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曹学兵
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- 所属机构:华中科技大学同济医学院
- 所在地区:湖北省 武汉市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 孙圣刚
- 作品数:733被引量:2,827H指数:23
- 供职机构:华中科技大学同济医学院
- 研究主题:帕金森病 脑缺血 重症肌无力 帕金森病大鼠 左旋多巴
- 童萼塘
- 作品数:311被引量:1,661H指数:21
- 供职机构:华中科技大学同济医学院
- 研究主题:帕金森病 脑缺血 帕金森病大鼠 细胞凋亡 银杏叶提取物
- 徐岩
- 作品数:45被引量:148H指数:8
- 供职机构:华中科技大学同济医学院
- 研究主题:异动症 帕金森病 左旋多巴 左旋多巴诱发异动症 大鼠纹状体
- 王云甫
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- 研究主题:重症肌无力 树突状细胞 脑梗死 实验性自身免疫性重症肌无力 小鼠
- 王涛
- 作品数:188被引量:895H指数:14
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- 研究主题:帕金森病 鱼藤酮 脓毒症 帕金森病大鼠 细胞凋亡
- 细胞外信号调节激酶参与调节鱼藤酮介导的嗜铬细胞瘤细胞损伤被引量:3
- 2009年
- 目的探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal—regulated kinase,ERK)1/2在鱼藤酮介导的多巴胺能细胞损伤中的信号调节机制。方法鱼藤酮处理体外培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PCI2)细胞株,建立帕金森病细胞模型。采用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)比色法检测鱼藤酮对PCI2细胞活力的影响,免疫组织化学方法观察鱼藤酮对磷酸化ERKl/2(p-ERK1/2)表达的影响,免疫印迹法研究p-ERKl/2蛋白表达随时问变化的趋势,并检测ERK1/2上游激酶抑制剂PD98059对鱼藤酮诱导ERK1/2磷酸化及细胞活力的影响。结果PCI2细胞随鱼藤酮(5Ixmol/L)作用时间的增加,细胞吸光度(%)出现下降,1h降至对照组的75.46±5.47,2、4、8h分别降至70.42±1.94、65.23±0.96、59.04±2.85,24h降至29.64±1.63,各时间点差异有统计学意义(F=143.014,P=0.000);与对照组(100.00±2.89)比较,q值分别为17.07、20.58、24.19、28.50、48.95,均P〈0.叭。镜下观察显示鱼藤酮处理的细胞中有明显p-ERKl/2聚集;免疫印迹实验结果显示,随鱼藤酮作用时间的增加,p-ERK1/2出现双相表达升高,30min开始升高,1—2h达高峰,4h转而降低,8h又重新升高,16h后基本消失;PD98059明显抑制鱼藤酮导致的ERK1/2磷酸化,明显减低了细胞损伤的程度。结论在鱼藤酮介导的多巴胺神经元损伤中呈现ERKl/2双相活化,该过程可能在调控PD多巴胺能细胞损伤中起重要作用。
- 王洪财张振涛王涛曹学兵孙圣刚
- 关键词:PCI2细胞鱼藤酮
- RNA干扰靶向抑制三磷酸甘油醛脱氢酶表达对鱼藤酮所致神经毒性的影响被引量:1
- 2009年
