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‘窄冠白杨1号’遗传转化体系建立与抗虫基因转化
2024年
‘窄冠白杨1号’(Populus leucopyramidalis 1)是一种冠形窄、耐盐碱的优良白杨派无性系。由于缺乏其遗传转化体系,因此无法通过基因工程手段对其进行遗传改良。该研究以‘窄冠白杨1号’为材料,建立了农杆菌介导的遗传转化体系,并获得了较高的遗传转化效率。首先将组培苗继代培养不同时间段(35、45、55、65 d),分别取其3种组织(叶片、叶柄、茎段)以对比分化能力的强弱,确定了继代45 d后的叶片具有最强的分化能力,其增殖倍数为8.77。随后,使用继代45 d后的叶片作为遗传转化的材料,研究不同侵染条件对转化率的影响,设立了菌液浓度、侵染时间和共培养时间各3个梯度的正交试验,对这3个因素进行最佳水平筛选,通过PCR检测和GUS染色鉴定转基因株系。结果表明‘窄冠白杨1号’遗传转化体系的最佳组合为:菌液浓度OD600=0.4,侵染时间15 min,共培养时间2 d,在该组合下转化率最高可达54.23%。最后,利用该遗传转化体系获得了转BtCry3Aa抗虫基因‘窄冠白杨1号’株系,证明该体系可以做为‘窄冠白杨1号’遗传改良的有效方法。
王冬月王如月孙茂桐刘翠双李际红
关键词:遗传转化体系
口服Ag85A基因转化S2疫苗株的研制及免疫原性研究
隋新
Bt和Bar基因转化对水稻不同组织生态位微生物群落组成及潜在功能影响
2024年
【目的】转Bt基因和Bar基因植物的微生态效应是环境安全评价的重要因素,但关于Bt基因和Bar基因转化引起的水稻基因型改变对水稻不同组织生态位微生物群落组成和潜在功能的影响还无系统研究。【方法】以转Bt基因和Bar基因水稻T1C-1及其亲本对照Minghui63为研究对象,基于细菌16S rRNA基因和真菌ITS高通量测序技术,分析抽穗期T1C-1和Minghui63根际土壤微生物以及根、茎、叶内生菌的群落结构和潜在功能。【结果】细菌和真菌群落多样性在水稻不同组织生态位之间发生显著变化,地下部分组织生态位(根际土壤和根系)微生物多样性显著高于地上部分(叶和茎)。T1C-1显著影响叶片内生真菌的香农指数和辛普森指数,而对茎和根的内生菌以及根际土壤微生物多样性无显著影响。叶片内生真菌曲霉菌属(Aspergillus)和篮状菌属(Talaromyces)相对丰度在T1C-1显著增加,推测其参与碳素代谢、能量代谢和转录作用酶合成等过程。T1C-1和Minghui63微生物群落关联网络分析表明,T1C-1的平均聚类系数和平均度显著高于Minghui63,因而T1C-1提高了相关微生物群落网络复杂程度。通过重建未观测状态对群落进行系统发育研究(phylogenetic investigation of communities by reconstruction of unobserved states,PICRUSt2),对叶片内生真菌功能酶基因进行功能预测,相对于Minghui63,T1C-1显著改变了碳素代谢、脂类代谢和能量代谢等途径。【结论】相较于根际土壤,叶片内生真菌的群落组成和潜在功能对T1C-1更敏感。尽管如此,T1C-1并未导致叶片内生真菌的多样性指数降低。为了更准确地评估转基因植物的微生态效应,我们需要加强对不同组织生态位内生菌多样性的关注。
葛蕾王璐瑶郭官清宋丽莉王翠汪小福毛婵娟李鹏
关键词:内生菌生态位根际微生物BT基因
将外源基因转化到荷花中进行稳定表达的方法
一种将外源基因转化到荷花中进行稳定表达的方法,其特征在于,通过制备含有外源基因的农杆菌菌液并将其施加至成熟时期的荷花雌蕊上,通过人工授粉的方式获得荷花种子,实现稳定表达。本发明在受体植物原位进行,避开了荷花组织培养和离体...
