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一种促猪骨骼肌卫星细胞分化的促进剂: 本发明提供了一种促猪骨骼肌卫星细胞分化的促进剂，属于猪发育技术领域。该促进剂为千金子多糖，本发明通过Western Blot检测发现，千金子多糖能够显著的促进猪骨骼肌卫星细胞分化相关蛋白MyHC和MyoG的蛋白表达。因此...; 吕广宙齐国锋李久峰王巧莉任庆娜李红玲

一种鹅骨骼肌卫星细胞的体外分离和培养方法: 本发明公开了一种鹅骨骼肌卫星细胞的体外分离和培养方法，该鹅骨骼肌卫星细胞是通过体外分离、培养和纯化制备得到的；其中，鹅骨骼肌卫星细胞的分离包括消化、分离、卫星细胞的培养和差速贴壁纯化卫星细胞。本发明首次利用Dispase...; 张力许加龙朱善元

MMP14调控骨骼肌卫星细胞分化的分子机制研究: 2024年; 旨在分析基质金属蛋白酶14(MMP14)调控骨骼肌卫星细胞分化的分子机制。本试验取10只4周龄C57/BL6雌性小鼠,利用胶原酶消化法分离骨骼肌卫星细胞。首先,对骨骼肌卫星细胞进行诱导分化,利用qRT-PCR和Western blot试验分析MMP14在骨骼肌卫星细胞增殖期和分化期表达量的变化。应用siRNA抑制MMP14蛋白表达,分为试验组(si-MMP14)和对照组(si-NC),每组3个重复:首先诱导细胞分化,应用免疫荧光和qRT-PCR分析试验组和对照组细胞分化水平的差异;随后取增殖期细胞进行蛋白组学测序,结合生物信息学分析鉴定差异蛋白,并筛选MMP14调控的关键差异蛋白和通路。本研究结果表明:1)MMP14在卫星细胞增殖期表达上调,在分化期表达下调;抑制MMP14蛋白会抑制肌管生成,表现为肌管融合指数下降。2)通过蛋白组学分析筛选到549个差异蛋白,其中有66个上调蛋白和483个下调蛋白,差异蛋白主要富集在细胞黏附、脂肪酸代谢以及AMPK通路等,参与调控细胞命运决定、组蛋白甲基化和染色质结构等生物学过程。3)通过蛋白互作关系网络分析发现MMP14与肌源性分化相关蛋白、脂肪生成相关蛋白以及异染色质结构调控蛋白直接互作,抑制MMP14可导致肌分化转录因子(PAX7、MYOD)和H3-K9甲基转移酶(SETDB1、SUV39H1)下调,而成脂分化转录因子(JUN、C/EBPβ)上调。本研究初步分析了MMP14调控骨骼肌卫星细胞分化的机制,MMP14可能通过H3-K9组蛋白甲基化参与卫星细胞命运决定以及成肌与成脂分化的转换,且这种调控作用发生在卫星细胞细胞分化启动前。本研究结果为骨骼肌发育研究提供理论依据。; 刘媛李溪月张维娅; 关键词：骨骼肌卫星细胞

巴马香猪与长白猪骨骼肌卫星细胞增殖分化差异: 2024年; 猪肉的质量与猪骨骼肌的发育和肌内脂质沉积有关,而骨骼肌卫星细胞具有分化为成肌细胞、脂肪细胞的潜能。为分析骨骼肌卫星细胞的增殖分化对骨骼肌形成的影响,本研究从长白猪和巴马香猪背最长肌处分离纯化骨骼肌卫星细胞,并利用免疫荧光检测Pax7的表达情况进行细胞鉴定。通过RT-qPCR检测2个品种猪骨骼肌卫星细胞中细胞周期相关因子和成肌成脂相关因子的mRNA表达量,CCK-8检测2种细胞的增殖情况。结果表明,2个品种猪骨骼肌卫星细胞表现出不同的增殖能力和分化潜能:与巴马香猪相比,长白猪骨骼肌卫星细胞表现出较强的增殖能力和较高的成肌分化潜能以及较低的成脂分化潜能。本研究发现不同肉质猪骨骼肌卫星细胞增殖分化能力存在差异,为阐明不同肉质猪骨骼肌形成差异的相关机理提供了理论依据。; 任思禹李颖; 关键词：骨骼肌卫星细胞增殖分化