- 目的研究RNA干扰(RNAi)技术能否有效抑制三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的表达以及对鱼藤酮所致神经毒性的影响。方法体外化学合成针对GAPDH基因的小干扰RNA(siRNA),通过脂质体Lipofectamine 2000瞬时转染后采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和蛋白免疫印迹分析(Western blot)进行干扰效果的鉴定;使用激光共聚焦荧光显微镜观察干扰对鱼藤酮诱导的GAPDH定位和结构改变的影响;用流式细胞仪检测线粒体膜电位变化。结果实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹分析显示,化学合成的siRNA可有效抑制细胞内GAPDH mRNA和蛋白水平的表达;激光共聚焦荧光显微镜观察显示,干扰GAPDH表达的细胞可减少鱼藤酮所致的GAPDH的聚集及核转位;流式细胞仪检测发现干扰GAPDH的表达可部分抵抗鱼藤酮所致的细胞线粒体膜电位的下降。结论下调GAPDH的表达可以减少鱼藤酮所致的细胞内GAPDH的聚集和核转位,减少线粒体膜电位的下降,提示GAPDH可能是鱼藤酮所致神经毒性的重要分子靶点。
- 黄金莎郝丽君熊念王涛曹学兵梁直厚孙圣刚
- 关键词:3-磷酸甘油醛脱氢酶RNA干扰线粒体膜电位
- 实验性重症肌无力大鼠模型的研究(英文)被引量:1
- 2006年
- 目的从丁氏双鳍电鳐的电器官分离乙酰胆碱受体(AChR)免疫大鼠,建立实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物模型。方法参照徐氏法从丁氏双鳍电鳐的电器官提取AChR蛋白,并采用Folin-酚试剂法及酶联免疫吸附法检测提取蛋白的含量及活性;以提取的蛋白主动免疫Lewis大鼠,每天观察其临床表现,并于免疫后7周进行低频重复电刺激、单纤维肌电图及血清中AChRAb水平的检测。结果提取蛋白的含量为35.4mg/mL,AChR提取物可以与阳性血清中的AChRAb发生结合反应。免疫后1周左右,实验组有3只大鼠出现轻度的肌无力症状,持续2 ̄5d自行缓解;免疫后5周左右实验组8只大鼠均表现出不同程度的肌无力症状。实验组大鼠低频重复电刺激阳性率达75%,其衰减率明显高于对照组。实验组大鼠单肌纤维动作电位平均连续差(MCD)值与正常对照组比较明显延长(P<0.01),而福氏完全佐剂(CFA)对照组与正常对照组间MCD值无明显差异。实验组大鼠AChRAb水平明显高于CFA对照组(P<0.01);实验组7只大鼠AChRAb的P/N值>2.1,而CFA对照组P/N值均<1.4。结论从丁氏双鳍电鳐的电器官提取的AChR蛋白成功地诱导EAMG动物模型,可为重症肌无力进一步研究创造条件。
- 王云甫孙圣刚何国厚何晓阔陈吉相曹学兵尤春景
- 关键词:重症肌无力乙酰胆碱受体主动免疫
- NGFI-β与左旋多巴治疗诱发帕金森病异动症形成关系的研究
- 2006年
- 目的研究纹状体区神经生长因子诱导蛋白-β(NGFI-β)的表达变化在左旋多巴诱发的异动症(LID)形成中所起的作用。方法分别以SCH23390(D1受体拮抗剂)、氟哌啶醇(D2受体拮抗剂)治疗LID大鼠,观察LID大鼠的行为学改变并用逆转录聚合酶链反应技术检测其纹状体区NGFI-βmRNA表达的变化。结果SCH23390治疗后,LID大鼠异常不自主运动明显减少,而氟哌啶醇治疗后则无明显改变。氟哌啶醇治疗后纹状体NGFI-βmRNA的表达较治疗前明显增多,而SCH23390治疗后无明显改变。结论大鼠纹状体区NGFI-β基因的表达变化与LID的形成有关,直接通路活动异常及基底节环路功能异常参与大鼠LID的发生。
- 牛轶瑄魏桂荣曹学兵袁光雷徐岩孙圣刚
- 关键词:异动症左旋多巴帕金森病
- 3-硝基丙酸多次预处理对多巴胺能神经元的保护机制(英文)
- 2006年
