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短链脂肪酸盐对小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎功能研究
2024年
目的:探讨短链脂肪酸盐中丙酸钠与丁酸钠对小鼠腹腔巨噬细胞代谢活性、一氧化氮(NO)、炎性细胞因子[白细胞介素1(IL-1)、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)]分泌及吞杀菌功能的影响。方法:采用CCK-8检测SCFAs处理后巨噬细胞代谢活性;Griess试剂与ELISA法分别检测SCFAs干预经LPS刺激的巨噬细胞上清液中NO与炎性细胞因子;巨噬细胞适宜浓度鼠伤寒沙门菌后,经SCFAs干预,平板稀释计数法检测吞0、5、10 h细菌存活数,同时检测各组10 h上清液中NO含量。结果:丙酸钠与丁酸钠均能降低巨噬细胞代谢活性,降低LPS刺激后NO、IL-6及TNF-α水平,使巨噬细胞鼠伤寒沙门菌5 h与10 h后的胞内细菌数量增加。结论:丙酸钠与丁酸钠能降低由LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应,增加鼠伤寒沙门菌在巨噬细胞内的存活机率。
刘鹏姚梦李志恒潘万龙
关键词:鼠伤寒沙门菌腹腔巨噬细胞抗炎作用
腹腔巨噬细胞在腹膜炎中的免疫特性改变及影响因素的研究进展
2024年
腹膜炎是由细菌感染、化学刺激或损伤所引起的炎症性疾病。腹膜巨噬细胞是腹膜腔中一种主要的免疫细胞,在腹膜炎症中具有重要的免疫调节活性并直接影响腹膜炎的转归。不同表型的腹腔巨噬细胞具有不同的免疫学特性及功能,影响其极化和功能的影响因素也较为复杂,本文对腹膜巨噬细胞的分型、表面标志、极化、功能及其影响因素作一综述,以期为腹膜炎的发生机制及更有效治疗手段的研究提供参考。
陈雯雯张锦成郭靖岑源(综述)刘英莉
关键词:腹膜炎巨噬细胞腹腔
细胞生物学实验教学改革实践探索--小鼠腹腔巨噬细胞的提取及NF-κB信号通路活化水平检测
2024年
细胞生物学实验是细胞生物学课程教学的重要组成部分,对于帮助学生更好掌握相关理论知识,培养学生的实验操作能力、科研思维能力均具有重要作用。细胞信号转导是细胞生物学理论课内容的重要章节,目前在高校本科生细胞生物学实验教学中,鲜有关于细胞内信号通路转导检测和观察的实验。该团队根据自身的科研活动和教学经验累积设计了一个独立完整的综合性实验,包含4个相互联系的实验,意在探究小鼠腹腔巨噬细胞中NF-κB信号通路的活化情况,实验分别为:(1)小鼠腹腔巨噬细胞的提取及纯化;(2)炎性因子刺激下,RelA/p65在细胞内定位的观察;(3)小鼠腹腔巨噬细胞中炎症因子mRNA表达变化的检测;(4)小鼠腹腔巨噬细胞中炎症因子蛋白表达变化的检测。该综合性实验容易获得较纯的原代小鼠腹腔巨噬细胞,并且在提取的细胞中能够明显检测到细胞内信号通路的转导情况,实验结果易于观察。这样一个独立完整的综合性实验,不仅能够丰富和优化本科生细胞生物学实验教学的内容和模式,并且能够使学生从实验中真正深入地了解机体内炎症反应过程中信号通路的转导等相关知识,加深学生对于理论课程的理解。
可月双巴雪青曾宪录
关键词:细胞生物学实验小鼠腹腔巨噬细胞NF-ΚB信号通路细胞生物学实验教学
绞股蓝多糖提高小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能
2024年
研究不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/mL)绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP)对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,探讨GPP对机体免疫功能的调节作用及其可能的作用机制。采用中性红法、Griess法、CCK8法、ELISA法和荧光定量PCR法检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞能力、增殖、细胞因子(NO、LDH、TNF-α、IL-1β)的分泌量、CaM和GSα基因的表达水平。结果表明,GPP激活小鼠腹腔巨噬细胞,随着GPP浓度的增加小鼠腹腔巨噬细胞增殖能力增强,当GPP浓度为50.0、100.0、200.0μg/mL时,吸光度与空白对照处理相比差异显著;GPP刺激小鼠腹腔巨噬细胞后,吞能力强于空白对照处理,GPP浓度为200.0μg/mL时,小鼠腹腔巨噬细胞的吞能力最强;GPP促进小鼠腹腔巨噬细胞NO、LDH、TNF-α和IL-1β的分泌;GPP上调CaM和GSα基因的表达,GPP浓度为100.0、25.0μg/mL时CaM、GSα基因表达量分别达到最高。
