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搜索到1652篇“ 胰岛素降解酶“的相关文章

胰岛素降解酶突变体T142A的原核表达及其活性检测: 2023年; 目的原核表达胰岛素降解酶(insulin-degrading enzyme,IDE)突变体T142A,并检测其活性。方法结合多序列比对结果和IDE底物共晶体结构,预测IDE的β6-strand结构中的活性残基。采用点突变技术将IDE的第142位苏氨酸替换为丙氨酸,构建重组质粒ppSUMO-T142A,通过E.coli系统表达后,经镍离子柱亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析纯化,获得突变体T142A,荧光法测定其活性。结果 IDE氨基酸序列在16个物种间高度保守,T142直接参与底物结合,并与底物剪切位点相互作用,且靠近催化活性中心和门亚结构域等重要结构。经测序鉴定,证明重组质粒ppSUMO-T142A突变正确。表达的融合蛋白His-SUMO-T142A相对分子质量约131 000,主要以可溶形式存在于上清中,浓度为18 mg/mL;经3步纯化获得突变体T142A的纯度达86%。T142A催化降解荧光底物Substrate V的最大反应速率(Vmax)为501.06 min^(-1),米氏常数(Km)为9.01μmol/L,与野生型IDE(V_(max)为2 814.32 min^(-1),K_(m)为11.93μmol/L)比较,活性大幅下降。结论本研究表达的IDE突变体T142A活性大幅降低,T142是IDE发挥活性功能的重要残基,为新型IDE活性调控分子的研发提供了实验依据。; 肖树黄晨马树涛张凯李依萌李真陆昌瑞陈婷; 关键词：胰岛素降解酶点突变原核表达酶活

胰岛素降解酶：在改善阿尔茨海默病和糖尿病认知障碍中的作用和通路: 阿尔茨海默病(AD)和糖尿病认知障碍的共同特征是中枢神经系统中β淀粉样蛋白(Aβ)的累积。由于胰岛素降解酶(IDE)具有降解胰岛素和Aβ的双重特性,研究人员对IDE改善AD和糖尿病认知障碍的作用机制及其潜在通路颇为重视。...; 田悦

多种抗胰岛素降解酶抗体及其多种用途: 提供了多种分离的抗胰岛素降解酶抗体。所述多种抗体的每一种包含一抗原识别结构域，所述抗原识别结构域包含所述多个指定的互补决定区胺基酸序列。还提供了制备它们的多种方法、使用它们的多种方法、包含它们的多种医药组合物和多种制品。; 伊泰·本哈尔利莫·纳哈里丹·弗兰克尔奥菲尔·弗什特尤瓦尔·纳什米里特·里兰

琥珀酰化的胰岛素降解酶易位入核与蜕皮激素受体结合促进棉铃虫变态发育: 研究背景及科学问题:胰岛素降解酶（insulin-degrading enzyme,IDE）是一种调节发育的多功能锌金属内肽酶,既可发挥蛋白酶活性降解胰岛素、胰高血糖素等从而调节细胞增殖与凋亡,又可通过与其他蛋白的相互作...; 邵斌岩; 关键词：胰岛素降解酶琥珀酰化蜕皮激素

亚低温后处理对小鼠神经母细胞瘤细胞氧糖剥夺复糖复氧模型胰岛素降解酶的影响: 2022年; 目的观察亚低温后处理对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)模型胰岛素降解酶(IDE)的影响。方法采用随机数字表法将生长状态良好的N2a细胞分为对照组、模型组和低温组(n=60),对照组在正常条件下培养,其余2组先氧糖剥夺培养3 h后,模型组在正常条件下复糖复氧,低温组于32℃低温下复糖复氧24 h后再在正常条件下复糖复氧。各组于复糖复氧24 h和48 h时,用流式细胞学检测细胞凋亡率,乳酸脱氢酶检测细胞毒性,分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性,ELISA法检测β淀粉样蛋白(Aβ)浓度,Western blot和qRT-PCR法检测IDE蛋白和mRNA相对表达。结果与对照组比较,模型组和低温组24 h和48 h细胞凋亡率、细胞毒性和Caspase-3活性明显升高(P<0.05),IDE表达明显降低(P<0.05),模型组Aβ浓度明显升高(P<0.05);与模型组相比,低温组24 h和48 h细胞凋亡率、细胞毒性、Caspase-3活性和Aβ浓度明显降低(P<0.05),IDE蛋白(0.24±0.01 vs 0.12±0.00,0.33±0.01 vs 0.17±0.01)和mRNA(0.67±0.02 vs 0.48±0.01,0.63±0.02 vs 0.41±0.01)相对表达明显升高(P<0.05)。结论亚低温后处理可以减轻小鼠N2a细胞OGD/R模型损伤,该机制可能与上调IDE的表达,减少Aβ的生成,减少细胞凋亡率有关。; 王培卢菁孙贵亮冯雯哲张君焕袁阳王明山陈怀龙; 关键词：神经母细胞瘤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