家畜骨骼肌卫星细胞培养方法及专用于该方法的辅助装置: 本发明涉及细胞培养技术领域，具体地说，涉及一种家畜骨骼肌卫星细胞培养方法及专用于该方法的辅助装置。该方法对取样自初生活体家畜的肌肉组织进行处理以获取肌肉组织块，后对获取的肌肉组织块进行消化处理以获取用于原代SMSCs培养...; 王晓薇康晓龙马青樊毅梁小军王秀琴梅宁安杨阳马小明额尔和花王建东黎玉琼高海慧李承隆周小南丁艳玲李鹏

一种维持牛骨骼肌卫星细胞分化潜能的增殖培养基及其应用: 本发明公开了一种维持牛骨骼肌卫星细胞分化潜能的增殖培养基及其应用。该培养基包括：完全培养基、虾青素(astaxanthin)、维生素C(ascorbic acid)和叶酸(Folic Acid)。本发明制备的一种维持牛骨...; 周凤包立辉王卫华屈亚平

力学敏感性BoxC/D核仁小RNA90促进骨骼肌卫星细胞成肌分化: 2024年; 目的检测力学刺激通过核仁小RNA(snoRNA)调控骨骼肌卫星细胞成肌分化的机制。方法 8周龄雄性C57BL/6小鼠购自上海斯莱克实验动物有限责任公司, 利用随机数表将小鼠随机分为两组, 每组有6只小鼠:重力负荷组和后肢去负荷组, 构建后肢悬吊小鼠模型检测力学刺激缺失对骨骼肌分化的影响, C2C12细胞购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库, 将细胞分为两组:对照组和循环牵张力学组, 利用Flexcell FX-5000细胞加力系统构建骨骼肌卫星细胞C2C12循环机械牵张力学刺激模型, 利用定量聚合酶链反应(qPCR)检测骨骼肌组织以及C2C12细胞中基因的表达变化, 利用蛋白质印迹法(Western blot)检测C2C12细胞中肌细胞增强因子2C(MEF2C)蛋白的表达, 利用双荧光素酶报告基因检测SNORD90和miR-18a-3p的结合, 两组间的统计差异通过Student’st检验确定。结果 HU组小鼠腓肠肌的重量(0.165±0.015)和比目鱼肌的重量(0.141±0.021)低于WB组(0.221±0.013、0.253±0.019, t=9.574、6.499, P<0.01), HU组小鼠腓肠肌MEF2C mRNA表达(0.462±0.274)低于WB组(1.000±0.137, t=9.606, P<0.01)。CMS组C2C12细胞中MEF2C mRNA的表达(18.633±1.532)高于NC组(1.000±0.128, t=10.687, P<0.01)。pLVX-SNORD90组C2C12细胞中MEF2C mRNA的表达(1.748±0.122)高于pLVX-Vector组(1.000±0.128, t=9.684, P<0.01)。SNORD90可以通过碱基互补配对的方式结合miR-18a-3p。miR-18a-3p过表达抑制MEF2C蛋白的表达, 抑制miR-18a-3p的表达促进MEF2C蛋白的表达, miR-18a-3p影响SNORD90对MEF2C蛋白的表达调控。结论力学刺激促进C2C12细胞中SNORD90的表达, SNORD90通过碱基互补配对结合miR-18a-3p并抑制其功能促进MEF2C的表达。; 王海涛董懿鑫李炳秋杨银威殷力; 关键词：骨骼肌卫星细胞微小RNA

circIGF1R在促进猪骨骼肌卫星细胞成肌分化中的应用: 本发明提供circIGF1R在促进猪骨骼肌卫星细胞成肌分化中的应用。本发明首次发现一个猪的circRNA‑circIGF1R具有促进猪骨骼肌卫星细胞成肌分化的功能。本发明为了解circRNA在调控成肌细胞分化中的作用奠定...; 李萌张娜郭晓红杨阳李步高蔡春波曹果清

