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脾胃培源方对慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃黏膜炎症及COX-2 mRNA蛋白表达的影响
2024年
目的 观察脾胃培源方对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠胃黏膜炎症及环氧合酶-2(COX-2)mRNA蛋白表达的影响,探讨脾胃培源方治疗CAG的可能作用机制。方法 从54只SPF级健康雄性SD大鼠中随机抽取8只作为正常组,其余大鼠通过饮用氨水联合脱氧胆酸钠溶液灌胃的方法制备CAG大鼠模型,10周后,将模型复制成功的40只大鼠采用随机数字表法分为模型组,胃复春组,脾胃培源方高、中、低剂量组,每组8只。各组予相应药物或生理盐水连续灌胃4周后,比较各组大鼠体质量增长情况;取大鼠胃组织,镜下观察大鼠胃黏膜病理学改变,并分别采用蛋白免疫印迹法、免疫组化法及聚合酶链式反应3种方法检测大鼠胃组织中COX-2蛋白及mRNA的表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量增长率明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,脾胃培源方各剂量组大鼠体质量增长率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠胃组织中COX-2蛋白及mRNA表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,脾胃培源方各剂量组大鼠胃组织中COX-2蛋白及mRNA表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。模型组大鼠胃黏膜变薄,固有腺体萎缩,炎性细胞全层浸润;脾胃培源方可明显改善及修复大鼠胃黏膜,减轻胃黏膜损伤。结论 脾胃培源方可促进CAG模型大鼠体质量增长,改善及修复大鼠胃黏膜,作用机制与其抑制COX-2的过度表达密切相关。
陈亮亮丁义侠
关键词:慢性萎缩性胃炎胃黏膜环氧合酶-2
HIRA基因突变对绵羊颗粒细胞中mRNA蛋白表达及细胞激素分泌的影响
2023年
以绵羊颗粒细胞为研究对象,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)免疫荧光技术检测组蛋白细胞周期调节(histone cell cycle regulator,HIRA)基因g.71874104G>Ag.71833755T>C位点突变引起的mRNA蛋白表达以及孕酮(progesterone,P4)雌二醇(estradiol,E2)分泌水平在绵羊卵巢颗粒细胞中的变化。结果表明:g.71874104G>Ag.71833755T>C位点突变均导致卵巢颗粒细胞中HIRA蛋白表达发生显著变化(P<0.05),但HIRA基因的mRNA表达量均无明显差异,并且仅g.71874104G>A突变位点对P4E2的分泌有显著影响(P<0.05)。由此推测HIRA基因的g.71874104G>Ag.71833755T>C两个突变位点通过改变绵羊卵巢颗粒细胞中HIRA蛋白表达量,进而影响后续的受精胚胎发育过程,最终影响绵羊的生殖能力。
周梅刘秋月刘秋月田志龙向光明狄冉狄冉王翔宇
关键词:绵羊蛋白表达激素分泌
安寐汤对失眠大鼠心肌线粒体COXⅠ、ⅣmRNA蛋白表达的影响
2023年
目的探讨安寐汤对失眠大鼠心肌线粒体COXⅠ、ⅣmRNA蛋白表达的影响。方法取6月龄大鼠随机分为正常组、模型组、地西泮治疗组、安寐汤低、中、高剂量治疗组,超活染色判断线粒体数量功能的完整性,实时荧光定量PCR检测COXⅠ、ⅣmRNA相对表达量,Elisa检测COXⅠ、Ⅳ蛋白表达浓度。结果(1)安寐汤低、中、高剂量可增加失眠大鼠心肌线粒体COXⅠ、Ⅳ蛋白表达量,且以中剂量治疗组的增量最多并与模型组相比具有统计学意义(P<0.05)。(2)与模型组相比,安寐汤低、中、高剂量治疗组大鼠心肌线粒体COXⅠ、ⅣmRNA表达量均具有统计学意义(P<0.05),其中以中剂量治疗组的增量最为明显且与低、中剂量治疗组相比均具有统计学意义(P<0.05)。结论安寐汤改善大鼠失眠可能与增加心肌线粒体COXⅠ、ⅣmRNA蛋白表达有关,但量-效关系不明显。
