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一种四环素调控蛋白突变体基因及其在调控基因表达和环境检测中的应用: 一种四环素调控蛋白突变体基因及其在调控基因表达和环境检测中的应用，涉及基因工程全菌生物传感器及基因表达调控领域，四环素类抗生素诱导型操纵子基因具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。该四环素类抗生素诱导型操纵子是野...; 吴李君李顺兰陈少鹏陈东东陶诗频徐升敏肖翔

大黄鱼细胞适用四环素调控系统的构建与验证: 2024年; 构建大黄鱼(Larimichthys crocea)细胞适用的四环素调控系统,为大黄鱼蛋白质功能研究提供可靠工具。以pEGFP-N1质粒的CMV增强子/启动子替换四环素调控载体pTRE3G-MCS-EGFP-3×FLAG-Tetone-Puro(简称pTRE3G)转录激活子(rtTA)的EF-1α启动子及其下游5′-长末端重复序列(5′-LTR),构建重组载体pTRE3G-CMV;转染大黄鱼头肾细胞系YCK-hk细胞,Dox诱导EGFP表达,验证pTRE3G-CMV在大黄鱼细胞中驱动外源基因表达的可靠性。成功构建四环素调控载体pTRE3G-CMV;pTRE3G-CMV质粒转染的大黄鱼YCK-hk细胞经Dox诱导表达EGFP,表明CMV增强子/启动子在YCK-hk细胞中正常驱动rtTA表达;pTRE3G-CMV质粒转染YCK-hk细胞效率低(<1%),经嘌呤霉素筛选后EGFP表达阳性细胞率上升至约30%,表明嘌呤霉素能有效筛选转染成功细胞,提示可结合单克隆筛选建立稳转细胞系。研究构建的四环素调控载体pTRE3G-CMV在大黄鱼细胞中正常表达外源基因,可用于大黄鱼蛋白质功能研究。; 葛金鑫颜廷鼎王克智刘也何志巧申望; 关键词：大黄鱼重组蛋白表达

一种四环素调控蛋白突变体基因及其在调控基因表达和环境检测中的应用: 一种四环素调控蛋白突变体基因及其在调控基因表达和环境检测中的应用，涉及基因工程全菌生物传感器及基因表达调控领域，四环素类抗生素诱导型操纵子基因具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。该四环素类抗生素诱导型操纵子是野...; 吴李君李顺兰陈少鹏陈东东陶诗频徐升敏肖翔

四环素调控的重组酵母细胞的构建及对猪尿中四环素类残留的筛检研究: 目的:　　构建四环素反应元件(Tetracychne Response Element，TRE)调控的重组基因酵母细胞，用于快速检测动物食品中四环素类抗生素的残留。　　方法:　　1.用PCR方法从酵母DNA提取液中扩增G...; 徐秀举; 关键词：四环素类抗生素生物检测; 文献传递

四环素调控livin RNA干扰系统对肺癌移植瘤生长的影响被引量：2: 2018年; 目的:探讨四环素调控(Tet-on)livin RNA干扰系统对肺癌移植瘤生长的影响,以期寻找更优的肺癌干预调控系统。方法:构建Tet-on livin shRNA慢病毒载体,在裸鼠右上肢背部皮下注射肺腺癌A549株细胞建立肺癌裸鼠皮下移植瘤模型,以Tet-on livin shRNA慢病毒载体注射瘤体干预livin表达,并以四环素腹腔注射诱导处理,了解Tet-on调控livin RNA干扰效果并观察其抑制肺癌细胞增殖情况。结果:经四环素诱导,Tet-on livin RNA组移植瘤组织中livin蛋白表达明显低于CTL组及Tet-onNC组,且Tet-on-livin RNA组瘤体质量明显低于CTL组及Tet-on-NC组[(5.31±0.86)vs(8.22±0.63)、(7.17±0.54)g,P<0.05];提示该调控系统可显著下调livin的表达,并抑制肺癌皮下移植瘤的生长,且该调控系统毒副作用小,未发现裸鼠死亡。结论:Tet-on livin RNA干扰系统在四环素诱导下可抑制肺癌生长,具有靶向性、可调控的特点,为以livin蛋白为靶点的肺癌靶向治疗研究提供重要的研究工具。; 李鸿茹涂洵崴翁丽红陈愉生; 关键词：LIVIN基因四环素调控 RNA干扰肺癌 A549细胞