王欣雨金鑫杜倩笙唐非台刘可可董胤余王晓丽
关键词:巨噬细胞小鼠腹腔
基于α7nAChR-miRNA124-STAT3通路探讨肠缺血再灌注电针血清对腹腔巨噬细胞的影响
2024年
目的:体外研究观察电针治疗肠缺血再灌注小鼠后,小鼠血清的效应物质干预腹腔巨噬细胞株RAW264.7的过程,探讨电针足三里改善肠缺血再灌注损伤(IIRI)的可能机制。方法:取BALB/c小鼠制备IIRI模型,随机分为正常血清组、模型血清组、电针血清组,电针血清组小鼠于足三里电针治疗30 min。各组小鼠制备动物血清后与RAW264.7细胞共培养,共设6组:对照组、正常血清组、模型血清组、电针血清组、电针血清+miRNA124抑制剂组、电针血清+α7nAChR拮抗剂组。实时荧光定量PCR法检测细胞α7nAChR和miRNA 124水平,Western blotting法检测细胞p-STAT3表达,ELISA法检测细胞上清IL-6浓度。结果:模型血清组p-STAT3及IL-6均较对照组和正常血清组显著增高;与模型血清组比较,电针血清组miRNA 124水平明显增高,而p-STAT3表达显著降低;与电针血清组比较,电针血清+α7nAChR拮抗剂组的α7nAChR水平显著下降,电针血清+miRNA 124抑制剂组和电针血清+α7nAChR拮抗剂组的miRNA 124水平显著下降,而p-STAT3和IL-6表达显著升高。结论:电针足三里可能通过促进巨噬细胞α7nAChR诱导miRNA 124,从而抑制STAT3通路改善IIRI。
耿艳霞裴颖皓刘雨郭丁丁李迎欣郑晶晶陈栋
关键词:肠缺血再灌注胆碱能抗炎通路MIRNA腹腔巨噬细胞
小鼠原代腹腔巨噬细胞外泌体的分离及鉴定
2024年
目的分离纯化小鼠原代腹腔巨噬细胞分泌的外泌体并进行鉴定。方法分别经5只雄性C57BL/6小鼠腹腔注射3%巯基乙酸盐肉汤,灌洗获得小鼠原代腹腔巨噬细胞后,用流式细胞术分析纯度。采用ExoQuick TC外泌体试剂盒提取小鼠原代腹腔巨噬细胞外泌体,BCA试剂盒测定外泌体蛋白含量,透射电镜观察外泌体形态,纳米颗粒跟踪分析仪检测外泌体粒径及分布,Western blot法检测外泌体标志物(CD9、CD63和TSG101)的表达。结果每只小鼠可获得约5×10^(6)个纯度为(99.17±0.65)%的腹腔巨噬细胞。5 mL小鼠原代腹腔巨噬细胞培养上清液中可提取869μg外泌体蛋白。小鼠原代腹腔巨噬细胞外泌体在电镜下呈折光性较强的典型茶托样囊泡,高表达外泌体特异性标志物TSG101、CD63和CD9,粒径分布集中在100~200 nm,平均粒径为175.2 nm。结论腹腔注射巯基乙酸盐肉汤可提高小鼠原代腹腔巨噬细胞得率,ExoQuick TC外泌体试剂盒能够提取足量且纯度较高的小鼠原代腹腔巨噬细胞外泌体。
刘玉国罗惠瑜林凤涓王洁娴莫嘉琦苏楚红陈俊斌郑钟黛西查龙应
关键词:外泌体巨噬细胞小鼠原代细胞
补肾活血方调控腹腔巨噬细胞治疗小鼠子宫内膜异位症
2024年
目的探讨补肾活血方治疗子宫内膜异位症(EM)的免疫学机制。方法通过将供体小鼠子宫内膜碎片注射入受体小鼠腹腔的方法构建EM小鼠模型,造模后将EM小鼠随机分为模型组、孕三烯酮组、补肾活血方组,每组8只。孕三烯酮组小鼠以孕三烯酮混悬液(0.325 mg/kg)灌胃、每周2次,补肾活血方组小鼠每日以补肾活血方中药液(43.68 g/kg)灌胃,疗程均为28 d。疗程结束后处死小鼠,通过大体标本和H-E染色观察小鼠异位病灶生长情况,采用Blauer粘连评分系统对小鼠腹腔粘连程度进行评分,采用免疫组织化学染色观察小鼠病灶纤维化标志物的表达,通过ELISA检测小鼠腹腔液中炎症因子水平,利用流式细胞术检测巨噬细胞极化变迁及巨噬细胞功能变化。结果与模型组相比,补肾活血方组和孕三烯酮组EM小鼠异位病灶体积和腹腔粘连评分降低(均P<0.05),病灶纤维化程度改善,腹腔液中TNF-α、TGF-β1、IL-12水平下调(均P<0.05),腹腔巨噬细胞M2/M1比值降低(均P<0.01),腹腔巨噬细胞的吞功能没有明显改变。补肾活血方组EM小鼠上述指标与孕三烯酮组相比无明显差异。结论补肾活血方可能通过调控腹腔巨噬细胞改善小鼠腹腔免疫微环境治疗EM。
