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致病性大肠杆菌猪用疫苗及其制备方法: 本发明公开了针对致病性大肠杆菌的疫苗。对于致病性大肠杆菌，本发明采用的是抗原蛋白疫苗方案，基于致病性大肠杆菌的F18和K88菌毛蛋白设计并制备了菌毛亚单位疫苗。两种疫苗均在小鼠免疫攻毒模型中验证了其疫苗的保护力。; 陶亮樊昊

1株山鸡源致病性大肠杆菌的分离鉴定被引量：2: 2024年; 为查明秦皇岛市某山鸡养殖场山鸡大批量死亡病因,试验对分离到的致病优势菌株进行生化鉴定和16S rRNA基因序列分析,并测试分离菌对21种抗生素的敏感性,进一步采用PCR方法检测分离菌的耐药基因。利用清洁级昆明小鼠和SPF鸡胚分别对分离菌进行致病性试验,并采用PCR方法检测分离菌的毒力基因。结果显示:分离菌为革兰氏阴性杆菌,在伊红美蓝培养基上生长出有金属光泽的菌落,生化特性与大肠杆菌生化特性符合率高达99%。BLAST分析发现,分离菌16S rRNA序列与大肠杆菌的基因相似性高达99.8%。分离菌对恩诺沙星和阿米卡星高度敏感,对青霉素、头孢曲松等15种药物耐药。分离菌的磺胺类、β-内酰胺类、四环素类的耐药基因与耐药表型基本相符,其余耐药基因与耐药表型不符,提示该分离菌可能存在其他的耐药机制。致病性试验结果显示,分离菌具有较强致病性,共检测到12种大肠杆菌主要毒力基因。研究表明,分离菌为山鸡源致病性大肠杆菌,且耐药情况复杂,具有较强的毒力和致病性。; 张春晓赵玉林杨富琳王利丽赵奇侯冠欣孙欣艺张志强; 关键词：药敏试验毒力基因耐药基因致病性试验

禽致病性大肠杆菌HlyE蛋白的免疫原性研究被引量：1: 2024年; 为评估禽致病性大肠杆菌(APEC)溶血素HlyE蛋白的免疫原性,本研究对APEC溶血素HlyE蛋白进行原核表达和纯化,并对表达的重组蛋白进行SDS-PAGE和western blot分析,将纯化蛋白利用透析袋在4℃透析后,利用血琼脂平板对其溶血活性进行检测。SDS-PAGE和western blot结果显示,表达并纯化到分子量约为36 ku的重组HlyE蛋白(rHlyE),经ND-2000超微量核酸蛋白测定仪测定纯化后蛋白浓度为0.65 mg/mL;溶血活性检测结果显示,rHlyE具有溶血活性。以透析后的rHlyE作为抗原,按照50μg/只的剂量免疫小鼠,对照组于相同时间点注射等量PBS,共免疫3次间隔14 d,并于首免后不同时间采血,采用间接ELISA方法检测两组小鼠血清特异性抗体水平,并于三免后18 d以2 LD_(50)的APEC菌液攻毒小鼠,观察7 d内小鼠的死亡情况;于首免后28 d剖杀各组小鼠取其脾脏制备脾淋巴细胞,采用流式细胞术分别检测CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞亚型比率,对rHlyE的免疫原性进行评估。间接ELISA检测结果显示,该蛋白能够诱导机体产生体液免疫应答,分泌高表达量的IgG抗体,抗体水平于三免后15 d达到最高水平。rHlyE免疫攻毒保护试验结果显示,免疫组小鼠基本无明显临床症状,7 d内存活率达80%;而对照组小鼠表现明显临床症状,于攻毒后3 d内全部死亡。流式细胞术结果显示,与对照组相比,免疫组小鼠的CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞亚型比率均升高。上述结果表明,rHlyE在大肠杆菌BL21中为部分可溶性表达,将其免疫小鼠后可诱导小鼠产生较高水平的体液免疫应答,并且可对小鼠产生较好的免疫保护效果。本研究明确了APEC HlyE蛋白的免疫原性,为APEC免疫保护蛋白的筛选以及疫苗研发提供了借鉴与参考。; 张春晓王利丽赵奇孙欣艺侯冠欣刘畅史秋梅吴同垒张志强; 关键词：禽致病性大肠杆菌溶血活性免疫原性流式细胞术

