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水稻成熟种子总RNA提取方法的比较研究
2024年
采用PLANTeasy植物RNA提取试剂盒法(PLANTeasy法)、Trizol法、EASYspin植物RNA快速提取试剂盒法(EASYspin法)、CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)-LiCl沉淀法、改良CTAB+过柱法等5种方法提取水稻成熟种子的总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分析和安捷伦2100生物分析仪对总RNA样品进行质量与纯度检测,并以反转录PCR(RT-PCR)检测actin基因的目的条带,旨在明确获得水稻成熟种子高质量总RNA的最佳提取方法。结果显示,EASYspin法和改良CTAB+过柱法提取的总RNA样品的质量与纯度较高,以其提取的总RNA为模板并通过RT-PCR扩增均可获得明亮、单一的目的基因条带。尤其是改良CTAB+过柱法提取的总RNA产率高且完整性好,更适合水稻种子总RNA提取
廉添添袁会峰孙强许园园刘慧
关键词:水稻种子RNA提取
尿液总RNA提取方法
本发明提供了尿液总RNA提取方法,核心是利用磁珠将尿液样本中的DNA与RNA进行结合,利用负压或离心装置对磁珠混合液进行吸附柱过滤,使结合核酸的磁珠覆在吸附柱膜上,再利用DNA酶对核酸中的DNA进行消化,随后经过磁珠漂洗...
毛丰肖欢颜虹龚波曾祥殷剑峰王春香
四种类型竹种竹叶总RNA提取方法的比较研究
2024年
为探索适合不同类型竹种竹叶总RNA提取方法,本研究选取合轴丛生型竹种勃氏甜龙竹、合轴散生型竹种云南箭竹、单轴散生型竹种毛竹、复轴混生型竹种巴山木竹为代表,提取其心叶的总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,利用超微量紫外分光系统检测RNA的纯度和浓度,比较自配TRIzol试剂法、商品化TRIzon试剂法、RNA提取试剂盒法、改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法四种方法提取的竹叶总RNA的质量、纯度和提取成本的差异。结果表明,自配TRIzol试剂法可以提取出质量好、浓度高的竹叶总RNA,且提取成本较低;商品化TRIzon试剂法提取的总RNA质量及浓度仅次于自配TRIzol试剂法,提取成本稍高;而RNA提取试剂盒法和改良CTAB法无法提取出高浓度的竹叶总RNA。本研究结果为竹类植物更深入的分子生物学研究提供了一定的基础,并为其他竹类植物总RNA提取提供了参考依据。
马迎春王曙光王曙光于丽霞詹卉高若天于丽霞
关键词:竹叶RNA提取隶属函数
猫爪草总RNA提取方法效果比较
2024年
为筛选出适合猫爪草病害鉴定的RNA提取方法,以阜南县人工栽培感病猫爪草叶片为试验材料,比较 Trizol 、RNAiso Plus、CTAB 及SDS四种提取RNA的方法。通过琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,使用Nano drop 2000超微量紫外分光系统检测RNA的纯度和浓度。结果表明,四种方法均能从感病猫爪草叶片提取出总RNA,Trizol法提取RNA条带清晰完整,获得率高,质量浓度最佳,适用于后续猫爪草病害分子检测对RNA样品品质的要求。
朱阳阳汪作琳郭光明谈珍妮张婷婷
关键词:药用植物猫爪草RNA提取TRIZOL
基于LiCl法优化酿酒葡萄叶片的RNA提取
2024年
为获得纯度高、质量好的酿酒葡萄植株叶片RNA以用于荧光实时定量分析,为后续以酿酒葡萄叶片RNA为材料研究相关转录水平的调控提供技术保障,以经典酿酒葡萄赤霞珠叶片为试验材料,比较分析了重蒸酚法、Trizol法、改良的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和LiCl法(基于改良的SDS法)4种方法对酿酒葡萄叶片RNA提取的影响。结果表明,重蒸酚法提取RNA浓度较低,完整性较差,存在部分降解;Trizol法提取RNA则有部分DNA污染;改良CTAB法提取浓度较高,但蛋白和DNA污染严重;LiCl法提取结果显示,28S的条带亮度是18S的2倍,条带无拖尾,完整性较好,存在DNA污染和少量的蛋白污染。进一步在LiCl法基础上利用醋酸钠、DNAase消化、苯酚抽提法进一步优化,并采用荧光实时定量验证,结果表明,醋酸钠的加入RNA质量无明显改善;然而,经氯仿和水饱和酚(体积比1∶1)抽提2次,氯仿抽提1次,氯仿和水饱和酚(体积比1∶1)抽提1次,并经DNAase进行消化,最终提取出质量浓度为173.611μg/mL、A_(260/280)为1.803纯度高、完整性较好且无蛋白和DNA污染的葡萄叶片总RNA;经实时荧光定量PCR进一步验证,该方法提取RNA经反转录后获得较好的扩增曲线以及融解曲线,并能够对相关基因进行定量分析。
成丹丹范丽娜王美娇于放王燕燕
关键词:酿酒葡萄赤霞珠RNA提取QRT-PCR
COVID-19 RNA提取期间不同压力下的通风系统对实验室污染的影响
2024年
目的探究COVID-19 RNA提取期间不同压力下的通风系统对实验室污染的影响.方法聚合酶链式反应(PCR)实验室通风系统在开启负压及关闭负压条件下,提取新型冠状假病毒核酸,对于空气及实验室表面的污染情况,确定操作风险区域.本实验分为两部分,一部分为真实场景试验,另一部分为气溶胶发生器模拟实验意外喷洒实验.结果真实场景试验:开启负压,Ⅰ室空气采样呼吸道合胞假病毒(RSV),新型冠状假病毒(2019-nCoV)均为阴性,甲型流感和乙型流感假病毒(H1N1亚型)(ABH1)紫外消毒后门口采样出现阳性;Ⅱ室空气采样ABH1结果均为阴性,RSV在冰箱处出现阳性.2019-nCoV操作中均出现阳性,紫外消毒后仅冰箱处出现阳性,消毒后未出现阳性结果.擦拭采样中,Ⅰ室和Ⅱ室利用ABH1、RSV、2019-nCoV溶液在操作中和紫外后均存在有较多污染,消毒后结果均由阳性转阴或Ct值变大;关闭负压,Ⅰ室空气采样RSV反应液操作中,窗户采样出现阳性;擦拭采样在冰箱和门把手、传递柜把手、桌子处均出现阳性.Ⅱ室ABH1反应液空气采样操作中均为阳性,紫外消毒后冰箱空气采样仍为阳性;Ⅱ室擦拭采样操作中除桌子1外均出现阳性,消毒后门把手、冰箱把手、生物安全柜表面仍为阳性.气溶胶模拟意外喷溅试验,实验室Ⅱ开启负压和关闭负压,均未出现阳性结果.结论非负压条件下呈现的点较负压条件下多,说明负压可能对生物安全柜实验的防控起到一定作用;在实验过程中以实验员手套为传播源的污染较多;规范操作使用生物安全柜,自带的防污染系统和紫外消杀系统可防止污染;实验室做好消毒工作的同时也要做好清洁防止实验室污染.