毕艳丽俞超芹
关键词:子宫内膜异位症巨噬细胞免疫微环境
夏枯草提取物对脓毒症小鼠炎症反应和腹腔巨噬细胞的影响
2024年
目的探究夏枯草提取物对脓毒症小鼠炎症、巨噬细胞表型及吞能力的影响,并分析Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路是否参与其作用。方法将C57BL/6小鼠分为对照组,模型组,夏枯草提取物低(25 mg/kg)、中(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组。除对照组外,其余各组小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)制备脓毒症模型;各组给予相应药物灌胃。给药24 h后,检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、IL-10水平,M1型(CD11b^(+)F4/80^(+))和M2型(CD206^(+)F4/80^(+))巨噬细胞腹腔巨噬细胞的比例及巨噬细胞的吞能力,腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA和精氨酸酶1(Arg1)mRNA表达以及巨噬细胞TLR4、NF-κB p65及其磷酸化蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠血清TNF-α、IL-1β、HMGB1,腹腔M1型巨噬细胞比例,巨噬细胞的平均荧光强度和吞能力百分比,iNOS mRNA,TLR4、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)/NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.05),IL-10、M2型巨噬细胞比例、Arg1 mRNA表达降低(P<0.05);与模型组相比,夏枯草提取物低、中、高剂量组小鼠血清TNF-α、IL-1β、HMGB1,腹腔M1型巨噬细胞比例,iNOS mRNA,TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达依次降低(P<0.05),IL-10、M2型巨噬细胞比例、巨噬细胞的平均荧光强度和吞能力百分比、Arg1 mRNA表达依次升高(P<0.05)。结论夏枯草提取物可能通过抑制TLR4/NF-κB通路抑制腹腔巨噬细胞极化为M1型,并促进其向M2型极化,增强巨噬细胞能力,减轻LPS诱导的脓毒症小鼠炎症反应。
贾维宁鲍亚玲雷慧殷晓宁
关键词:脓毒症巨噬细胞腹膜夏枯草TOLL样受体4炎症
电针对动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞胆固醇逆转运受体表达的影响
2024年
目的 观察电针对动脉粥样硬化(AS)家兔腹腔巨噬细胞胆固醇逆转运受体三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G1(ABCG1)、B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)mRNA及蛋白表达的影响,探究电针治疗AS的作用机制。方法 将26只雄性新西兰家兔按照随机数字表法分为阴性对照组(n=7)、造模组(n=19)。阴性对照组家兔给予普通饲料喂养,造模组采用高脂饲料与颈总动脉球囊损伤术相结合的方法制备AS模型。将造模成功的家兔按随机数字表法分为模型组、电针组和阿托伐他汀组,每组各6只。电针组家兔予“内关”“足三里”“关元”进行电针治疗,疏密波(4 Hz/20 Hz),电流为1 mA,每次留针20 min,1次/d,6 d为1个疗程,共4个疗程;阿托伐他汀组家兔灌胃阿托伐他汀钙片悬浊液(1 mg/kg),1次/d,6 d为1个疗程,共4个疗程。