冯庭宇叶笑寒李盛青孙权吕薇许晓伍
关键词:PCPA失眠心肌细胞色素氧化酶
复方中草药对运输后肉牛应激蛋白mRNA蛋白表达水平的影响
2023年
文章旨在研究复方中草药对运输后肉牛应激蛋白mRNA蛋白表达水平的影响,试验将40头健康、体重相近的荷斯坦育肥牛随机分成4组,每组10个重复,分别为对照组(1组)、0.5%(2组)、1.0%(3组)、1.5%(4组)复方中草药添加组,饲喂14 d后模拟运输应激。采用ELISA测定运输前、后荷斯坦育肥牛血清中HSP 70含量,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)Western Blotting分别测定运输后组织中HSP 70、HSP 90及HSP 27的mRNA蛋白质水平的表达量。结果显示,运输后的各组荷斯坦育肥牛血清中HSP 70含量均高于运输前的(P<0.05),与对照组相比,试验3、4组试验运输前运输后荷斯坦育肥牛血清中HSP 70含量显著降低(P<0.05),试验3、4组运输后的肉牛肌肉组织HSP 27、HSP 70及HSP 90的mRNA的表达量显著降低(P<0.05);试验3、4组运输后的肉牛肌肉组织HSP 70HSP 90蛋白表达量显著降低(P<0.05)。说明运输可以提高肉牛血清肌肉组织中应激蛋白含量,添加不同水平的复方中草药可以降低运输后肉牛血清及肌肉组织中应激蛋白的水平,以添加量为1.0%较适宜。
隋明吴亚楠
关键词:复方中草药应激应激蛋白QRT-PCR
艾瑞昔布对CYP2C9酶活性及mRNA蛋白表达的影响被引量:4
2022年
目的:评价艾瑞昔布对CYP2C9酶活性及mRNA蛋白表达的影响。方法:采用超高效液相色谱(UPLC),色谱柱:Acquity UPLC BEH-C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相为水-乙腈(76∶24,V/V);流速0.4 mL·min^(-1);检测波长235 nm;柱温30℃;进样量2μL;内标为卡马西平。选择甲苯磺丁脲为CYP2C9酶特异性探针药物,与艾瑞昔布在肝微粒体中共同孵育,UPLC测定代谢产物4-羟基甲苯磺丁脲的生成量,考察艾瑞昔布对CYP2C9酶活性的影响。Wistar大鼠给予艾瑞昔布,RT-PCRWestern Blot测定肝组织中CYP2C9酶活性及mRNA蛋白表达。结果:随着艾瑞昔布浓度的升高,肝微粒体孵育体系中4-羟基甲苯磺丁脲生成量降低,艾瑞昔布对CYP2C9活性呈剂量依赖性抑制作用,IC_(50)值为74.77μmol·L^(-1);随着给药时间延长,大鼠肝脏CYP2C9酶的mRNA蛋白表达减少(P<0.05)。结论:艾瑞昔布可降低CYP2C9酶的mRNA蛋白表达,剂量依赖性抑制CYP2C9酶的活性,由于抑制作用较弱,产生CYP2C9催化的有临床意义的药物相互作用可能性较小。
董杰王可欣何文娟靳怡然张志清
关键词:艾瑞昔布MRNA表达蛋白表达药物代谢
黄芪-莪术配伍联合5-氟尿嘧啶对CT26.WT结肠癌原位移植瘤模型小鼠中Th17/Treg平衡及肿瘤相关mRNA蛋白表达的影响被引量:11
2022年
黄芪-莪术配伍是临床常用治疗肿瘤的组合,基于Th17/Treg细胞平衡探究黄芪-莪术配伍联合5-氟尿嘧啶(5-fluo-rouracil,5-FU)对结肠癌原位移植瘤模型小鼠肿瘤生长的可能作用机制。该研究将90只BALB/c雄性小鼠随机分为9组:空白组,模型组,5-氟尿嘧啶(5-FU)组,黄芪-莪术(2∶1)配伍高、中、低剂量组,联合5-FU高、中、低剂量组,每组10只。除空白组外其余各组小鼠建立CT26.WT结肠癌原位移植瘤模型。术后24 h空白组与模型组给予生理盐水灌胃(10 mL·kg^(-1),每日1次);5-FU组用5-FU腹腔注射(25 mg·kg^(-1),隔日1次);黄芪-莪术高、中、低剂量组分别用黄芪-莪术药液灌胃(12、6、3 g·kg^(-1),每日1次);联合高、中、低剂量组分别用黄芪-莪术相应剂量灌胃5-FU腹腔注射,用药剂量方法同上。