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转座酶用于改善转基因表达和核定位的用途: 本发明涉及利用转座酶增加细胞群中目的转基因的表达和/或增加细胞群中目的转基因的核定位的方法。; A·桑切斯-梅希亚斯加西亚M·盖尔卡戈尔M·帕拉斯马西米亚

S100A4核定位在胰腺癌转移中的作用与机制研究: 2024年; 目的:研究S100A4核定位在胰腺癌(pancreatic cancer,PC)转移中的作用与机制。方法:利用PC病程进展的组织芯片,通过免疫组化和HALO数字病理精准分析平台等技术,定量S100A4在组织细胞,特别是胞核中的表达情况,统计分析各检测指标与临床参数及生存期之间的关系。通过分子结构信息学分析、质粒构建与转染以构建基因调控的不同分组细胞研究模型;利用核质蛋白分离、免疫共沉淀、Western blot、划痕实验、Transwell实验、靶向剪切及转座酶技术(cleavage under targets and tagmentation,CUT&Tag)等研究S100A4核定位在PC转移中的作用与机制。结果:S100A4的高表达及其核定位与PC的T、N分期和不良预后正相关。PC细胞中S100A4核定位受小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)修饰调控,泛素结合酶9介导了PC细胞中S100A4的K22和K96位点与SUMO1结合,并通过SUMO特异性蛋白酶1实现去SUMO化,动态平衡PC细胞中S100A4的SUMO化修饰水平;调控S100A4蛋白的SUMO化修饰可改变PC细胞的体外转移能力;CUT&Tag测序结果证明S100A4核定位参与调控与肿瘤转移功能相关的基因网络。结论:S100A4核定位可提示PC预后不良,有望成为临床治疗方案制定的重要依据。发现阻断或抑制S100A4核定位的办法,可能成为抑制PC转移,特别是早期转移,改善PC患者预后的新靶点。; 陈露张静静时坚刘雪昂袁昊田蕾肖斌朱毅李烜; 关键词：胰腺癌 S100A4 SUMO化修饰核定位

核定位CBFβ基因重组腺相关病毒载体的构建与鉴定: 2023年; 目的构建携带核定位信号的核结合因子(nuclear location signal core binding factor beta, NLS-CBFβ)的重组腺相关病毒载体,从而实现体外诱导关节液间充质干细胞成软骨分化。方法使用分子生物学方法将腺相关病毒载体与NLS-CBFβ基因相结合,构建pAAV-NLS-CBFβ-RFP表达质粒;采用PEI转染法将pAAV-NLS-CBFβ-RFP表达质粒和pAAV-RC、pAAV-Helper质粒共转染至AAV-293细胞中,包装并生产携带CBFβ的重组腺相关病毒rAAV-NLS-CBFβ-RFP,进一步将病毒感染人关节液来源间充质干细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测CBFβ基因在细胞内的表达水平。结果双酶切及DNA测序证明NLS-CBFβ已成功构建到pAAV-NLS-CBFβ-RFP表达质粒中,AAV-293细胞表达红色荧光蛋白提示共转染成功,包装的重组腺相关病毒rAAV-CBFβ-RFP感染人关节液间充质干细胞后,能显著增加细胞中CBFβ基因的表达水平。结论携带NLS-CBFβ重组腺相关病毒的包装成功,并能在人关节液间充质干细胞中有效转染和表达,为进一步探索rAAV-NLS-CBFβ诱导间充质干细胞成软骨分化的研究提供了实验基础。; 关天富段莉王大平; 关键词：核定位信号核结合因子腺相关病毒软骨分化

KPNB1介导SIX2核定位和泛素化在肾癌发生发展中的机制研究: 肾脏发育过程中发挥重要作用的转录因子SIX2在肾癌中被异常激活对于肾癌的发生发展具有重要的作用。在肾癌中,SIX2表达量的异常升高能够通过增强肾癌细胞的迁移和侵袭能力来促进肾癌的转移。然而,目前对于SIX2的上游调控及核...; 田大煜; 关键词：核定位泛素化肾癌

核定位的TEFM通过ROS介导AKT/mTOR信号通路促进脑胶质瘤细胞增殖: 线粒体转录延伸因子(Mitochondrial transcription elongation factor,TEFM)在调控线粒体基因的转录延伸及RNA加工方面起着重要的作用,是调控线粒体DNA复制与转录转换的关键分...; 邹亚艳; 关键词：脑胶质瘤 ROS AKT/MTOR

