吕茂民
所属机构: 军事医学科学院野战输血研究所 所在地区: 北京市 研究方向: 医药卫生 发文基金: 国家自然科学基金
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章金刚 作品数:332 被引量:766 H指数:13 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所 研究主题:猪内源性反转录病毒 血液制品 单克隆抗体 原料血浆 荧光定量 马玉媛 作品数:99 被引量:141 H指数:8 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所 研究主题:猪内源性反转录病毒 原料血浆 人细小病毒B19 异种移植 反转录病毒 赵雄 作品数:60 被引量:164 H指数:9 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所 研究主题:原料血浆 人细小病毒B19 血液制品 Α2-巨球蛋白 Α1抗胰蛋白酶 尹惠琼 作品数:134 被引量:222 H指数:9 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所 研究主题:蓝舌病病毒 荧光定量 钩端螺旋体 蓝舌病毒 实时荧光定量PCR 吴健敏 作品数:217 被引量:774 H指数:13 供职机构:广西兽医研究所 研究主题:猪内源性反转录病毒 猪瘟病毒 试剂盒 猪瘟 广西巴马小型猪
一种人蛋白C的表达方法及其专用引物与表达载体 本发明公开了一种人蛋白C的表达方法及其专用引物与表达载体。本发明所提供的扩增人蛋白C基因的专用引物为序列表中的SEQ ID №:1和SEQ ID №:2。人蛋白C的表达载体是含有人蛋白C基因的重组毕赤酵母表达载体pPIC... 章金刚 贾莉玮 吕茂民文献传递 异种器官移植中PERV病原安全性的研究进展 被引量:1 2002年 猪内源性反转录病毒 (porcine endogenous retrovirus,PERV)是指以前病毒 DNA形式整合进宿主细胞基因组中 ,并随细胞染色体复制而复制的反转录病毒。由于 PERV在体外可以感染人的多种细胞 ,这引起了人们对猪 -人异种移植病原安全性的广泛关注。本文从 PERV的生物学特性。 吕茂民 章金刚关键词:异种器官移植 基因组结构 人内皮抑素和人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的表达 目的:为了构建编码人内皮抑素/人血清白蛋白的重组表达质粒,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中获得高效表达。
方法:通过重叠延伸PCR的方法,将ES和HSA两片断连接,并将其克隆入pGEM-T载体中... 赵媛媛 吕茂民 杨梅 玛晶晶 章金刚关键词:人内皮抑素 人血清白蛋白 融合蛋白 毕赤酵母 重组表达质粒 增殖活性 文献传递 纤维蛋白止血敷料的免疫安全性研究 目的纤维蛋白止血敷料(Fibrin haemostatic dressings,FHD)是本课题组研制的1种新型可降解生物止血材料,由牛胶原蛋白、人纤维蛋白原等组成,主要应用于轻中度内脏伤和躯体伤的止血。FHD作为1种新... 赵雄 曹晓涵 马玉媛 冯晶晶 王卓 唐倩 吕茂民 尹惠琼 章金刚人凝血因子ⅦcDNA基因的克隆与鉴定 被引量:1 2007年 目的:克隆并鉴定人凝血因子ⅦcDNA基因。方法:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,从人胎肝总RNA中扩增人凝血因子ⅦcDNA基因,将其克隆入pGEM-T载体,对阳性克隆进行序列测定和分析。结果:经RT-PCR扩增和克隆,获得了人凝血因子ⅦcDNA基因,经序列分析表明,所克隆的基因序列正确。结论:本试验成功克隆了人凝血因子ⅦcDNA基因,为重组人凝血因子Ⅶ的研究奠定了基础。 吕茂民 周华蕾 姚站馨 章金刚关键词:反转录聚合酶链反应 克隆 嗜人性猪内源性反转录病毒感染性克隆感染人胚肾细胞HEK293后Stathmin蛋白差异表达分析 2010年 目的 分析嗜人性猪内源性反转录病毒(porcine endogenous retroviruses,PERV)感染的人源细胞中Stathmin蛋白的差异表达情况,探索嗜人性PERV感染人源细胞后可能产生的效应机制.