各组均干预3周后处死小鼠取肿瘤组织,称瘤体质量并计算平均瘤重;检测各组小鼠脾组织CD4^(+)T淋巴细胞中辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)百分比变化趋势;检测转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、Smad4、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)在血液中mRNA表达水平及肿瘤组织中蛋白表达水平。结果表明,与模型组比较,各给药组小鼠瘤体质量均降低(P<0.01);各给药组小鼠脾组织中CD4^(+)IL-17;均有不同程度降低(P<0.001),CD4^(+)Foxp^(3+)细胞比例均升高(P<0.001或P<0.05),表明Th17/Treg始终保持动态平衡,且联合用药组的效果优于其他组别;各给药组血液中TGF-β、TNF-α、IFN-γ、Smad4、N-cadherin、MMP-7 mRNA及原位移植瘤中TGF-β、TNF-α、IFN-γ、Smad4、N-cadherin、MMP-7蛋白表达均不同程度降低(P<0.01或P<0.001),并且呈一定剂量依赖性。黄芪-莪术配伍联合5-FU可抑制CT26.WT结肠癌小鼠原位移植瘤的生长,其机制可能与维持体内Th17/Treg的动
郭文晖齐卓操关汉卿刘甜甜梁立余倩慧梁研唐德才
关键词:莪术结肠癌TH17/TREG
AT1R-Crim1信号通路在乳鼠肥大心室肌细胞Kir2.1mRNA蛋白表达调控中的作用
2022年
目的探讨血管紧张素Ⅱ受体1型(AT1R)—半胱氨酸丰富跨膜成骨蛋白调控因子(Crim1)信号通路在乳鼠肥大心室肌细胞编码内向整流钾电流离子通道的Kir2.1 mRNA蛋白表达调控中的作用。方法分离1 d龄SD大鼠乳鼠心室获心室肌细胞,给予腺病毒空载体(Ad-Null)、Crim1基因重组腺病毒载体(Ad-Crim1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/或氯沙坦(Los)分组干预。实时荧光定量逆转录PCR检测肌球蛋白重链β(β-MHC)、Kir2.1Crim1的mRNA表达。Western免疫印迹法检测全细胞提取蛋白Kir2.1Crim1的表达,细胞结晶紫染色测量表面积。结果AngⅡ干预24 h明显增加心室肌细胞β-MHC的mRNA表达及细胞面积;下调Crim1Kir2.1的mRNA蛋白表达。Ad-Crim1Los干预明显抑制AngⅡ干预的上述效应;Ad-Crim1联合Los较Ad-Crim1单独应用能更显著抑制AngⅡ刺激的上述效应。结论AT1R-Crim1信号通路参与乳鼠肥大心室肌细胞Kir2.1 mRNA蛋白表达的调控。
霍照美杨英杨龙何炯红夏桂玲郭楚娴
刺五加皂苷B对冷应激小鼠下丘脑Hsp70及应激激素mRNA蛋白表达量的影响被引量:3
2022年
为探讨刺五加皂苷B对小鼠下丘脑抗冷应激的调控作用,以小鼠下丘脑为模型,应用实时荧光定量PCRWestern-blot方法,测定相关基因Hsp70、CRH、ACTH、TRH mRNA蛋白表达量。结果显示,冷应激条件下,4 mg/kg刺五加皂苷B对小鼠下丘脑抗冷应激相关因子激素具有上调的作用,能够显著提高Hsp70、ACTH、TRH、CRH蛋白基因的相对表达量。说明刺五加皂苷B对冷应激小鼠下丘脑具有保护作用,此保护作用是通过诱导激活SAM系统、HPA轴HPT轴,从而增加下丘脑中ACTH、TRH、CRH等抗应激激素含量,并且使得应激蛋白Hsp70表达增强,提高冷应激小鼠抗冷应激能力。
孙胜悦杨连玉杨文艳
关键词:冷应激HSP70应激激素
利拉鲁肽对高糖诱导足细胞损伤后相关蛋白mRNA蛋白表达的影响及其机制被引量:4
2021年
目的:观察胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂利拉鲁肽对高糖诱导足细胞损伤后相关蛋白mRNA及蛋白表达的影响,并探讨其作用机制。方法:将分化成熟的足细胞随机分为对照组、高糖组、甘露醇对照组、利拉鲁肽组高糖+利拉鲁肽组。提取各组细胞RNA,应用Real-time PCR(RT-PCR)法检测各组足细胞中Nephrin、PodocinZO-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中Nephrin、Podocin、ZO-1、Bcl-2caspase-3蛋白表达水平,免疫荧光法观察足细胞中骨架蛋白Synaptopodin表达情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。