- 背景:帕金森病的主要病理改变在于中脑黑质的多巴胺神经元不可逆转的变性减少,而氧化应激反应在帕金森病的发病过程中起着十分重要的作用。3-硝基丙酸为线粒体复合体-I抑制剂,它可抑制氧化磷酸化作用从而抑制能量代谢,但德国Riepe教授发现小剂量的3-硝基丙酸可以提高神经元对缺血缺氧的耐受性,它是否可以增强多巴胺神经元对神经毒素的耐受性尚不得而知。目的:认识3-硝基丙酸多次预处理对帕金森病的预防及可能的机制。设计:对照观察动物实验。单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院神经科。材料:实验于2004-03/07在华中科技大学同济医学院附属协和医院神经科实验室进行。C57BL小鼠48只,体质量18~20g,鼠龄二三个月,雌雄不限。小鼠随机分为6组,每组8只:①空白对照组:不用任何药物。②单次3-硝基丙酸组:仅腹腔注射3-硝基丙酸1次。③多次3-硝基丙酸组:每隔5d腹腔注射3-硝基丙酸,共5次。④神经毒素组:腹腔注射神经毒素,1次/d,共5次。⑤3-硝基丙酸单次预处理组:腹腔注射3-硝基丙酸1次,3d后腹腔注射神经毒素,1次/d,共5次。⑥3-硝基丙酸多次预处理组:腹腔注射3-硝基丙酸,每隔5d重复注射,共5次;3d后再腹腔注射神经毒素,1次/d,共5次。3-硝基丙酸和神经毒素腹腔注射剂量分别为20mg/kg及30mg/kg。方法:各组小鼠实验前及最后一次注射神经毒素后3d,分别应用爬杆实验及悬挂实验对小鼠进行运动协调评分。各组小鼠在全部药物注射完毕后3d,迅速处死,测定中脑黑质丙二醛及还原型谷胱甘肽含量。主要观察指标:①各组小鼠动作行为评分比较。②各组小鼠中脑黑质组织丙二醛含量的比较。③各组小鼠中脑黑质还原型谷胱甘肽含量的比较。结果:48只小鼠均进入结果分析。①经腹腔注射神经毒素后,小鼠爬杆实验,悬挂实验较对照组评分降低(P<0.01);经过3-硝
- 梁直厚邓学军孙圣刚梅元武曹学兵李红戈
- 关键词:帕金森病神经毒素类
- 实验性重症肌无力大鼠模型的研究被引量:21
- 2003年
- 目的 从丁(氏)双鳍电鳐的电器官分离乙酰胆碱受体(AChR)免疫大鼠,建立实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物模型。方法 参照徐浩鹏等方法从丁(氏)双鳍电鳐的电器官提取AChR蛋白,并采用Folin-酚试剂法及酶联免疫吸附法(ELISA)检测提取蛋白的含量及活性;以提取的蛋白主动免疫Lewis大鼠,每天观察其临床表现,并于免疫后7周进行低频重复电刺激、单纤维肌电图及血清中乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)水平检测。结果 提取蛋白的含量为35.4 mg/mL,AChR提取物可与阳性血清中的AChRAb发生结合反应。免疫后1周左右,实验组有3只大鼠出现轻度肌无力症状,持续2~5 d自行缓解;免疫后5周左右实验组8只大鼠均表现出不同程度肌无力症状。实验组大鼠低频重复电刺激阳性率达75%,其衰减率明显高于对照组。实验组大鼠单肌纤维动作电位平均连续差(MCD)值与正常对照组比较明显延长(P<0.01),而福(氏)完全佐剂(CFA)对照组与正常对照组间MCD值差异无显著性。实验组大鼠AChRAb水平明显高于CFA对照组(P<0.01);实验组7只大鼠AChRAb的P/N值≥2.1,而CFA对照组P/N值均<1.4。 结论 从丁(氏)双鳍电鳐电器官提取的AChR蛋白成功地诱导成EAMG动物模型,可为进一步研究重症肌无力创造一定条件。
- 王云甫孙圣刚曹学兵胡芳陈吉相俞善纯何晓阔尤春景
- 关键词:重症肌无力乙酰胆碱受体酶联免疫吸附法自身免疫性疾病
- 颈动脉体球细胞移植治疗帕金森病大鼠的分子机制研究被引量:2
- 2003年