四环素调控CGRP基因表达的腺相关病毒的构建及鉴定: 目的:　　目前原发性高血压基因治疗有降低基因表达和诱导基因表达两种策略，本研究通过基因工程分子技术构建含有CGRP基因的重组腺相关病毒载体。为研究CGRP在自发性高血压大鼠体内过表达的降压和靶器官保护效果做准备。构建含有...; 张航; 关键词：重组腺相关病毒降钙素基因相关肽基因表达

基于四环素调控系统的叶绿体启动子在大肠杆菌中活性检测: 2017年; 旨在研究四环素调控系统在叶绿体基因工程中调控启动子活性。以四环素基因及四环素特异性识别序列的核心操控区为基础,首先合成带有四环素核心操控区的prrn O1O2启动子,通过酶切连接的方法连接到表达载体Bio3-GFP,并在大肠杆菌中验证该启动子的活性。结果表明,在该启动子的驱动下GFP基因表达使菌落呈明亮绿色;构建四环素诱导下GFP基因的表达载体Bio3-Tet R-prrn O1O2-GFP,筛选出适应大肠杆菌生长的最高四环素使用浓度为5μg/m L;然后构建四环素调控系统下的GFP表达载体,在未加入四环素时,prrn O1O2启动子的功能被抑制,加入四环素后,GFP基因表达出绿色荧光蛋白。说明利用四环素调控系统可以在大肠杆菌中控制叶绿体启动子prrn O1O2的活性,从而避免了核基因组对质体基因组的调控干扰,为进一步利用质体基因工程育种提供有效的方法和途径。; 于晓俊曹绍玉董玉梅毕保良张应华许俊强; 关键词：叶绿体启动子大肠杆菌

靶向长链非编码RNA TUC338的人工合成四环素调控系统在膀胱癌细胞中的作用: 2016年; 目的:探讨应用四环素调控长链非编码RNA TUC338在膀胱癌细胞内的表达及抗肿瘤作用。方法:将针对TUC338的sh RNA序列插入到四环素诱导系统的下端,构建四环素诱导的TUC338 sh RNA并转染细胞。应用实时荧光定量PCR检测细胞内TUC338的表达水平,采用CCK8和半胱天冬酶3酶联免疫吸附测定法的方法分别检测细胞的增殖和凋亡。结果:四环素诱导的TUC338 sh RNA可以降低TUC338的表达,抑制膀胱癌细胞增殖和促进膀胱癌细胞的凋亡。结论:通过构建四环素基因表达调控系统,可精确控制TUC338在膀胱癌细胞内表达,并发挥杀伤肿瘤细胞功能,为进一步构建特异、高效的膀胱癌合成生物治疗器件提供理论基础。; 牟丽莎朱书蔡志明; 关键词：长链非编码RNA 膀胱癌

四环素调控人Numb基因过表达慢病毒载体的分步构建: 目的：　　本课题旨在构建含有四环素调控人 Numb基因过表达调控组份的Lenti-EF1a-RTTA-IRES-Puro慢病毒载体，以及构建含有四环素调控人Numb基因过表达反应组份的Lenti-EF1a-EGFP-TR...; 张娟; 关键词：四环素基因过表达慢病毒载体干细胞; 文献传递

四环素调控的介导bFGF重组腺相关病毒的构建及体外实验被引量：1: 2015年; 目的:制备携带碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的病毒载体,能被四环素调控表达。方法:构建重组质粒pAAV-S3-bFGF,生产重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF,并感染小鼠颅骨前成骨细胞MC3T3-E1,实时定量PCR检测强力霉素(doxycycline,Dox)调控下rAAV2-tet-off-bFGF对MC3T3-E1中成骨相关因子的影响。结果:生产出高滴度及纯度的重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF,能被Dox调控,感染MC3T3-E1后能促进胞内成骨相关因子的表达升高。结论:这种重组病毒rAAV2-tet-off-bFGF能在Dox调控下有效传递外源基因,为骨组织工程中的种子细胞提供基因传递载体。; 宋珂陈美玲石琦青莹曹颖光; 关键词：腺相关病毒基因传递

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