将分化成熟的足细胞随机分为对照组、高糖组、高糖+利拉鲁肽组、高糖+利拉鲁肽+LY294002组。采用Western blotting法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路转导蛋白、Bcl-2caspase-3表达水平。结果:与对照组比较,高糖组足细胞中标志蛋白Nephrin、PodocinZO-1 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05),caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05),足细胞特异性骨架蛋白Synaptopodin荧光强度明显降低(P<0.05),足细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与高糖组比较,高糖+利拉鲁肽组足细胞中Nephrin、PodocinZO-1 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05),caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05),足细胞特异性骨架蛋白Synaptopodin荧光强度明显升高(P<0.05),足细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。与对照组比较,高糖组足细胞中PI3KpAkt蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05),caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05);与高糖组比较,高糖+利拉鲁肽组足细胞内PI3K磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平明显升高(P<0.05),凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05),caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05),与高糖+利拉鲁肽组比较,高糖+利拉鲁肽+LY294002组足细胞中PI3K磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平降低(P<0
祁冰雪马彦张艺献孙亚东苗里宁
关键词:足细胞胰高血糖素样肽1利拉鲁肽磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B
小儿健脾膏对胃动力障碍大鼠胃肠组织中胃动素mRNA蛋白表达的影响被引量:5
2021年
目的研究比较小儿健脾膏优化方原方对胃动力障碍大鼠的影响,探讨其可能的分子生物学机制。方法以胃排空率小肠推进率为检测指标,分别测定小儿健脾膏原方优化方对胃肠功能障碍大鼠胃肠功能的影响,并检测大鼠血清中胃动素(motilin,MTL)含量、胃液总酸度、胃蛋白酶活性,通过Western blotting实验测定大鼠胃肠组织中MTL mRNA蛋白的相对表达量。结果小儿健脾膏原方优化方对胃肠功能障碍大鼠的胃排空肠推进均有促进作用,二者疗效相当。小儿健脾膏原方优化方组大鼠血清中MTL含量、胃液总酸度、胃蛋白酶活性较模型组显著升高,胃窦十二指肠中MTLm RNAMTL蛋白表达较模型组明显上升,优化方促胃肠MTL蛋白表达作用强于原方。结论小儿健脾膏原方优化方均有明显的促胃肠动力的作用,二者强度相当,其机制可能与促进MTL蛋白酶分泌,提升胃窦十二指肠MTL mRNA蛋白表达有关。
杨伟金杨明华陈婉姬
关键词:小肠推进胃动素

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郑洪新
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