张大生田代科刘凤栾刘青青陈青
一种提高产微生物多糖菌株基因转化效率的方法
本发明公开了一种提高产微生物多糖菌株基因转化效率的方法,通过利用多糖降解酶处理产微生物多糖菌株,解除多糖对菌株菌体的包裹,获得菌体细胞,制备感受态细胞;然后将外源质粒通过电击转化转入经处理后的感受态细胞;其中,所述多糖降...
李莎黄劲松李柯铖邱益彬徐虹黄巍巍
一种利用马蔺DFR基因获得基因转化植物的方法
本发明提供了一种表达马蔺DFR基因的重组表达载体,以及包含该重组表达载体的宿主细胞、基因转化的植物细胞和植株,以及它们在培育合成蓝色花青素的植物方面的应用,尤其是培育新花色或新果色的植物品种方面的应用,特别是培育蓝色花卉...
张虹陈任虎娟路国栋刘慧
农杆菌介导CBF基因转化木纳格葡萄的分析
2023年
为了建立木纳格葡萄稳定、可行的遗传转化体系,本研究以木纳格葡萄的叶片和叶柄为受体材料,分析卡那霉素(Kan)、头孢霉素(Cef)浓度以及筛选方式对木纳格葡萄遗传转化效率的影响,且通过农杆菌介导法转化CBF基因,并对获得的抗性植株进行PCR检测。结果表明,以叶片、叶柄为外植体,Cef的最适浓度为300 mg/L,Kan的临界浓度为5 mg/L,延迟筛选法更适合遗传转化,可减少抑制作用。最终共获得12株抗性植株,经过PCR检测发现5株为阳性转基因植株,初步证明CBF基因已经导入到木纳格葡萄中,遗传转化体系建立成功。该遗传转化体系的建立,为葡萄的基因改良提供了技术支持。
代培红徐明刘超罗淑萍李月
关键词:木纳格葡萄CBF基因
一种利用胞外聚合物抑制抗生素抗性基因转化的方法
本发明公开了一种利用胞外聚合物抑制抗生素抗性基因转化的方法,在含有感受态菌和抗生素抗性基因的微生物培养体系中加入胞外聚合物,或者在含有感受态菌和抗生素抗性基因的微生物培养体系中分别加入胞外聚合物组分以及不同氧化还原状态的...
盛国平王丽袁丽
裸燕麦硬度相关基因Vin-1C6基因转化与AATI基因克隆
大粒裸燕麦(Avena nuda L.,2n=6x=42)是禾本科燕麦属一年生草本植物,起源于中国,是重要的粮饲兼用作物。燕麦籽粒硬度与其在收获、清洗、脱粒和脱壳过程中的破损密切相关,对燕麦的加工品质和食用品质有着重要影...
王轲
关键词:燕麦籽粒硬度硬粒小麦
农杆菌介导拟南芥AtNPR1基因转化黄瓜提高抗病性的研究
黄瓜被认为是全球重要的蔬菜植物,它的营养价值十分丰富。然而,它极易遭受各种病虫害的侵袭,导致产量大幅度降低。为了有效地防治黄瓜病害,目前采用的方法主要是化学农药和培育抗病品种等,利用抗病基因来培育广谱持久的抗病品种是较为...
冯向君
关键词:黄瓜转基因抗病性

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姚泉洪
作品数:333被引量:1,027H指数:15
供职机构:上海市农业科学院
研究主题:基因 终止子 毕赤酵母 蛋白质序列 拟南芥
章镇
作品数:454被引量:3,976H指数:33
供职机构:南京农业大学园艺学院
研究主题:果梅 苹果 葡萄 基因 克隆
李宝健
作品数:166被引量:1,892H指数:25
供职机构:中山大学生命科学学院
研究主题:水稻 外源基因 基因表达 基因工程 转基因水稻
胡赞民
作品数:189被引量:599H指数:18
供职机构:中国科学院遗传与发育生物学研究所
研究主题:基因 椭圆小球藻 小球藻 染色体 植物
张宪省
作品数:176被引量:885H指数:17
供职机构:山东农业大学
研究主题:小麦 基因 基因转化 基因表达 反转录