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诸琦
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- 所属机构:余姚市人民医院
- 所在地区:浙江省 宁波市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
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- 王晓瑾江石湖诸琦
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- 曹海霞诸琦丁健青张愫姚玮艳钱爱华周琳章永平
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- 利用PCR方法合成EEF1A2的基因全长,经NotⅠ和NsiⅠ酶切后克隆到慢病毒载体pGLV5-EF1a-EGFP/Puro上。构建的重组质粒pGLV5/EEF1A2经PCR、酶切及测序鉴定正确后,利用慢病毒表达系统(pGLV5 Lentiviral Expression Systems),将重组质粒与包装系统质粒(pVSV-G,pGag/Pol,pRev)4质粒共转染293T细胞,收集培养上清并感染人胰腺癌SW1990细胞,经嘌呤霉素筛选出稳定过表达细胞株EEF1A2/SW1990。Real-time PCR和West-ern blot检测结果显示EEF1A2在EEF1A2/SW1990细胞中表达较原代细胞明显增高(P<0.05),MTT结果显示EEF1A2/SW1990细胞的增殖能力亦较原代细胞显著增强(P<0.05)。成功构建了EEF1A2基因的慢病毒载体质粒pGLV5-EEF1A2及其慢病毒表达系统,并筛选出稳定过表达EEF1A2的人胰腺癌细胞株EEF1A2/SW1990。
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- 众所周知,食物的分解消化从口腔开始。细嚼慢咽,充分利用口腔内消化这一道工序将为我们的健康带来颇多益处。整个口腔消化的过程即:唾液分泌、咀嚼和吞咽。
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- 目的讨论鼻内镜下运用低温等离子选择性消融切断翼管神经分支术治疗重度变应性鼻炎的疗效。方法笔者医院针对20例重度变应性鼻炎患者予以鼻内镜下利用低温等离子消融技术行选择性翼管神经分支切断术进行治疗,手术后3个月及6个月分析比较患者VAS评分、临床症状评分及眼睛干涩无泪症状的发生情况。结果手术后3个月及6个月,患者VAS评分及临床症状评分都出现明显下降,统计学分析差异有显著意义(P<0.05),术后无一例出现眼睛干涩无泪症状。结论鼻内镜低温等离子消融选择性翼管神经分支切断术治疗变应性鼻炎具有以下优点:术中出血少,手术视野良好,治疗效果明显,术后无干眼症状的发生,值得推广。
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- EEF1A2嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量:2
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- 目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长,构建其重组腺病毒载体。方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF1A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF1A2。利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316-EEF1A2共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2,经过在293细胞中包装和扩增之后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2。PCR、WesternBlot检测EEF1A2基因的表达。结果:用RT-PCR方法,从人胰腺癌组织中扩增出1400bp的cDNA片段,经测序证实为人EEF1A2基因。构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-EEF1A2。结论:成功地克隆了人EEF1A2基因全长,并构建其表达的重组腺病毒载体,为进一步研究人EEF1A2基因在相关疾病中的作用奠定了基础。
- 曹海霞诸琦章永平黄佳张愫姚玮艳
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- 孙蕴伟诸琦
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- 胰腺疾病的实验及临床研究
- 该研究利用犬AHNP模型,证实Oddi's括约肌(SO)功能失调确属AHNP发展的要素,且8、14肽生长抑素均能显著降低AHNP时SO的基础压或时收缩幅度,并发现芍药甙俱与上述类同的作用,而大黄素则对其无影响.进而,运用...
- 诸琦
- 关键词:胰腺疾病ODDI括约肌大黄素
- 人类真核翻译延长因子1A2在胰腺癌的表达及其抑制凋亡致癌机制研究
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- 文献传递