- 目的 :探讨颈动脉体球细胞移植治疗帕金森病 (PD)大鼠的分子机制。方法 :采用 6 羟多巴胺 (6 OH DA)损毁制备偏侧PD大鼠模型 ,于损毁侧立体定向植入自体颈动脉体球细胞块 ,分别对移植后 2和 8周的纹状体组织切片行多巴胺 1受体 (D1R)mRNA(D1)、多巴胺 2受体 (D2 R)mRNA(D2 )、和Nurr相关因子 1(Nurr1)mRNA(Nurr1)的原位杂交分析。结果 :6 OHDA损毁侧纹状体内Nurr1和D1表达显著降低 ,D2 表达增高 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1) ;移植后Nurr1仅在移植物内呈高表达 ,而D1表达无明显改变 ,D2 表达则逐渐降低 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论 :移植物内Nurr1表达和D1、D2 表达的变化是颈动脉体球细胞移植治疗的分子调控基础。
- 曹学兵孙圣刚王涛童萼塘
- 关键词:颈动脉体帕金森病基因表达
- 未成熟树突状细胞诱导实验性自身免疫性重症肌无力耐受的试验研究被引量:9
- 2005年
- 目的 探讨未成熟树突状细胞(iDC)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的影响。方法 用小剂量粒 巨噬细胞集落刺激因子(GM -CSF)体外诱导骨髓前体细胞,获得的iDC用乙酰胆碱受体(AChR)负载后皮下接种同基因大鼠,3周后通过体外试验观察脾细胞对AChR的增殖反应,同时用AChR和完全弗氏佐剂(CFA)免疫大鼠,观察免疫-7周后MG相关指标的改变。结果 小剂量GM -CSF诱导所获得的iDC与成熟DC(mDC)相比,其表面MHCⅡ和共刺激分子CD80、CD86的表达低,摄取dextran -FITC的能力强但刺激同种T细胞增殖的能力弱。接种iDC、mDC、AChR负载的mDC的大鼠和对照组一样,体外脾细胞对AChR的刺激均强烈增殖,用AChR和CFA免疫后,产生明显的MG症状,重复电刺激出现明显衰减,血清AChRAb滴度明显增高,神经肌肉接头呈现典型的MG样改变;而接种AChR负载的iDC的大鼠脾细胞对AChR的刺激呈现明显的增殖抑制但对卵清蛋白的刺激仍强烈增殖,MG相关指标均未见明显改变。结论 骨髓前体细胞经小剂量GM -CSF诱导产生了iDC ,AChR负载的iDC可诱导EAMG耐受。
- 李罗清孙圣刚曹学兵王云甫
- 关键词:实验性自身免疫性重症肌无力粒-巨噬细胞集落刺激因子耐受完全弗氏佐剂ACHRAB重复电刺激
- 帕金森病患者parkin基因点的突变(英文)被引量:11
- 2003年
- 目的观察不同亚型帕金森病(PD)患者中是否存在parkin基因新的突变以及突变的分布,探讨parkin基因在PD发病机制中的可能作用。方法70例患者被分为早发性PD和晚发性PD,70例正常体检者为对照组。以提取基因组DNA为模板,扩增parkin基因的全部12个外显子,然后行单链构象多态性(SSCP)电泳观察,对泳动异常者进行DNA序列测定,以确定外显子中突变的存在及其分布。结果70例患者中发现4例SSCP泳动异常,测序证实在1例早发性PD患者的外显子7中存在一个未曾报道过的新的点突变位点Gly284Arg。结论parkin基因点突变也是我国早发性PD患者的致病原因之一。
- 王涛梁直厚孙圣刚曹学兵彭海曹非刘红进童萼塘
- 关键词:帕金森病PARKIN基因基因突变点突变
- 左旋多巴诱发异动症大鼠纹状体神经元可塑性的研究
- 目的左旋多巴诱发异动症(levodopa-induced dyskinesia,LID)是长期左旋多巴治疗帕金森病过程中出现的副作用,严重影响帕金森病患者的生活质量。目前认为异动症可能与左旋多巴波动性治疗引起的黑质多巴胺...
- 孙圣刚徐岩曹学兵
- 文献传递