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Lnc46198半番鸭胚胎期特异性表达及对鸭胚成纤维细胞增殖和凋亡的影响: 2023年; 为分析TCONS_00246198(简称lnc46198)在半番鸭胚胎期发育过程中的特异性表达及对鸭胚成纤维细胞(Duck embryo fibroblasts,DEF)增殖或凋亡的影响,本研究采用RT-qPCR分析lnc46198在10、15、20和25 d不同胚龄半番鸭性腺及半番鸭12.5 d胚龄大脑、心脏、肝脏、肺脏、肌肉、性腺和肾脏等不同组织中的表达情况。采用全基因合成法构建鸭胚成纤维细胞lnc46198-pcDNA3.1过表达载体,利用流式细胞术和CCK8法检测细胞增殖情况,采用Annexin V-FITC/PI流式和RT-qPCR检测细胞凋亡情况。结果表明:1)lnc46198在半番鸭各种组织和不同胚龄性腺中均表达,其在半番鸭12.5 d胚龄性腺的表达量极显著高于其他组织(P<0.01),且性腺中相对表达量随着胚龄增加逐渐升高,提示lnc46198可能在半番鸭性腺发育中发挥重要作用。2)鸭胚成纤维细胞lnc46198过表达组细胞活力与对照组相比极显著降低(P<0.01),表明过表达lnc46198可抑制鸭胚成纤维细胞的增殖活力。3)过表达组细胞凋亡率是pcDNA3.1组的7.30倍(P<0.01),表明过表达lnc46198可促进鸭胚成纤维细胞凋亡。综上,lnc46198在不同胚龄半番鸭性腺中动态表达,在半番鸭12.5胚龄性腺中特异表达,可抑制鸭胚成纤维细胞增殖,并促进鸭胚成纤维细胞凋亡,本研究揭示了lnc46198的特异性表达及在鸭细胞增殖或凋亡中的功能,可为半番鸭性腺发育差异机制提供科学参考依据。; 李丽章琳俐辛清武缪中纬朱志明朱春红邱君志黄勤楼郑嫩珠; 关键词：半番鸭细胞增殖细胞凋亡特异性表达

鸭肠炎病毒(DEV)诱导鸭胚成纤维细胞(DEF)内质网应激介导的自噬和凋亡及相关机制研究: 鸭病毒性肠炎（Duck virus enteritis，DVE），又称鸭瘟（Duck plague，DP），是由鸭肠炎病毒（Duck enteritis virus，DEV）引起的鸭，鹅等禽类的一种急性、接触性传染病。其...; 张杨子; 关键词：内质网应激细胞自噬; 文献传递

鸭胚成纤维细胞上坦布苏病毒受体蛋白的鉴定被引量：1: 2019年; 【目的】拓展对坦布苏病毒受体的认知,为研究其在鸭体内的感染机制打下基础。【方法】取9日龄SPF鸭胚制备鸭胚成纤维细胞(DEF),待细胞长成单层后提取DEF膜蛋白,利用免疫共沉淀试验筛选出DEF膜蛋白中可与坦布苏病毒结合的蛋白,经病毒辅覆蛋白结合分析(VOPBA)验证后通过LC-MSMS质谱分析进行鉴定;同时人工合成鸭热休克蛋白70基因(HSP70)序列的开放阅读框(1905 bp),构建重组质粒pET32a-HSP70并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,以重组蛋白免疫小鼠制备抗鸭HSP70血清,与DEF细胞共孵育后接种坦布苏病毒,并采用实时荧光定量PCR检测抗血清对病毒感染的抑制作用。【结果】DEF膜蛋白中分子量约70 kD的蛋白可与坦布苏病毒结合,经LC-MSMS质谱分析和序列比对可确定该蛋白即为鸭热休克蛋白70(HSP70)。含重组质粒pET32aHSP70的BL21(DE3)感受态细胞经IPTG诱导4 h后,SDS-PAGE检测发现在分子量约85 kD处出现目的蛋白条带,获得的重组鸭HSP70蛋白主要以包涵体形式进行表达,且能与His标签抗体发生特异性反应。以重组鸭HSP70蛋白免疫小鼠获得的抗鸭HSP70血清可封闭DEF细胞上的HSP70,而竞争性抑制坦布苏病毒感染。【结论】HSP70是坦布苏病毒感染DEF细胞的受体,可作为新的靶点用于抗坦布苏病毒药物设计。; 赵冬敏韩凯凯刘青涛黄欣梅杨婧刘宇卓章丽娇田宇杰王梦瑶李银; 关键词：鸭胚成纤维细胞热休克蛋白70 受体免疫共沉淀

坦布苏病毒感染对鸭胚成纤维细胞生物学功能的影响及其机制研究: 坦布苏病毒（Tembusu virus,TMUV）感染，是于2010年4月份发生在中国江浙地区的一种新发病毒性传染病，其主要引起产蛋鸭体温升高、食欲下降、卵泡变性出血、卵黄性腹膜炎、产蛋大幅下降以及雏鸭头颈震颤、共济失调...; 于观留; 关键词：生物学功能分子机制

