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低剂量铅暴露影响青春期小鼠睾丸铁稳态及转运体DMT1/FPN1表达的研究
2023年
目的 探究长期低剂量铅暴露对青春期雄性小鼠睾丸中铁稳态及其转运体DMT1/FPN1表达的影响。方法 4周龄SPF级ICR雄性小鼠按体重随机分为3组,每组15只。依据非职业人群血铅参考值及既往研究结果确定各组小鼠铅外暴露剂量分别为0(对照组)、50和200 mg/L,随饮水摄取。染毒90 d后,通过原子吸收光谱仪检测小鼠全血及睾丸中铅、铁含量;通过铁染色(Perl′s staining)法观察睾丸中铁的分布;采用qRT-PCR及Western blot检测睾丸中铁转运蛋白(DMT1/FPN1)mRNA及其蛋白表达水平;多组间数据比较采用单因素方差分析。结果 对照组、50和200 mg/L铅暴露组小鼠全血铅含量分别为(0.70±0.04)、(6.14±0.34)和(11.92±2.92)μg/dl,F血铅=31.937,P血铅=0.000,全血铁含量分别为(41.74±1.07)、(37.11.37)和(34.60±1.18)μg/dl,F血铁=15.867,P血铁=0.004,50和200 mg/L铅暴露组血铁含量均较对照组明显下降(P<0.05)。3组睾丸铅含量分别为(0.02±0.01)、(0.13±0.04)和(0.20±0.05)μg/g,F睾丸铅=5.011,P睾丸铅=0.026,睾丸铁含量分别为(17.83±1.18)、(20.75±0.65)和(21.76±0.61)μg/g,F睾丸铁=161.920,P睾丸铁=0.000,两个铅暴露组睾丸铁含量均较对照组明显上升(P<0.05)。Perl′s铁染色可见铅暴露睾丸中有明显蓝色颗粒分散分布,且主要分布在精细胞群中。睾丸中铁转运蛋白(DMT1/FPN1)mRNA及其蛋白表达水平结果显示,FDMT1mRNA=9.357,PDMT1mRNA=0.004;FFPN1mRNA=1.038,PFPN1mRNA=0.410;FDMT1蛋白=316.467,PDMT1蛋白=0.000;FFPN1蛋白=4.679,PFPN1蛋白=0.031。200 mg/L铅暴露组中睾丸二价金属离子转运体(divalent metal transporter 1,DMT1)mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05);膜铁转运蛋白(ferroportin 1,FPN1)mRNA表达水平有上升趋势,但各组间差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,50和200 mg/L铅暴露组DMT1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。200 mg/L组睾丸组织中FPN1蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05)。进一步分析显示前
王蕾樊勇胜余君王子琼马海涛于露汪春红
关键词:睾丸
DMT1编码一个丝氨酸/半胱氨酸蛋白酶调控水稻分蘖并参与干旱胁迫响应被引量:1
2023年
水稻分蘖的形成是一个复杂的过程,受到环境及遗传因素的影响,合适的分蘖可以显著提高水稻产量.本研究利用甲基磺酸乙酯(ethyl methanesulfonate, EMS)诱变粳稻秀水11得到一份矮化、多分蘖突变体,将其命名为dwarf and multiple tillers 1(dmt1),并对其进行表型观察,生理生化分析,遗传分析,基因定位和激素处理.结果发现,在dmt1在分蘖期出现株高变矮,叶片面积变小,分蘖数增多等特征.遗传分析表明,该dmt1为单隐性核基因控制,图位克隆的结果显示, DMT1位于第4染色体上,编码一个丝氨酸/半胱氨酸蛋白酶,是NAL1的等位基因.亚细胞定位的结果表明, DMT1蛋白在细胞核、细胞质和叶绿体上均有表达.为探究该基因突变是否会影响水稻对激素的敏感程度,本研究通过施加外源激素发现dmt1地上部分对NAA敏感程度降低,而地下部分对于GA3敏感程度升高.并且在dmt1中生长素合成相关基因表达量降低.通过干旱处理发现dmt1的耐旱能力下降,在干旱胁迫下dmt1的发芽率降低.由实验可得, DMT1突变会导致植株产生株高变矮,分蘖增多的表型,通过qRT-PCR发现可能是由于生长素合成障碍引起的表型.这为研究水稻分蘖机制的遗传网络提供了新的信息.
