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ICAT干扰慢病毒表达载体构建及稳转HL60细胞株的建立被引量:1
2016年
目的构建ICAT基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的HL60细胞系。方法人工设计、合成针对ICAT基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与PG-p1-VSVG、PG-p1-REV、PG-p1-RRE共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染HL60细胞,建立稳定细胞株;应用RT-PCR和Western Blot技术检测HL60稳定细胞中ICAT基因和蛋白表达情况,并与对照组进行比较。结果成功构建了针对ICAT基因的RNAi慢病毒表达载体,病毒滴度为2×10^8 TU/mL;建立稳定转染的HL60细胞株。有效干扰验证显示,shICAT能明显降低ICAT的mRNA及蛋白水平(P〈0.001)。结论成功构建ICAT基因的shRNA慢病毒表达载体,建立稳定干扰ICAT表达的HL60细胞株
王晋蜀王伟佳王婷张彦
关键词:RNA干扰HL60细胞
威灵仙总皂苷对HL60细胞株体外作用的研究被引量:4
2012年
目的:提取威灵仙总皂苷(TSRC),体外作用于急性早幼粒细胞白血病HL60细胞,研究TSRC对HL60细胞的作用机制。方法:将25~400 mg·L-1的TSRC在体外与HL60细胞共同培养,WST-1法检测TSRC对HL60细胞的增殖抑制作用;采用细胞形态学、透射电镜观察细胞、AnnexinV/PI双染色研究TSRC诱导HL60细胞凋亡作用;采用Wright’s-Giemsa染色细胞形态学观察、硝基蓝四氮唑(NBT)还原试验、细胞免疫表型CD11b检测等方法研究TSRC诱导HL60细胞分化作用。结果:50~400 mg·L-1TSRC在体外对HL60细胞增殖有明显抑制作用,呈现剂量和时间的量效关系;不同浓度TSRC作用24 h后均能显著促进HL60细胞凋亡;但具有统计学意义的诱导分化现象不明显。结论:TSRC在体外可有效抑制HL60细胞增殖,并诱导HL60细胞凋亡,但对HL60细胞无明显的诱导分化作用。
黄莉黄纯兰
关键词:威灵仙总皂苷急性早幼粒细胞白血病HL60细胞细胞分化
斑蝥素对白血病HL60细胞株hTERT mRNA表达及启动子甲基化的影响被引量:4
2011年
目的:研究斑蝥素对人白血病HL60细胞株端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达的影响及启动子甲基化的作用及其机制。方法:采用MTT法证实斑蝥素抑制HL60细胞株增殖的确切作用;采用RT-PCR半定量法检测不同浓度斑蝥素对HL60细胞株端粒酶逆转录酶mRNA的表达情况的影响;利用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)的方法,用亚硫酸氢钠修饰后的DNA为模板进行聚合酶链反应(PCR),检测不同浓度斑蝥素对HL60细胞株hTERT启动子甲基化作用情况。结果:斑蝥素可抑制HL60细胞增殖,具有明显的时间和剂量效应;中剂量斑蝥素组、高剂量斑蝥素组均能降低hTERT mRNA的相对表达量;高剂量组hTERT mRNA的相对表达量低于中剂量组(P<0.01);各组hTERT启动子均处于甲基化状态。结论:斑蝥素抑制HL60细胞株增殖的作用与其下调hTERT mRNA的表达有关。
徐瑞荣崔思远王琰
关键词:斑蝥素白血病HL60细胞株端粒酶逆转录酶甲基化
斑蝥素对人白血病HL60细胞株端粒酶逆转录HTERTMRNA表达的影响
目的:研究斑蝥素在体外及动物体内对人白血病HL60细胞株端粒酶逆转录酶mRNA表达的影响及启动子甲基化的作用及其机制。方法:MTT法检测斑蝥素HL60细胞增殖抑制作用;RT-PCR半定量法检测不同浓度斑蝥素对HL60细胞...
徐瑞荣崔思远申振涛张学伟
关键词:斑蝥素白血病HL60端粒酶逆转录酶
文献传递
斑蝥素对人白血病HL60细胞株端粒酶逆转录HTERTMRNA表达的影响
目的:研究斑蝥素在体外及动物体内对人白血病HL60细胞株端粒酶逆转录酶MRNA表达的影响及启动子甲基化的作用及其机制。 方法:MTT法检测斑蝥素HL60细胞增殖抑制作用;RT-PCR半定量法检测不同浓度斑蝥素对H...