鸭瘟病毒诱导鸭胚成纤维细胞凋亡分子机制初探: 鸭瘟病毒(DPV)能够引起鸭胚成纤维细胞(DEF)及淋巴细胞凋亡，围绕DPV诱导DEF凋亡通路及细胞周期等开展研究，获以下主要结果:　　1.DPV诱导DEF细胞周期及细胞凋亡与病毒复制关系研究　　(1)流式细胞仪检测DP...; 赵传阔; 关键词：鸭瘟病毒鸭胚成纤维细胞细胞周期; 文献传递

基于RNA-Seq筛选新型鸭细小病毒感染鸭胚成纤维细胞的差异表达基因被引量：1: 2018年; 为筛选鸭细小病毒(DPV)感染鸭胚成纤维(DEF)细胞后的差异表达基因,本研究利用DPV接种DEF细胞作为试验组,对照组加入相同体积的2%DMEM,培养至72 h后提取2组样品的总RNA,利用RNA-Seq技术筛选出DEF细胞感染DPV后的差异表达基因,并对其进行生物信息学GO功能分类和KEGG分析。结果显示,差异表达水平变化倍数(fold change,FC)在2倍以上的基因共有4 073个,其中上调表达基因1 904个,下调表达2 169个。GO功能分析显示,这些基因主要涉及到炎症反应、免疫反应、蛋白结合、转运活动等功能。KEGG信号通路分析表明,这些差异表达基因参与细胞因子受体相互作用、新陈代谢、TNF、NF-κB、Jak-STAT、Toll样受体等信号通路。应用荧光定量PCR(Real-time FQ-PCR)验证部分差异表达基因的检测结果显示,差异基因的相对表达量与RNA-Seq技术测序结果基本一致,表明了RNA-Seq检测结果的可靠性。本研究为进一步研究DPV的致病作用及宿主抗病机制奠定了基础。; 崔元李晓轩孙继国袁万哲; 关键词：鸭胚成纤维细胞转录组测序差异表达基因

鸭肠炎病毒感染诱导鸭胚成纤维细胞γ干扰素上调表达及初步机制的研究被引量：1: 2018年; 目的探讨鸭肠炎病毒(DEV)诱导鸭胚成纤维细胞(DEF)中γ干扰素(IFNγ)的表达情况及初步机制。方法分别提取感染DEV后24h、36h、48h、60h的DEF总RNA,反转录成cDNA,使用特异性引物,运用荧光定量PCR方法 ,检测IFNγ及几个相关干扰素刺激基因(ISGs)mRNA水平的变化。结果感染DEV的细胞相对于未感染的细胞,IFNγ的mRNA在24 h、36 h、48 h、60 h均显著上调,且相关ISGs包括抗黏液病毒基因(Mx)、DEAD框蛋白50(DDX50,是一种ATP依赖的RNA解旋酶)、2'-5'寡腺苷酸合成酶L(OASL)等基因的mRNA表达水平也均显著上调。结论 DEV感染DEF能够诱导IFNγ产生及相关ISGs表达的上调。; 李思琪李思琪尹海畅赵丽丽金建丽金建丽; 关键词：上调表达

减蛋综合征病毒Hexon蛋白诱导鸭胚成纤维细胞凋亡的研究: 减蛋综合征病毒(Egg drop syndrome virus，EDSV)来源于鸭，被命名为鸭腺病毒Ⅰ型，EDSV主要引起鸡的产蛋率及蛋品质的下降。近年来，研究表明EDSV可以导致雏鸭发生急性呼吸道感染，甚至出现死亡。目...; 许佳敏; 关键词：鸭胚成纤维细胞

MTS法检测番鸭呼肠孤病毒对鸭胚成纤维细胞活力的影响: 2017年; 采用MTS法检测接种不同致病力番鸭呼肠孤病毒12h、24h、36h、48h、72h、96h后对番鸭鸭胚成纤维细胞(MDEF)活力的影响。根据细胞病变情况和活力状态确定细胞发生变化的拐点,初步探讨番鸭呼肠孤病毒感染诱导细胞凋亡的发生和细胞活力的特征变化,进一步了解番鸭呼肠孤病毒与宿主之间的相互关系,为研究番鸭呼肠孤病毒感染和致病机理提供时间科学依据。结果表明,接毒后36h,细胞活力达到最高,高致病力YB毒株作用于MDEF,细胞活力在48h大幅下降并出现明显细胞凋亡;低致病力YJL毒株作用于MDEF,则在72h可出现明显细胞凋亡。; 林泽鑫; 关键词：番鸭呼肠孤病毒细胞活力

过氧化氢在诱导鸭胚成纤维细胞建立鸭胚成纤维细胞凋亡模型中的应用: 本发明涉及一种过氧化氢在诱导鸭胚成纤维细胞建立鸭胚成纤维细胞凋亡模型中的应用，使用终浓度为400μM的过氧化氢处理鸭胚成纤维细胞后，DAPI染色观察到细胞核缩小，扭曲变形，核质聚集于核膜边缘且出现凋亡小体，荧光定量RT‑...; 汪铭书徐洋程安春; 文献传递

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