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罕见病酶替代疗法药物重组人α-半乳糖苷酶A酶活性测定方法研究: 2024年; 目的基于酶反应动力学理论对重组人α-半乳糖苷酶A(recombinant humanα-galactosidase A,rhα-GAL)酶活性测定反应条件进行系统研究,建立更灵敏简便、准确稳定的rhα-GAL酶活性测定方法。方法优化反应体系后的最适条件为:以50 mmol·L^(-1)对硝基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷的为底物,酶质量浓度为1.67μg·mL^(-1),于37℃水浴准确反应15 min后,加入甘氨酸缓冲液(pH10.5)终止反应,采用酶标仪在400 nm波长处测定产物对硝基苯酚的光密度值。结果该方法专属性良好,rhα-GAL在(0.83~2.51 mg·mL^(-1))(r=0.9998)质量浓度范围内与酶促反应速率呈良好的线性关系;rhα-GAL在50%、80%、100%、125%及150%浓度水平验证溶液的回收率在94.2%~101.8%范围内(n=18),测定结果的变异系数(CV)在2.0%~5.5%(n=18);同一份供试品溶液的12次独立测定结果的CV为2.21%;考察反应体系中的水浴温度、反应时间和底物浓度微小变化对测定结果的影响,结果表明方法的耐用性较好;复溶后的样品于2~8℃存放48 h稳定性较好;水解产物对硝基苯酚在(0.01~0.15 mmol·L^(-1))(r=0.9997)范围内与光密度呈良好的线性关系,5个浓度水平的回收率在94.9%~105.1%之间(n=9),CV均小于2%(n=9);采用该法分析2个已上市产品的酶活性。结论建立了生色底物法测定rhα-GAL的酶活性,该方法灵敏度高、精密度及准确度较好,可用于rhα-GAL产品的酶活性评价和质量控制。; 王绿音张孝明李晶梁成罡; 关键词：酶替代疗法酶活性测定生色底物法

过氧化氢酶活性测定装置的一体化改进与教学应用: 2024年; 从实验装置一体化理念出发,设计并制作了过氧化氢酶活性测定装置,并将其应用到“探究酶催化的专一性、高效性及影响酶活性的因素”这一高中生物学经典实验中。结果显示:该装置具有实验现象明显、操作安全简单、结果可完全量化等特点,有助于任课教师保质保量完成教学任务,也有利于学生科学素养的培育。; 陈凡黄丽静李奕雅; 关键词：过氧化氢酶活性测定实验教学

植物过氧化物酶活性测定实验方法的改良: 2024年; 过氧化物酶(POD)活性测定是本科植物生理学实验中的一个经典实验,但本科生在实验操作过程中,由于多种因素的影响,很难取得预期结果。因此,探究植物体内过氧化物酶活性测定实验的适宜条件对本科生掌握POD活性测定技术具有重要意义。本文以菠菜、娃娃菜、马铃薯皮为实验材料,比较测定时间、温度、pH值以及酶液稀释倍数对过氧化物酶活性测定的影响。结果表明,过氧化物酶活性测定时间最佳取值范围为0-90s;适宜温度为37℃,磷酸缓冲液pH为5.5,酶反应速度随着稀释倍数的增加而降低。本研究不仅为过氧化物酶活性测定实验教学改革提供依据,对相关科学研究有一定参考价值。; 吕春芳李海霞贾然然刘格格赵路友胡秀丽; 关键词：过氧化物酶愈创木酚酶活性

核酸外切酶偶联实时核酸内切酶活性测定: 本发明包括评估核酸内切酶活性的快速体外方法及其底物。还公开了组合物、诊断方法和试剂盒。; 斯蒂芬·史密斯

不同地区甜菜夜蛾解毒酶活性测定和酶抑制剂的增效作用: 2024年; 本研究测定了广州白云(BY)、武汉黄陂(HP)、上海崇明(CM)、阜阳界首(JS)4个甜菜夜蛾Spodoptera exigua田间种群和敏感种群多功能氧化酶(MFO)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和羧酸酯酶(CarE)酶活性,发现4个田间种群的3种酶活性中仅MFO酶活性均显著高于敏感种群。采用浸叶法测定了MFO抑制剂胡椒基丁醚(PBO)对BY和HP两个田间种群已产生抗性的药剂的增效作用,结果表明PBO分别与高效氯氰菊酯、甲维盐和氯虫苯甲酰胺混用时,对BY和HP种群均有显著增效作用。进一步以这3种制剂最高推荐用量分别与PBO两个浓度(100 mg/L和50 mg/L)混用进行室内盆栽药效试验,与各自单剂最高推荐用量相比,PBO浓度在100 mg/L和50 mg/L时均对高效氯氰菊酯有显著增效作用,PBO浓度在100 mg/L时对甲维盐和氯虫苯甲酰胺有一定增效作用。本研究结果为制定有效的甜菜夜蛾抗药性治理策略提供了技术支撑。; 周利琳熊凯凡王攀杨帆望勇王小平司升云; 关键词：甜菜夜蛾解毒酶酶抑制剂抗药性