芦涛殷文晶戴若惠陈振概沈芷琦叶涵斐杨丽君严钢吴思思何瑞张琪李三峰王跃星饶玉春
关键词:水稻分蘖DMT1外源激素干旱处理
脊髓DMT1亚硝基化修饰与瑞芬太尼诱发大鼠痛觉过敏机制的关系
2023年
目的探讨脊髓二价金属离子转运体1(DMT1)亚硝基化修饰与瑞芬太尼诱发大鼠痛觉过敏机制的关系。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠40只, 2~3月龄, 体质量240~260 g, 采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)尾静脉输注生理盐水0.1 ml·kg^(-1)·min^(-1) 60 min;瑞芬太尼组(R组)尾静脉输注瑞芬太尼1.0 μg·kg^(-1)·min^(-1) 60 min;L-NAME组(C+L组)腹腔注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME 30 mg/kg, 10 min后尾静脉输注生理盐水0.1 ml·kg^(-1)·min^(-1) 60 min;瑞芬太尼+L-NAME组(R+L组)腹腔注射L-NAME 30 mg/kg, 10 min后尾静脉输注瑞芬太尼1.0 μg·kg^(-1)·min^(-1) 60 min。分别于静脉输注前24 h、输注结束后6、24和48 h(T0~3)时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。最后一次测定痛阈后麻醉状态下处死大鼠, 取L4~6脊髓标本, 采用实时定量PCR法检测脊髓nNOS和DMT1 mRNA的表达;生物素转化法提取亚硝基化蛋白质, Western blot法检测nNOS、总体DMT1和亚硝基化DMT1的表达;分光光度法测定脊髓NO含量;原子吸收分光光度计法测定脊髓铁含量。结果与C组比较, R组T1~3时MWT降低, TWL缩短, R组和R+L组脊髓nNOS及其mRNA和亚硝基化DMT1表达上调, NO和铁含量升高(P<0.05);C+L组各指标差异均无统计学意义(P>0.05);与R组比较, R+L组T1~3时MWT升高, TWL延长, 脊髓nNOS及其mRNA和亚硝基化DMT1表达下调, NO和铁含量降低(P<0.05);与C+L组比较, R+L组T1~3时MWT降低, TWL缩短, 脊髓nNOS及其mRNA和亚硝基化DMT1表达上调, NO和铁含量升高(P<0.05);各组脊髓DMT1 mRNA和总体DMT1表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论脊髓nNOS激活引起NO生成增加, 介导DMT1亚硝基化修饰, 可能与瑞芬太尼诱发大鼠痛觉过敏的机制有关。
舒瑞辰李媛张增利王凯元王国林尹毅青
关键词:瑞芬太尼痛觉过敏离子转运亚硝基化合物
靶向沉默DMT1基因的shRNA干扰序列、重组腺相关病毒载体及构建方法与应用
本发明公开一种靶向沉默DMT1基因的shRNA干扰序列、重组腺相关病毒载体及构建方法与应用,属于分子生物学技术领域。所述shRNA干扰序列包括正链序列和反链序列,所述正链序列如SEQ ID NO.1所示,所述反链序列如S...
郭风劲孙凯刘海港朱波秦亮
蒙药德都红花--7味散对大鼠慢性肝损伤保护作用及铁死亡相关蛋白GPX4、DMT1、FTMTmRNA表达的影响
目的:观察蒙药德都红花-7味散对CCI所致大鼠慢性肝损伤的疗效及肝组织铁蓄积和谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、二价金属转运蛋白1(DMT1)、线粒体铁蛋白(FTMT)mRNA表达的影响。方法:将40只SD雄性大鼠按体重随...