方法 嗜人性PERV感染性克隆感染HEK293细胞,采用PCR、实时定量RT-PCR、免疫荧光分析确认PERV感染,利用实时定量RT-PCR和免疫印迹法分析Stathmin蛋白表达差异.结果 嗜人性PERV感染性克隆成功感染HEK293细胞,实时定量RT-PCR和免疫印迹法检测结果表明,PERV感染后Stathmin蛋白与对照相比表达上调.结论 嗜人性PERV感染HEK293细胞后Stathmin表达上调,该研究结果为深入研究嗜人性PERV与人源细胞的相互作用及PERV感染后的分子效应等提供了线索,也提示了PERV感染后可能会对细胞的生长、生理功能等造成影响,甚至存在潜在的致病性.对探索嗜人性PERV感染人源细胞后可能产生的效应以及猪→人异种移植的病毒安全性评价也具有重要意义. 颜奇坡 马玉媛 吕茂民 叶小丽 郑霖 吴健敏 田克恭 章金刚关键词:猪内源性反转录病毒 HEK293细胞 STATHMIN 西尼罗病毒E蛋白结构域Ⅲ在昆虫S2细胞中的表达与鉴定 被引量:4 2008年 根据GenBank中发表的西尼罗病毒(WNV)E domainⅢ基因序列设计1对引物,用PCR方法扩增domainⅢ基因片段,回收目的基因片段定向克隆入果蝇表达载体pMT/B/V5,构建重组表达载体pMT-DⅢ。测序验证正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞,通过Blasticidin进行加压筛选,获得了抗性细胞S2-DⅢ。提取S2-DⅢ细胞的基因组DNA,用PCR方法检测目的基因在果蝇S2细胞中的整合与表达。用硫酸铜溶液诱导表达,收集无血清的细胞表达上清,样品浓缩后进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果表明,研究成功构建了重组表达载体pMT-DⅢ,转染细胞经12mg/L的Blasticidin筛选及鉴定后获得了稳定表达WNV E do-mainⅢ蛋白的果蝇S2细胞株。 史利军 吕茂民 黎诚耀 孙卫华 章金刚关键词:西尼罗病毒 E蛋白 一种人蛋白C的表达方法及其专用引物与表达载体 本发明公开了一种人蛋白C的表达方法及其专用引物与表达载体。本发明所提供的扩增人蛋白C基因的专用引物为序列表中的SEQ ID №:1和SEQ ID №:2。人蛋白C的表达载体是含有人蛋白C基因的重组毕赤酵母表达载体pPIC... 章金刚 贾莉玮 吕茂民文献传递 聚合酶链反应检测4种猪源细胞系中的内源性反转录病毒(英文) 被引量:9 2003年 为了建立检测猪内源性反转录病毒 (porcine endogenous retrovirus,PERV)的特异性方法 ,根据已发表的 PERV的序列 ,设计并合成了针对 PERV核心蛋白 (gag)、多聚酶 (pol)、囊膜蛋白 (env)基因的 3对引物 ,预期扩增片段分别为 36 1、15 0、2 6 5 bp。应用 PCR技术检测了 PERV在 4株猪源细胞中的整合情况。结果表明 ,在所有被检细胞的基因组中均存在有 PERV的前病毒序列 ;应用 RT- PCR检测上述 4株猪源细胞中 PERV特异性 m RNA的表达 ,结果均为阳性。试验还对建立的上述 2种方法的特异性进行了探讨 ,结果表明试验建立的 PERV检测法具有较高的特异性。该方法的建立为进一步研究 PERV奠定了基础 ,还可对异种移植动物模型及异种移植受体进行病原安全性监测。 吕茂民 金红 邓瑞春 王建国 杨姝 熊景峰 丁壮 章金刚关键词:聚合酶链反应检测 一种快速筛选酵母高表达菌株的新方法 被引量:3 2008年 为建立一种快速筛选酵母高表达菌株的方法,将生长在固体培养基上的新转化的表达菌落原位转移到醋酸纤维素薄膜上,再利用硝酸纤维素薄膜原位捕获醋酸纤维素薄膜上的蛋白,然后用免疫印迹的方法检测原位转印到硝酸纤维素膜上菌落分泌蛋白,根据免疫印迹的强弱进行高表达菌株的筛选。结果显示,经过菌落原位转印和免疫印迹显色,显色信号强的菌落表达量相对较高。因此,双膜法原位检测是一种快速、高效的筛选酵母高表达菌株的方法。 冯晶晶 赵媛媛 杨梅 吕茂民关键词:酵母