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咖啡酸乙酯生物合成体系的构建及优化
2025年
咖啡酸乙酯具有多种药理活性,但天然来源受限,化学合成存在环境隐患,利用合成生物技术开发咖啡酸乙酯的微生物合成更符合绿色经济要求。通过构建咖啡酸乙酯从头合成途径、强化酰基转移酶表达、优化2-乙醇途径和丙酮途径等策略,实现咖啡酸乙酯的酵母合成,酵母工程菌S4发酵120 h后咖啡酸乙酯产量达到(98.56±4.56)μg/L。平衡2种前体咖啡酰辅酶A和2-乙醇供应,在大肠杆菌中表达酪氨解氨酶(TAL)、羟基肉桂酰基转移酶(HCT)和辅酶A连接酶(4CL)形成咖啡酰辅酶A合成工程菌强化咖啡酰辅酶A供应,与酵母工程菌S4构建混菌发酵体系,混菌培养条件优化后咖啡酸乙酯产量达到(667.64±10.26)μg/L。
张根林李媛媛邱笛赵金雨
关键词:咖啡酸苯乙酯生物合成混菌发酵2-苯乙醇
咖啡酸乙酯光响应脂质体的制备方法及应用
本发明提供了咖啡酸乙酯光响应脂质体的制备方法及其应用。本发明中,将咖啡酸乙酯(Caffeic acid phenethyl ester,CAPE)或其与巯基胆固醇的接枝复合物分别嵌入磷脂双分子层中,获得一种新型光响应...
张雨彤孔洁石泽瑜于文佳包晨曦蒋丽刚
咖啡酸乙酯对硫芥诱导小鼠急性肺损伤的保护作用研究
2025年
目的:针对小鼠由糜烂性毒剂2-氯乙基乙基硫醚(CEES)暴露引起的急性肺损伤,研究咖啡酸乙酯(CAPE)的保护作用及相关机制。方法:40只雄性C57BL/6小鼠,采用雾化吸入10%的CEES构建急性肺损伤模型,染毒1、25和49 h后分别给予CAPE(10 mg/kg)进行治疗。染毒后第3天检测小鼠肺功能指标呼吸时间(Ti)、吸气时间(Te)和松弛时间(Tr)和每分钟通气量(MVb);然后处死小鼠,采集血清和肺组织,检测体质量和肺体比,HE染色后进行组织病理学检测;使用DHE荧光探针检测肺组织活性氧(ROS)水平;试剂盒检测丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;RT-qPCR法检测肺组织抗氧化分子CAT、促炎分子TNF-α和IL-6的mRNA表达水平;ELISA试剂盒检测血清炎症因子TNF-α和IL-6含量。结果:CEES雾化吸入3 d后与CEES染毒组小鼠相比,CAPE治疗组小鼠肺功能指标Ti、Te、Tr和MVb显著恢复(均为P<0.05),肺组织病理损伤程度减轻,同时肺组织ROS水平和MDA含量显著减少,伴有CAT和SOD含量增加(均为P<0.05)。此外,CAPE治疗组小鼠的肺组织及血清TNF-α和IL-6含量较CEES染毒组显著降低(均为P<0.05)。结论:CAPE通过抗炎抗氧化作用可有效缓解CEES诱导的小鼠急性肺损伤,可能是糜烂性毒剂的候选治疗药物。该研究为糜烂性毒剂中毒治疗的干预措施和潜在治疗药物研究奠定了基础。
曹猛王振高天于卫华刘江正孔德钦吴昊龙子王钊刘瑞海春旭
关键词:糜烂性毒剂咖啡酸苯乙酯炎症氧化应激急性肺损伤
咖啡酸乙酯在改善高碳水化合物饲料对鱼类生长和代谢负面影响中的应用
本发明公开了咖啡酸乙酯在改善高碳水化合物饲料对鱼类生长和代谢负面影响中的应用,属于水产养殖技术领域。本发明基于高碳水化合物饲料配方中加入咖啡酸乙酯,能够显著增强草鱼和鲈鱼脂肪组织,肝脏和肌肉对葡萄糖的代谢能力,缓解脂...
孙健卫明魁袁想通田智琦宋磊李汉东吉红何艮
一种双响应槲皮素-咖啡酸乙酯脂质复合凝胶及其制备方法和应用
本发明公开了一种双响应槲皮素‑咖啡酸乙酯脂质复合凝胶及其制备方法和应用。本发明首先运用微乳‑脂质级联载药技术将槲皮素和咖啡酸乙酯共载至脂质体中,再将该脂质体分布于壳聚糖、泊洛沙姆407和聚N‑异丙基丙烯酰胺组成的双响...