关键词:斑蝥素白血病HL60细胞株端粒酶逆转录酶启动子甲基化
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enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株的增殖抑制作用被引量:10
2008年
目的研究enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株的增殖抑制活性。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法筛选enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株细胞毒活性。结果enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin对HL60细胞株和LOVO细胞株都有一定程度的抑制作用,其抑制活性呈现剂量-效应关系,其中以serrin B和nodosin效果较为显著。结论enmein、serrin B、nodosin和lasiodonin是中药溪黄草拮抗白血病和结肠癌的有效成分,溪黄草具有一定的防治白血病和结肠癌的作用。
海广范闫琰刘巨源杨锦南
关键词:溪黄草HL60细胞LOVO细胞
全反式维甲酸对HL60细胞株三种糖基转移酶家族表达的影响被引量:5
2006年
目的从mRNA水平检测HL60细胞株中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(polypeptide:Nacetylgalactosaminytra -nsferases,ppGalNAcTs)、N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶家族(UDP-N-acetylglucosamine:beta-galactose betal, 3-N-acetylglucosaminyltransferases,β3GnTs)及O-连接乙酰氨基葡萄糖转移酶家族(O-linked GlcNAc transferase,OGnT)的表达情况,研究全反式维甲酸(All-transretinoic acid,ATRA)培养对不同糖基转移酶表达水平的影响。方法采用Real time RT- PCR方法从mRNA水平上研究ppGalNAcTs、β3GnTs、OGnT的表达以及加入ATRA后表达水平的变化,用3H掺入试验检测加入ATRA对细胞增殖的影响,流式细胞仪观察细胞周期情况,激光共聚焦显微镜观察细胞形态的变化。结果加入ATRA 后HL60细胞株中β3GnT1、ppGalNAcT2表达量急剧增加,细胞阻滞在G2/M期,细胞的生长增殖受到抑制,细胞向粒系分化。结论加入分化诱导剂后细胞发生显著变化,提示β3GnT1、ppGalNAcT2与白血病细胞株的分化可能有一定关系。
杨静赵凝郭向红胡鹤娟杭赛宇吴士良
关键词:全反式维甲酸糖基转移酶HL60诱导分化
ALA-PDT对K562、HL60细胞株破坏的实验研究被引量:2
2005年
探讨基于氨乙酰丙酸介导的光动力作用(ALA-PDT)对白血病细胞株HL60和K562细胞的杀伤模式及其可能机制。在ALA-PDT处理细胞的优化条件下,用透射电镜对处理细胞进行超微结构观察,选择AnnexinV-FITC/PI双标法明确ALA-PDT对两种白血病细胞的杀伤模式,PI染色流式细胞仪分析ALA-PDT后细胞周期的变化,以Fluo-3/AM为钙离子指示剂采用激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度的变化。透射电镜观察发现PDT后即刻的细胞呈现典型的凋亡小体,24h后大部分发生坏死;双标法检测显示PDT后即刻及24h后细胞的死亡模式分别以凋亡和凋亡后坏死为主。光动力作用后即刻和作用后2h,K562细胞S期所占的比例分别为57.67%±1.13%和84.77%±6.20%,HL60细胞S期所占的比例分别为74.6%±7.27%和84.60%±1.74%;两种细胞内钙离子浓度的均明显升高。在最佳试验条件下,凋亡是ALA-PDT杀伤白血病细胞K562和HL60细胞的最初模式,而凋亡后坏死为其主要模式,ALA-PDT使白血病细胞株阻滞于S期,在白血病细胞株死亡的过程中,细胞内钙离子浓度的增加可能起着重要的作用。
张宝琴苗丽霞张镇西肖谧陈美蓝
关键词:ALA-PDTK562细胞株HL60细胞株光动力作用白血病
C3AR1基因促进HL60细胞迁移侵袭及耐药机制研究
第一部分、HL60-C3AR1稳转细胞株鉴定  目的:验证前期试验中构建的HL60-C3AR1,为研究该基因在HL60细胞株中的生物学功能奠定基础。  方法:  1.利用流式细胞仪检测HL60-C3AR1、HL60-Ve...
颜青
关键词:早幼粒白血病HL60细胞株依托泊苷
Serrin B和Nodosin对HL60、SGC7901、LOVO、U87、AGZY细胞株的毒性作用被引量:3
2013年
目的探讨天然药物Serrin B和Nodosin对人早幼粒白血病细胞株HL60、人胃腺癌细胞株SGC7901、人结肠癌细胞株LOVO、人胶质瘤细胞株U87、人肺腺癌细胞株AGZY的毒性作用。方法将对数期生长的HL60、SGC7901、LOVO、U87、AGZY细胞株接种于96孔板中,细胞贴壁后,分别加入Serrin B或Nodosin,使药物的终浓度分别为0.00、1.25、2.50、5.00、10.00、20.00μmol.L-1,24 h后用四甲基偶氮唑盐法检测细胞株的死亡率。结果 Serrin B对HL60、SGC7901、LOVO、U87和AGZY细胞株均有较强的毒性作用(P<0.01),且其毒性作用呈现剂量-效应关系。Nodosin对HL60、SGC7901、LOVO、U87细胞株具有较强的毒性作用(P<0.05,P<0.01),而对AGZY细胞株无明显毒性作用。结论 Serrin B和Nodosin是中药溪黄草抗癌作用的有效成分,为人类多种肿瘤治疗的新药研究开发提供新的思路。
海广范张慧郭兰青白素平
关键词:HL60细胞株LOVO细胞株

相关作者

海广范
作品数:81被引量:268H指数:9
供职机构:新乡医学院药学院
研究主题:蓝萼甲素 莴苣 白芷 NODOSIN 人酸性成纤维细胞生长因子
赵越
作品数:7被引量:41H指数:3
供职机构:山西医科大学
研究主题:自身抗体 DNA抗体 系统性红斑狼疮 细胞膜 HL60细胞株
周艳芳
作品数:53被引量:224H指数:9
供职机构:广东医学院
研究主题:苦参碱 心肌成纤维细胞 心肌成纤维细胞增殖 增殖 肺成纤维细胞增殖
崔思远
作品数:52被引量:212H指数:7
供职机构:山东中医药大学附属医院
研究主题:多发性骨髓瘤 再生障碍性贫血患者 端粒酶逆转录酶 中药 慢性再生障碍性贫血
彭新生
作品数:58被引量:326H指数:10
供职机构:广东医学院
研究主题:瓜馥木 化学成分 纳米粒 化学成分研究 透皮吸收