白图雅
关键词:肝纤维化
JWH133对MPP^(+)诱导SH-SY5Y细胞铁水平和DMT1表达影响被引量:1
2021年
目的探讨大麻素Ⅱ型受体(CB2R)激活对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用机制。方法培养SH-SY5Y细胞,根据药物处理不同将其分为对照组、MPP+组、CB2R激动剂JWH133+MPP+组、CB2R抑制剂AM630+JWH133+MPP+组。应用激光扫描共聚焦显微镜分析技术检测SH-SY5Y细胞铁水平变化,应用免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞二价金属离子转运蛋白1(DMT1)的表达。结果与对照组相比,MPP+组细胞荧光强度明显降低,差异有显著性(F=26.620,q=10.410,P<0.05);用JWH133预处理后,JWH133+MPP+组细胞荧光淬灭程度低于MPP+组,差异有显著性(q=4.868,P<0.05);而且应用AM630可以逆转JWH133的这种作用,AM630+JWH133+MPP+组和JWH133+MPP+组荧光强度相比差异具有显著性(q=5.619,P<0.05)。与对照组相比,MPP+组细胞的DMT1蛋白表达量显著升高(F=9.493,q=4.109,P<0.05);JWH133+MPP+组细胞DMT1蛋白表达量下降,与MPP+组相比差异具有显著性(q=4.771,P<0.05);而AM630可阻断JWH133的作用,AM630+JWH133+MPP+组细胞DMT1蛋白表达量较JWH133+MPP+组显著升高(q=6.240,P<0.05)。结论激活CB2R可以抑制MPP+对DMT1蛋白表达的诱导从而调节SH-SY5Y细胞铁水平降低。
潘东马泽刚
关键词:SH-SY5Y细胞
水稻矮化多分蘖突变体dmt1及其应用
本发明属于农业生物技术工程,具体涉及一种水稻矮化多分蘖基因DMT1及其在水稻育种中的应用。本发明公开了一种水稻矮化多分蘖突变体{1}1的基因,其cDNA序列如SEQ IDNO:2所述。本发明还同时公开了水稻矮化多分蘖突变...
饶玉春芦涛王跃星杨丽君吴思思褚晓洁林晗王盛叶涵斐严钢杨凯如
文献传递
DMT1过表达加重Aβ寡聚体诱导的细胞凋亡被引量:1
2020年
目的本研究旨在揭示金属离子转运蛋白DMT1在Aβ1-42寡聚体引起神经细胞毒性中的作用。方法将稳定过表达DMT1基因的SH-SY5Y细胞(S-DMT1)和过表达绿色荧光蛋白空质粒的SH-SY5Y细胞(SGFP)暴露于Aβ1-42寡聚体,采用CCK8和Heochst33258检测细胞的死亡率和凋亡率,Western blot检测凋亡相关因子Caspase-3、Bax和BCL2的水平。结果与SGFP细胞相比,S-DMT1细胞在Aβ1-42寡聚体处理后,活细胞数量显著降低,细胞发生核皱缩的比率显著高于SGFP组。而且Aβ1-42寡聚体作用后S-DMT1细胞Caspase-3、Bax蛋白水平均高于SGFP组,而BCL2下降。结论DMT1过表达促进细胞凋亡,增加Aβ1-42寡聚体的毒性作用。
程晓凤李欣潞林庚刘彤彤刘彤彤
关键词:DMT1自噬神经退行性疾病
DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑内的分布以及作用机制的研究
目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是世界范围内一种常见的痴呆症。AD的主要特征是β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptides,Aβ)沉积形成的老年斑和过度磷酸化Tau蛋白为核心形成...
程晓凤
关键词:阿尔茨海默症DMT1自噬凋亡
文献传递
低剂量铅暴露对小鼠睾丸铁稳态及转运体DMT1/FPN1表达的影响
目的近年来,长期低剂量铅暴露对青春期雄性生殖系统影响的问题受到关注。睾丸铁稳态与精子发生有关,甚至睾丸铁稳态失调与隐睾症和睾丸癌等疾病存在一定关系。但是有关长期低剂量铅暴露对雄性睾丸铁稳态的影响还未见报道。本研究欲通过观...
樊勇胜
关键词:睾丸

相关作者

谢俊霞
作品数:175被引量:367H指数:10
供职机构:青岛大学
研究主题:帕金森病 黑质 铁 多巴胺能神经元 多巴胺
姜宏
作品数:150被引量:276H指数:8
供职机构:青岛大学
研究主题:帕金森病 黑质 多巴胺能神经元 铁 DMT1
郑玮
作品数:27被引量:91H指数:4
供职机构:中国医科大学基础医学院
研究主题:阿尔茨海默病 DMT1 Β-淀粉样蛋白 老年斑 AΒ
徐华敏
作品数:22被引量:21H指数:2
供职机构:青岛大学
研究主题:帕金森病 DMT1 铁 MES23.5细胞 人参皂苷RG1
段相林
作品数:222被引量:821H指数:14
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研究主题:铁代谢 小鼠 铁 扫描电镜观察 脂质体