟对三种诱导分化方案的分化效率进行比较。方法将第三代脂肪干细胞自聚集成微球,使用三种诱导分化方案(一步诱导法、两步诱导法、三步诱导法)。采用PCR和免疫荧光检测三种方案中关键基因和蛋白的表达水平,通过葡萄糖刺激胰岛素分泌实验检测终产物的功能。结果对比三种方案,三步诱导法诱导出的胰岛素分泌细胞其关键转录因子INS、NKX6.1、PDX1的基因表达量明显增加。关键蛋白C肽和NKX6.1/PDX1在胰岛素分泌细胞中共表达。三步诱导法能显著提高产物的胰岛素分泌量。结论在相同条件下,三步诱导法的分化效率优于其他两种方案。本研究为建立高效、安全的胰岛素分泌细胞诱导分化方案提供了依据。
杨京刘兴然尹茜雅季秋眉阎羽欣黄如林李青峰
关键词:脂肪干细胞糖尿病
一种干细胞培养基及其在诱导干细胞生成胰岛素分泌细胞中的应用
本发明提供了一种干细胞培养基及其在诱导干细胞生成胰岛素分泌细胞中的应用,包括以下组分:肝素钠150‑170μg,维生素E40‑50μg,人重组胰岛素15‑20mg,亚硒酸钠10‑15μg,人转铁蛋白6‑7mg,氢化可的松...
王泰华
MAFA-PDX1过表达慢病毒感染人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞的分化
2024年
背景:干细胞来源胰岛β细胞移植被认为是治疗1型糖尿病的有效手段。人脐带间充质干细胞是理想的细胞来源,但其向胰岛β细胞分化的效率不高。目的:研究MAFA、PDX1修饰促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的潜能。方法:构建MAFA-PDX1过表达慢病毒载体,用细胞形态学、RT-qPCR法、双硫腙染色比较3种方案[方案A:单纯慢病毒组;方案B:先药物(尼克酰胺、β-巯基乙醇)诱导再加慢病毒组;方案C:慢病毒和药物诱导同时进行组]诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的效率和潜能。结果与结论:(1)细胞形态学改变:经3种方案诱导后细胞形态均发生了改变,方案B在诱导第11天细胞聚集生长最为明显,出现聚集生长的胰岛样细胞团;(2)RT-qPCR检测胰岛相关基因的表达差异:同一诱导时间点3种方案横向比较,在诱导第5天,方案C的MAFA和PDX1基因表达量最高,方案B的GCG基因表达量最高;在诱导第11天,方案B的MAFA、PDX1基因表达量以及INS和GLUT2基因表达量最高;(3)双硫腙染色鉴定锌离子:3种方案诱导第11天部分细胞被双硫腙染成棕红色,其中方案B中部分小岛状细胞被染成棕红色,颜色较深(阳性表达);(4)结果表明,MAFA和PDX1共过表达可促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化;MAFA-PDX1基因修饰联合药物诱导方案优于单纯基因修饰方案。
邱晓燕李碧欣黎敬弟范垂钦马廉王鸿武
关键词:脐带间充质干细胞MAFA胰岛素分泌细胞
Pdx-1、Ngn3联合MafA诱导干细胞分化为胰岛素分泌细胞移植治疗1型糖尿病大鼠的效果
2024年
目的通过胰十二指肠同源盒1(Pdx-1)、神经元素3(Ngn3)联合V型肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源基因A(MafA)共转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导分化为胰岛素分泌细胞(IPCs),移植治疗1型糖尿病大鼠并观察其疗效。方法Pdx-1、Ngn3和MafA共转染BMSCs诱导为IPCs,链脲佐菌素(STZ)制备45只1型糖尿病SD大鼠模型,BMSCs组(15只)肾被膜下移植2×10^(6) BMSCs,IPCs组(15只)大鼠肾被膜下移植2×10^(6) IPCs,sham-operation组(15只)大鼠肾被膜下注入等量生理盐水,另取15只健康SD大鼠肾被膜下注入等量生理盐水作为normal组。监测各组大鼠移植第0、7、14、21、28 d空腹血糖及体重;第21天对各组大鼠均行葡萄糖耐量试验;第28天取各组大鼠肾脏组织进行免疫组化。结果BMSCs和IPCs组大鼠血糖随时间下降,移植第21天两组大鼠空腹血糖低于移植第0天,且均低于同期sham-operation组(P<0.05),移植第28天IPCs组大鼠空腹血糖低于BMSCs组(P<0.05)。糖尿病大鼠中IPCs组和BMSCs组腹腔葡萄糖耐量实验曲线下面积小于sham-operation组,且IPCs组曲线下面积最小(P<0.05)。BMSCs组和IPCs组大鼠肾脏组织可见棕色荧光的胰岛素表达,且IPCs组胰岛素荧光光密度高于BMSCs组(P<0.05)。结论Pdx-1-Ngn3联合MafA诱导BMSCs形成的IPCs移植后在糖尿病大鼠体内可降低糖尿病大鼠的空腹血糖。
闫淑芳袁慧娟
关键词:胰岛素分泌细胞1型糖尿病

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供职机构:福州迈新生物技术开发有限公司
研究主题:蛋白单克隆抗体 分泌 细胞株 分泌细胞 小鼠
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作品数:246被引量:1,020H指数:20
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研究主题:扬子鳄 消化道 内分泌细胞 免疫组织化学 免疫组织化学定位