一种检测致病性大肠杆菌的LAMP试剂盒及其专用引物: 本发明公开了一种检测致病性大肠杆菌的LAMP试剂盒及其专用引物，属于生物检测技术领域。其中提供的检测大肠杆菌的LAMP专用引物包括基于大肠杆菌phoA基因设计的六条特异性引物，能够在15‑45min内实现对大肠杆菌的高灵...; 王鹏辛俊利黄海碧赵丽霞刘玉梅张贵刚杜宇荣刘建奇刘东霞张彦婷范文霞李雪峰刘浩乔煜婷

一例禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药分析: 2024年; 为了探明河南地区白羽肉鸡养殖场肉鸡大量发病死亡原因,采用细菌平板划线法对病鸡病料进行细菌分离纯化,经LB琼脂平板与伊红美蓝鉴别性琼脂平板划线培养,得到形状均匀、大小一致的菌落。PCR与生化试验鉴定结果显示,该菌株为禽致病性大肠杆菌。采用药敏纸片法试验测定常见抗生素药物敏感性,结果显示该菌株对氨苄西林、阿莫西林、土霉素、哌拉西林、四环素、庆大霉素耐药,对恩诺沙星、氟苯尼考、阿米卡星和新霉素敏感,对左氧氟沙星、氯霉素、卡那霉素和金霉素中等耐药。; 刘晓娟; 关键词：禽致病性大肠杆菌生化鉴定耐药性

一种禽致病性大肠杆菌sRNA s053基因缺失菌株及其应用: 本发明公开了一种禽致病性大肠杆菌sRNA s053基因缺失菌株及其应用，所述菌株为CE041Δs053，其保藏编号为CCTCC NO：M 20232290，其分类命名为大肠杆菌Escherichia coli CE041...; 诸葛祥凯王忠星庞廷事吴光燕张玉婷

一种禽致病性大肠杆菌sRNA s078基因缺失菌株及其应用: 本发明公开了一种禽致病性大肠杆菌sRNA s078基因缺失菌株及其应用，所述菌株为FY32Δs078，其保藏编号为CCTCC NO：M 20221364，其分类命名为大肠杆菌Escherichia coli FY32Δs...; 诸葛祥凯王敏姜敏王忠星

木寡糖在制备致病性大肠杆菌减毒产品中的应用: 本发明提供了木寡糖在制备致病性大肠杆菌减毒产品中的应用。本发明首次发现木寡糖可明显减轻致病性大肠杆菌的毒力，进而有效预防和/或治疗大肠杆菌病，为致病性大肠杆菌减毒产品提供了一种新原料，也为木寡糖提供了一种新应用。此外，本...; 王伟唯左建军任璐凌翀宋亚汝曹庆云叶慧冯定远董泽敏张常明

一种用于尿路致病性大肠杆菌调控外泌体的试验方法: 本发明涉及尿路感染技术领域，具体公开了一种用于尿路致病性大肠杆菌调控外泌体的试验方法，包括制备MB49‑Exo和MB49‑U‑Exo并观察感染和处理后的小鼠、MB49‑U‑Exo加重UPEC诱导的膀胱炎、MB49‑U‑E...; 张正果王子豪王明樊忠宇张艺铭

兔肠致病性大肠杆菌荧光定量PCR检测方法的建立与应用: 2024年; 为建立一种有效检测肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)的荧光定量PCR检测方法,根据EPEC的eaeA基因序列设计了特异性引物和探针,对引物和探针的最佳浓度分别进行了优化,并研究了其敏感性、特异性和重复性。同时,应用该方法对临床兔粪样品进行了检测,并与国家标准推荐方法进行了比较。结果显示:本研究建立的EPEC荧光定量PCR检测方法检测阳性质粒的最低检测限为2.97拷贝/μL,批内重复和批间重复试验的变异系数均低于3%,临床样品的阳性检出数量高于国标推荐方法。结果表明,该方法特异性良好、敏感性高、重复性理想,能够准确检出兔粪球样本中的EPEC核酸,具有较好的应用前景。; 左海莉张莹辉张晓茜程君生于建新彭小薇董浩; 关键词：肠致病性大肠杆菌荧光定量PCR

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