鼠源胰岛素降解酶的原核表达及活性检测被引量：1: 2021年; 胰岛素降解酶是维持体内糖代谢平衡和蛋白质稳态的关键蛋白质,也是2型糖尿病及阿尔茨海默病临床药物的重要靶点。本研究构建了野生型鼠源胰岛素降解酶的大肠杆菌ppSUMO表达系统,并完成了鼠源胰岛素降解酶的表达纯化及功能测定。采用ppSUMO表达系统得到的融合蛋白具有组蛋白标签和ULP1酶切位点,通过ULP1酶对亲和纯化得到的融合蛋白进行酶切,可以获得无标签胰岛素降解酶。另外,根据胰岛素降解酶的理化性质(如等电点、相对分子质量),采用离子交换层析和凝胶过滤层析两种纯化方法,可完成蛋白质的纯化。纯化所获得的野生型胰岛素降解酶通过特异性的荧光底物Mca-RPPGFSAFK(Dnp)进行活性检测。本方法获得的野生型胰岛素降解酶的纯度约为90%,对已知抑制剂杨梅素具有很好的抑制响应。以上结果提示,该表达系统获取的胰岛素降解酶具有较好的纯度和活性,为日后胰岛素降解酶的结构与功能研究及体外临床药物研发奠定了实验基础。; 彭彦皓肖树陈丽姚昱祺张云龙陆昌瑞陈婷; 关键词：蛋白质纯化杨梅素

低温对小鼠N2a细胞氧糖剥夺/复糖复氧模型胰岛素降解酶的影响: 目的:通过观察低温条件处理(32℃，24h)对小鼠髓母细胞瘤（Neuroblastoma,N2a）细胞氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)后24h和48h细胞的凋亡损伤情况、存活率、凋亡率、Caspase-3活性、β-淀粉样...; 王培; 关键词：N2A细胞氧糖剥夺 Β-淀粉样蛋白胰岛素降解酶髓母细胞瘤

胰岛素降解酶通过抑制雄激素受体泛素化介导肝细胞肝癌对索拉非尼耐药: 背景:肝细胞肝癌是常见的消化系统恶性肿瘤。索拉非尼是治疗进展期肝癌的一线药物。尽管索拉非尼对肝癌具有良好的治疗效果,但存在肿瘤易出现耐药的问题。探寻肿瘤出现耐药性的分子机制,可能有助于解决临床常见的靶向药物耐药问题。实验...; 潘宇; 关键词：胰岛素降解酶肝细胞肝癌雄激素受体索拉非尼泛素化

电针对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠海马胰岛素降解酶、PPARγ、β-catenin与Aβ42表达的影响被引量：2: 2020年; 目的:观察电针对胰岛素抵抗大鼠海马胰岛素降解酶(IDE)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、β连环蛋白(β-catenin)与β淀粉样蛋白(Aβ42)表达的影响。方法:40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、预防组和电针组,每组10只。电针治疗后,免疫组织化学法检测大鼠海马Aβ42阳性表达;实时荧光定量PCR检测大鼠海马IDE、PPARγ和β-catenin表达。结果:与正常组比较,其他各组大鼠海马Aβ42的阳性表达显著升高(P<0.01,P<0.05),IDE、PPARγ与β-catenin表达显著减少(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,预防组、电针组大鼠海马Aβ42阳性表达显著减少(P<0.01),IDE、PPARγ和β-catenin表达显著增加(P<0.05,P<0.01);与预防组比较,电针组大鼠海马IDE、PPARγ表达显著减少(P<0.05)。结论:电针降低胰岛素抵抗大鼠海马Aβ42阳性表达,其作用机制可能与电针增加IDE、PPARγ、β-catenin表达相关。; 王静芝陈丽徐芬瞿涛杜艳军; 关键词：胰岛素抵抗胰岛素降解酶过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ Β连环蛋白

微小隐孢子虫两种胰岛素降解酶的功能及基于CRISPR-Cas9的蛋白原位标记及药物靶标的筛选: 微小隐孢子虫是引起人和动物腹泻的重要病原,已在世界各地引起400多起水源性疾病的暴发。目前尚无有效的药物和疫苗,因此需要开展更多的病原生物学研究,以发现可以作为药物和疫苗的靶标。比较基因组学分析表明,微小隐孢子虫的基因组...; 许瑞; 关键词：微小隐孢子虫胰岛素降解酶有性生殖

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