李丹李丹刘甜恬朱丹丹侯铁英张玉
关键词:实验室安全实验室污染负压
一种RNA提取试剂盒及RNA提取方法
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种用于血液RNA提取的裂解结合液、RNA提取试剂盒及RNA提取方法。利用该裂解结合液直接对血样样本中的RNA进行提取,无需裂解离心分离红细胞,获得的RNA质量较高,满足各种实验需要,可直...
庞经昊黄明贤任辉
制样方法对菊花花蕾激光显微切割样品RNA提取质量的影响
2024年
[目的]研究不同固定剂及切片制样方式对菊花花蕾激光显微切割样品RNA提取质量的影响。[方法]以丙酮和乙醇冰醋酸2种试剂固定菊花花蕾,采用石蜡和冰冻切片2种方式制作样本,显微切割并收集最外两轮小花原基,提取RNA后比较提取质量。[结果]石蜡和经梯度蔗糖保护的冰冻切片均能很好地保存花蕾组织形态,就石蜡切片而言,乙醇冰醋酸固定组织切割样品的RNA降解明显低于丙酮固定样品;而2种固定剂的冰冻切片切割样品RNA提取质量无明显差异。与石蜡切片相比,冰冻切片显微切割样品RNA质量更高。切割时收集管盖加入RNA提取缓冲液可明显缓解RNA降解。显微切割的不同品种菊花花原基与花发育有关的基因表达水平存在差异,表明切割获得的材料可用于下一步研究。[结论]植物组织经乙醇冰醋酸固定、梯度蔗糖保护后冰冻切片进行显微切割效果较佳,可富集特异组织或细胞并从中获得较高质量的RNA
马月花丁莲张雪赵坤坤陈素梅
关键词:固定剂石蜡切片冰冻切片激光显微切割RNA
网纱袋在高纤维植物总RNA提取中的应用
2024年
以南瓜嫩种子、黄瓜嫩种子、松树老枝、辣椒老枝、牡丹老枝、蔷薇老枝、兰花根等高纤维植物组织为材料,在植物组织低温速冻研磨过程中引入网纱袋,对纤维植物总RNA提取方法进行了优化。网纱袋的使用极大提高了高纤维的老枝、种子和根等组织总RNA提取的品质和浓度,带型清晰、完整性好、纯度和产率高,得率可提高2倍以上。总RNA提取方法的优化,适用于高纤维植物组织总RNA快速、高效地提取,便于高效RNA试剂盒提取的开发和应用,具有较强的实践价值和理论意义。
于晓云王晶晶宋相尚葛红贾瑞冬赵鑫杨树华寇亚平
关键词:总RNA提取
一种用于RNA提取的皮肤样本处理方法
本发明公开了一种用于RNA提取的皮肤样本处理方法,包括如下步骤:皮肤样本采用液氮速冻保存;转移样本至磨样管中,磨样管中添加2‑3颗5mm研磨珠,磨样管置于干冰上预冷;含有样本的磨样管转移至液氮中,速冻25‑35min;打...
林彬郎秋蕾钱海峰王楠

相关作者

丁勇
作品数:77被引量:219H指数:10
供职机构:西南林业大学
研究主题:越桔 基因克隆 铁皮石斛 甘蓝型油菜 RNA提取
张琳
作品数:294被引量:1,510H指数:19
供职机构:东北林业大学
研究主题:油桐 油茶 砂梨 S基因型 自交不亲和性
谭晓风
作品数:486被引量:3,587H指数:34
供职机构:中南林业科技大学
研究主题:油茶 油桐 自交不亲和性 S基因型 自交不亲和
陈放
作品数:369被引量:3,213H指数:32
供职机构:四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室
研究主题:麻疯树 水稻 愈伤组织 CURCIN 核糖体失活蛋白
沙伟
作品数:257被引量:1,301H指数:18
供职机构:齐齐哈尔大学生命科学与农林学院
研究主题:毛尖紫萼藓 东亚砂藓 干旱胁迫 基因克隆 植物