郭健张成栋李梦洁费雅晨桂双英彭成军李佳鑫李梦
咖啡酸乙酯在制备促进体外胚胎发育产品中的应用
本发明公开了咖啡酸乙酯在制备促进胚胎发育产品中的应用,属于体外胚胎技术领域,涉及哺乳动物植入前胚胎体外培育技术。本发明首次公开了咖啡酸乙酯在制备提高体外胚胎发育能力药物中的应用,此前未见报道咖啡酸乙酯与体外胚胎发育...
许永男 黄楚漫 李英花 黄慧枚 金南衡
咖啡酸乙酯抑制艰难梭菌毒素TcdB活性的作用及机制研究
艰难梭菌(Clostridioides.difficile)是一种专性厌氧、产芽孢的革兰氏阳性细菌,是医院获得性感染的主要原因。艰难梭菌在临床上常导致抗生素相关性肠道疾病,包括轻度腹泻和危及生命的假膜性结肠炎,其广泛存在...
郭岩
关键词:艰难梭菌咖啡酸苯乙酯
一种双响应槲皮素-咖啡酸乙酯脂质复合凝胶及其制备方法和应用
本发明公开了一种双响应槲皮素‑咖啡酸乙酯脂质复合凝胶及其制备方法和应用。本发明首先运用微乳‑脂质级联载药技术将槲皮素和咖啡酸乙酯共载至脂质体中,再将该脂质体分布于壳聚糖、泊洛沙姆407和聚N‑异丙基丙烯酰胺组成的双响...
郭健 张成栋 李梦洁 费雅晨桂双英彭成军 李佳鑫李梦
一种仿生木质化过程制备聚乙烯醇/咖啡酸乙酯复合膜的方法
本发明公开了一种仿生木质化过程制备聚乙烯醇/咖啡酸乙酯复合膜的方法,包括如下步骤:制备聚乙烯醇溶液,待其冷却后,将咖啡酸乙酯的丙酮或乙醇溶液加入聚乙烯醇溶液中,通过搅拌使咖啡酸乙酯均匀分散,得到分散液;将酶溶液加入...
吕焱房桂干邓拥军吴珽马文灿黄晨焦健田庆文梁芳敏李炯炯
咖啡酸乙酯对朊病毒体外复制、扩增和纤维形成的抑制作用研究
2024年
目的探究咖啡酸乙酯(CAPE)对朊病毒(PrPSc)复制、扩增及纤维形成的影响及可能的机制。方法通过CCK8实验检测CAPE处理3、7 d后朊病毒感染细胞模型SMB-S15的细胞活力,得出CAPE对SMB-S15的最大安全浓度;选取安全范围内的浓度处理细胞,利用蛋白质免疫印迹方法分析CAPE处理前后细胞内PrPSc的含量变化。利用蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)技术和蛋白质免疫印迹方法检测CAPE处理前后扩增产物中PrP^(Sc)的含量变化。利用实时震动蛋白诱导扩增(RT-QuIC)技术检测CAPE处理前后朊蛋白纤维形成的变化情况。通过分子相互作用检测CAPE与小鼠重组全长朊蛋白的结合能力。结果 CCK8细胞活力实验结果显示:1 μmol/L CAPE处理细胞3、7 d时细胞存活率与对照组相比,差异无统计学意义(均P>0.05),当CAPE浓度超过1 μmol/L时,CAPE处理细胞3、7 d细胞存活率降低,与对照组之间差异均存在统计学意义(均P<0.05),因此1 μmol/L为CAPE处理SMB-S15细胞的最大安全浓度。蛋白质免疫印迹实验结果显示:CAPE处理3、7 d均可检测到SMB-S15细胞中PrPSc含量的降低(均P<0.05)。PMCA实验产物通过蛋白质免疫印迹方法检测结果显示:经CAPE处理后,适应株SMB-S15、139A、ME7的PMCA扩增产物中PrPSc含量(相对灰度值)降低,与对照组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。RT-QuIC实验结果显示:CAPE处理后139A、ME7、SMB-S15小鼠适应株和朊病毒感染细胞SMB-S15在反应中形成朊蛋白纤维(ThT峰值)均降低,且CAPE对不同种子朊蛋白纤维的抑制程度差异有统计学意义(均P<0.05),其中对ME7的抑制作用更明显。分子相互作用结果显示:CAPE与鼠源重组朊蛋白存在明显的分子结合,平衡解离常数KD为(2.92±0.41)×10^(-6) mol/L。结论 CAPE对PrPSc体外复制、扩增和纤维形成均具有抑制作用,可能与CAPE和朊蛋白特异性结合有关。
晁志悦贾筱溪曾嘉锋武月章肖康高利萍石琦董小平陈操
关键词:咖啡酸苯乙酯朊病毒朊蛋白

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