应激诱导小鼠抑郁样表型与Tet2核定位的关系研究: 背景及目的:抑郁症是一种复杂的慢性疾病，目前抑郁症的发生机制尚不清楚。早期对抑郁症的机制研究都聚焦于遗传因素，但既往研究提示遗传因素对抑郁症进程的影响仅占35％。这表明其他因素在抑郁症的发生过程中可能起到更重要的作用。近...; 张倩; 关键词：核定位应激条件免疫功能

经由基因调节多肽的条件性核定位的基因调节: 本公开提供了用于调节靶多核苷酸在细胞中的表达的系统。该系统可包含嵌合多肽，该嵌合多肽包含与异源核定位域框内融合的基因调节多肽。该异源核定位域可以是可操作的，以在被活性细胞信号传导途径激活后将嵌合多肽移位至细胞核。该细胞信...; 刘佩琪汪建斌

猪细小病毒NS1蛋白65-133位氨基酸缺失对其核定位的影响被引量：5: 2020年; 为了探究猪细小病毒NS1蛋白入核机制,通过生物信息学网站预测PPV NS1核定位序列,根据GenBank上传的PPV非结构蛋白NS1的序列设计NS1扩增引物和一系列重叠PCR引物,以河南省动物性食品安全重点实验室保存的猪细小病毒DNA为模板,扩增NS1和缺失突变体基因,构建真核表达重组质粒pCAGGS-HA-NS1、pCAGGS-HA-NS165-133aaDel、pCAGGS-HA-NS1207-267aaDel。将其转染至PPV易感猪源细胞系PK-15细胞,通过免疫荧光和Western-blot鉴定NS1和不同的NS1缺失突变体在细胞内的核定位情况。结果表明,pCAGGS-HA-NS1、pCAGGS-HA-NS165-133aaDel、pCAGGS-HA-NS1207-267aaDel编码蛋白均成功表达。免疫荧光和Western-blot显示NS1和NS1207-267aaDel蛋白定位于细胞核,而NS165-133aaDel蛋白的细胞定位较NS1发生改变,由细胞核定位改变为细胞质定位,说明PPV NS1蛋白65-133位氨基酸缺失能改变其在细胞内的核定位,PPV NS1蛋白核定位序列NLS存在于NS1的65-133aa处。; 张驰徐盟龙袁一心王朋涛靳晓慧魏战勇; 关键词：猪细小病毒 NS1蛋白核定位

RBM3分子突变对其核定位和神经保护功能的影响: 背景　　RNA结合基序蛋白3(RBM3)是一种冷休克蛋白，主要定位于细胞核中，具有许多重要的生物学功能，如神经保护。但其神经保护作用的分子发生机制并不清楚。研究表明其他多个具有RNA结合基序(RRM)或富含精氨酸-甘氨酸...; 雷冰冰; 关键词：RRM 细胞定位神经保护; 文献传递

雌激素受体α抑制剂MPP在小鼠囊胚形成和滋养层干细胞中影响YAP核定位被引量：1: 2019年; 目的研究雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)抑制剂甲基-哌啶-吡唑(methyl-piperidino-pyrazole,MPP)在小鼠桑葚胚和滋养层干细胞(trophoblast stem cells,TSCs)中对YAP的影响。方法收集昆明(kunming,KM)小鼠8-细胞胚,置于0μmol/L(对照组)和5μmol/L(实验组)MPP中培养,分别于8h、12h和24h后收集各组桑葚胚,采用免疫荧光技术观察YAP表达,采用Real Time-PCR检测MPP处理24h后Yap mRNA表达变化;将小鼠TSCs置于0μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L MPP中培养,48h后观察细胞形态改变,分别检测Sox2、YAP、Cdx2 mRNA和蛋白表达水平。结果小鼠8-细胞胚经MPP处理24h后,桑葚胚YAP蛋白核定位水平降低,Yap mRNA水平无显著改变;经MPP处理48h后,5μmol/L组小鼠TSCs细胞出现细胞团块,10μmol/L组细胞增殖明显受抑制;与对照组相比,5μmol/L组细胞Sox2 mRNA表达水平升高,Yap和Cdx2 mRNA水平无显著改变,团块状细胞中的YAP蛋白失去明显的核内定位,SOX2和CDX2阳性细胞的表达更加密集。结论 ERα在小鼠桑葚胚和TSCs中调控YAP核定位,其在TSCs细胞中的作用与CDX2和SOX2的表达有关。; 许颂华朱灵华刘玥王晓江钟玉环苏杨许丽旋王世鄂; 关键词：雌激素受体Α

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