圈养非洲白犀牛初乳蛋白组分及5种酶活性测定: 2024年; 为了积累圈养非洲白犀牛初乳蛋白组分和酶活性的基础数据,本研究对非洲圈养白犀牛分娩后1-5天的初乳成分进行分析。用考马斯亮蓝法对白犀牛初乳蛋白质含量进行测定,以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳不连续垂直板状电泳分离乳蛋白各组分,并用分光光度法测定淀粉酶(AMS)、乳过氧化物酶(LP)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰胺转移酶(γ-GT)等5种酶活性。结果显示:白犀牛初乳中蛋白质浓度第1天最高为150.33±4.2 mg/mL,后呈下降趋势,约为荷斯坦牛乳蛋白质浓度的5倍。白犀牛初乳中Igs含量最为丰富,第1天最高为38.59%,后呈下降趋势;荷斯坦牛乳以CN为含量最丰富的蛋白质,为49.41%。AMS、LP和ALP的活性第2天最高为46.27±0.42 U/100 mL、299.33±15.5 U/mL和193.22±1.63 U/100 mL,后逐渐下降,其中各天LP活性均高于荷斯坦牛乳;NAGase活性第1天最高为48.22±1.15 U/L后逐渐下降,各天活性均高于荷斯坦牛乳;γ-GT活性呈上升趋势,第5天最高为1053.85±6.78 U/100 mL,高于荷斯坦牛乳。; 李世宗朱茂徐维维李卫真庞双龙; 关键词：初乳酶活性测定蛋白质含量 SDS-PAGE

一种平板培养基酶活性测定方法: 本发明涉及一种培养基中酶活性的测定方法，尤其涉及一种平板培养基酶活性测定方法，包括：①取固体培养基，加入缓冲液，粉碎；②加入琼胶酶进行处理；③取琼胶酶处理液离心上清进行酶活性测定。本发明将琼脂在较低温度粉碎结合琼胶酶作用...; 叶楠付刚金鑫龚岳斌

一种裂解酶酶活性测定方法: 本发明提供一种裂解酶酶活性测定方法，该方法包括酶活检测体系、检测方法及应用。本方案包含的裂解酶活性的定性定量检测方法，检测程序简单易操作，反应体系微量化，且数据结果成线性分布，解决了裂解酶的酶活检测和进化筛选过程中耗时长...; 张慧泽李瑞琦张晓立李华珍章家泉

一种裂解酶酶活性测定方法: 本发明提供一种裂解酶酶活性测定方法，该方法包括酶活检测体系、检测方法及应用。本方案包含的裂解酶活性的定性定量检测方法，检测程序简单易操作，反应体系微量化，且数据结果成线性分布，解决了裂解酶的酶活检测和进化筛选过程中耗时长...; 张慧泽李瑞琦张晓立李华珍章家泉

鲁米诺化学发光的过氧化氢酶活性测定系统被引量：1: 2023年; 为了解决传统高锰酸钾法测定过氧化氢酶活性存在的耗时长、准确度低、样本需求量大等问题,开发建立了基于鲁米诺/过氧化氢化学发光的过氧化氢酶类活性测定系统。该系统以鲁米诺被过氧化氢氧化产生化学发光为原理,通过加入过渡金属Co(Ⅱ)和螯合剂EDTA实现持续稳定的高强度化学发光。经实验测定,该系统的鲁米诺化学光强度与过氧化氢的摩尔浓度呈现良好的线性关系;可通过调节检测体系的pH值调整测量灵敏度,进而实现过氧化氢的微量检测。结果表明,该系统对待测蛋白样本量和活性要求较低,有利于微量蛋白的活性检测。同时测定的数据稳定性高,重复性强,准确度高,适用范围广,操作简单,方便快捷,安全性高,值得推广使用。; 孙岑岑方瑜董伟仁顾一峰; 关键词：鲁米诺过氧化氢过氧化氢酶高锰酸钾酶活力

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