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流式细胞分析测定猪外周血单个核细胞Gal α1,3 Gal水平(英文): 2010年; 在考虑以猪器官作为供体对人进行异种器官移植时,α1,3半乳糖被认为是引起超急性免疫排斥的主要异种抗原.人们建立了各种方法以降低猪α1,3半乳糖水平,但是也有可能筛选得到在自然情况下α1,3半乳糖表达水平比较低的猪.为了研究在正常猪单个核细胞中α1,3半乳糖浓度分布的差异,利用鸡免疫球蛋白Y(ck-IgY)抗体通过流式细胞分析对正常猪的α1,3半乳糖水平的差异进行检测.取3～8周龄猪的全血,用肝素抗凝处理后经密度梯度离心获取外周血单个核细胞(PBMCs),与FITC标记的ck-IgY(10μg/ml)孵育,经流式细胞仪检测α1,3半乳糖水平.结果显示,相同周龄猪的α1,3半乳糖水平可有0.4～2.6倍差异,同一猪的水平在不同周龄有1.3～5.6倍差异.ck-IgY的特异性由棉籽糖和α1,3半乳二糖测定,棉籽糖(100μmol/L)可抑制70%ck-IgY结合,而α1,3半乳二糖(6.25μmol/L)可完全取消ck-IgY的结合,说明ck-IgY与猪单个核细胞是特异性结合.上述发现说明,ck-IgY是检测猪单个核细胞表面α1,3半乳糖的特异试剂,不同猪或是同一猪在不同时间的α1,3半乳糖水平有着明显的差异.; 陈苹周春燕马康涛; 关键词：异种抗原流式细胞分析

胚胎胰组织移植的实验研究: 2007年; 目的：研究胚胎胰组织在同种异体内再生长发育的可能性，并根据不同胎龄、不同移植部位的移植胚胰生长状况，研究大鼠胚胰移植的适合胎龄和移植部位。方法：将远交系SD大鼠妊娠15．5d（E15．5）、E16．5、E17．5和E18．5的胚胰移植到成年健康SD大鼠的肾包膜下或网膜内。移植后14～21d期间剖腹观察器官生长情况，并取标本行病理切片和免疫组化观察。结果：①E15，5胚胰植入肾包膜21d后，发育良好，腺泡导管分化发育，β细胞增殖并聚集。植入网膜内16d后，有中度排斥反应，发育有限。②E16．5胚胰植入肾包膜下21d后，可见中度排斥，但结构发育较好。③E17．5和E18．5胚胰植入肾包膜下后，16d内就发生重度排斥，生长严重受限，β细胞也未见增殖。④E15．5胚胰移植到小鼠体内，未经任何免疫抑制处理，16d内见到重度排斥表现并导致组织坏死。结论：不使用免疫抑制剂时，一定胎龄的胚胰可在同种远交系成年大鼠体内再血管化，并发育为近似正常胰腺组织。E15．5或更早期的胚胰用来移植比较适合，排斥反应较轻，增殖潜力较大。胚胰移植在肾包膜下相对于移植在网膜内的排斥轻、发育好。; 王璐黄亚冰郭晖朱珉王树森谢林曾梦华李荣陈实; 关键词：同种异体移植再血管化排斥反应

版纳微型猪近交系基因组中内源性逆转录病毒序列拷贝数分析被引量：1: 2006年; 目的:检测分析版纳微型猪近交系基因组中内源性逆转录病毒(porc ine endogenous retrovirus,PERV)序列的拷贝数,从而为猪源移植物的异种移植筛选理想供者。方法:用PERV的pol,env各亚型基因及envA/C重组体的特异性引物,对4个近交系亚系共50头以及5头欧洲大白猪的外周血单核细胞(peripheral b lood mononuc learcell,PBMC)的基因组DNA进行了实时定量/半定量PCR检测及普通PCR检测。结果:所有版纳猪基因组中可特异扩增出pol,envA,envB片段,其平均拷贝数分别为(24.2±9.4),(13.1±8.4)和(16.4±9.8)个,但近交系不同亚系之间各片段扩增产物量比较差异具有统计学意义(P<0.01)。所有样品中无法扩增出envC片段以及envA/C重组体。结论:版纳微型猪近交系基因组内,PERV的envA、envB和pol序列拷贝数在近交系不同亚系间比较差异有统计学意义,不存在envC和envA/C重组体序列。; 黄晓洁陈苹曾嵘马康涛曾养志周春燕; 关键词：内源性逆转录病毒动物近交系聚合酶链反应

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国家高技术研究发展计划(2003AA205090)