干预结束后,采用HE染色法观察家兔颈总动脉组织形态学变化;取家兔腹腔巨噬细胞,实时荧光PCR法检测ABCA1、 ABCG1、SR-BⅠ的mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测ABCA1、 ABCG1、SR-BⅠ的蛋白表达水平。结果 阴性对照组家兔颈总动脉内膜平滑;模型组家兔颈总动脉内膜受损,管壁增厚,粥样斑块形成;电针组、阿托伐他汀组家兔管壁增厚情况改善明显,粥样斑块面积缩小。与阴性对照组比较,模型组家兔腹腔巨噬细胞中ABCA1、 ABCG1、SR-BⅠmRNA和蛋白表达均降低(均P<0.01);与模型组比较,电针组和阿托伐他汀组家兔腹腔巨噬细胞中ABCA1、 ABCG1、SR-BⅠmRNA和蛋白表达均升高(均P<0.01);与电针组比较,阿托伐他汀组家兔腹腔巨噬细胞中ABCG1、SR-BⅠmRNA升高,ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ蛋白表达升高(均P<0.01)。结论 电针可上调AS家兔腹腔巨噬细胞ABCA1、 ABCG1、SR-BⅠmRNA及蛋白的表达,增强胆固醇逆转运过程,这可能是针刺治疗AS的机制。
栾海燕佟晓哲张邵宁赵莹莹姜凤伟李慧韩婧姝成泽东李菁媛
关键词:动脉粥样硬化电针家兔
敲低多房棘球蚴let-7-5p可抑制BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长
2024年
旨在明确敲低多房棘球蚴emu-let-7-5p对小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长的影响。构建表达多房棘球蚴emu-let-7-5p海绵序列的重组腺相关病毒载体,并在293T细胞上验证其抑制效果和特异性。70只清洁级BALB/c小鼠分别经尾静脉注射AAV8-si-let-7-5p、AAV8-control和PBS后两周,每组随机选取2只小鼠分别用Western blot和qRT-PCR分析肝组织中GFP、let-7-5p及其靶基因C/EBP δ的表达。随后,所有小鼠每只腹腔接种1 000个原头蚴,3个月后qRT-PCR检测腹腔巨噬细胞emu-let-7-5p、C/EBP δ、M1型(IL-1β、iNOS和IL-6)和M2型(Arg-1、IL-4和IL-10)相关分子的转录水平,并统计各组小鼠多房棘球蚴的包囊重量和原头蚴数量。结果表明,注射后第15天,AAV8-si-let-7-5p成功靶向小鼠肝脏,并引起emu-let-7-5p的敲低和C/EBP δ的上调表达。感染后3个月,AAV8-si-let-7-5p组小鼠腹腔巨噬细胞emu-let-7-5p和M2型相关分子Arg-1均显著下调,而C/EBP δ和M1型相关分子IL-1β和iNOS均显著上调。此外,AAV8-si-let-7-5p组IL-4和IL-6下调表达,而IL-10上调表达,且小鼠肝脏包囊重量和原头蚴数量显著低于对照组。敲低多房棘球蚴感染小鼠体内emu-let-7-5p,可促进C/EBP δ的表达,进而抑制M2型极化和虫体生长。
王立群吴易璇蒲桂婷曹珊菱王得先刘婷丽李红AMUDA Tharheer Oluwashola郭小腊殷宏骆学农
关键词:多房棘球蚴

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王立生
作品数:128被引量:601H指数:14
供职机构:暨南大学第二临床医学院
研究主题:双歧杆菌 实验性大肠癌 大肠癌 巨噬细胞 完整肽聚糖
周殿元
作品数:700被引量:3,686H指数:31
供职机构:南方医科大学
研究主题:幽门螺杆菌 大肠癌 双歧杆菌 大肠肿瘤 幽门螺杆菌感染
李俊
作品数:1,311被引量:7,205H指数:35
供职机构:四川省农业科学院
研究主题:小麦 佐剂性关节炎 佐剂性关节炎大鼠 橙皮素 肝纤维化
彭代智
作品数:200被引量:538H指数:13
供职机构:第三军医大学西南医院
研究主题:烧伤 烧伤患者 严重烫伤 烧伤后 巨噬细胞
潘令嘉
作品数:116被引量:786H指数:17
供职机构:南方医科大学南方医院
研究主题:双歧杆菌 实验性大肠癌 大肠癌 裸鼠 完整肽聚糖