短期血清饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞代谢及自噬发生的影响: 2024年; 旨在研究短期饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells,SMSCs)代谢及自噬发生的影响,解析自噬机制在骨骼肌发育调控网络中的地位和作用,为改良家猪产肉性状提供理论依据。将本实验室分离并保存的SMSCs细胞系复苏,按培养体系中血清浓度将细胞分为20%血清组(对照组)、15%血清组、10%血清组、5%血清组和0%血清组,以形成不同程度的饥饿胁迫。当细胞融合度达到70%~80%后再培养24 h进行检测,每组4个重复。流式细胞术检测各组细胞凋亡率、膜电位和活性氧水平;试剂盒测定ATP水平;WB检测自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ、p62和通路相关蛋白AMPK、mTOR的表达;透射电镜检测细胞线粒体形态和细胞器的变化。结果显示,随着细胞中血清浓度降低,细胞活力、p62蛋白量、p-mTOR/mTOR比值逐渐降低;细胞凋亡率、ROS水平、ATP水平、LC3B-Ⅱ蛋白水平、p-AMPK/AMPK比值、细胞内自噬溶酶体数量、细胞核及线粒体异常率则逐渐升高;与对照组相比,15%组膜电位显著升高,5%和0%组极显著降低。这表明,短期血清饥饿胁迫能诱导基于AMPK/mTOR信号通路的自噬发生,加快细胞代谢,但同时存在加快细胞凋亡、抑制细胞增殖等毒副作用。; 王怡王怡胡悦旻杨跃飞杨跃飞鞠辉明; 关键词：自噬

长时间血清饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞代谢和自噬的影响: 2024年; 为了探究长时间、不同程度饥饿胁迫条件对原代猪骨骼肌卫星细胞(SMSCs)代谢和自噬的影响,本试验通过控制SMSCs培养体系中血清浓度以形成不同程度饥饿胁迫,其中20%血清培养浓度为正常对照组,15%、10%、5%和0%血清培养浓度为试验组。细胞培养96 h后,通过流式细胞术检测各组细胞凋亡率、线粒体膜电位和活性氧(ROS)水平,通过ATP检测试剂盒测定细胞内ATP水平,通过Western blot检测各组细胞蛋白中自噬标志蛋白LC3b、p62以及AMPK-mTOR自噬信号通路中p-AMPK/AMPK和p-mTOR/mTOR蛋白的表达。结果显示,与20%血清组相比,0%血清和5%血清细胞凋亡率极显著上调(P<0.01),10%血清组细胞凋亡率显著上调(P<0.05);各试验组线粒体膜电位均极显著下降(P<0.01),ROS水平和ATP水平均极显著上调(P<0.01);细胞中LC3b蛋白的相对表达量随血清浓度降低而升高,p62蛋白的相对表达量随血清浓度降低而降低;p-mTOR/mTOR比值随血清浓度降低而降低,p-AMPK/AMPK比值随血清浓度降低而升高。结果表明,通过长期减少SMSCs培养体系中血清浓度,可以促进细胞代谢加快和凋亡发生,并且通过AMPK/mTOR信号通路激发细胞发生自噬,上述变化的程度与血清减少的程度呈正相关。本试验为后续探索不同程度饥饿胁迫对动物肌肉发育影响的研究提供理论依据。; 高娟范博钧吴雅婕王怡王怡鞠辉明; 关键词：血清饥饿自噬细胞代谢骨骼肌卫星细胞

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