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SARS病毒S1蛋白N端片段在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定被引量：2: 2004年; 目的 :获得纯化的重组SARS病毒S1蛋白N端部分 ,研究其与机体产生针对SARS病毒免疫应答的规律和机制。方法 :将编码SARS病毒S1蛋白N端 334个氨基酸残基的基因进行克隆 ,并在原核表达系统中表达 ,获得了纯化的重组蛋白。利用SARS患者恢复期已知的SARS抗体阳性血清 ,鉴定纯化的重组S1蛋白片段。结果 :克隆表达的重组蛋白基因序列与公布的SARS病毒S1蛋白N端的基因序列相同 ,所表达的重组蛋白相对分子质量约为 6 4 0 0 0。 3份SARS患者恢复期的血清均与重组蛋白反应 ,在相对分子质量 6 4 0 0 0处形成特异性的反应条带 ,而来自SARS流行前的正常人对照血清则不能与重组蛋白反应。结论 :获得的重组蛋白与SARS病毒抗体呈现特异性的反应 ,为进一步研究SARS病毒感染免疫应答机制和制备SARS病毒的重组疫苗奠定基础。; 杨小昂董学员李燕李云燕徐国宾冯珍如王月丹陈慰峰; 关键词：冠状病毒属原核表达系统重组疫苗大肠杆菌

SARS病毒S1蛋白的克隆、表达及其重组蛋白免疫学特性的鉴定被引量：1: 2004年; 目的 :研究SARS病毒感染后机体产生保护性免疫应答的规律和可能机制。方法 :通过生物信息学分析 ,在原核表达系统中表达了SARS病毒S1蛋白。利用SARS流行前正常人血清和 6份SARS患者恢复期的血清 ,对纯化的重组S1蛋白进行血清学分析。结果 :研究中克隆表达的重组蛋白序列与公布的SARS病毒S1蛋白的序列相同。 6份SARS患者恢复期的血清均能识别重组S1蛋白 ,而 6份SARS流行前的正常人血清则不能与重组蛋白反应。结论 :获得的重组S1蛋白具有与天然SARS病毒S1蛋白相同的序列 ,并具有与之相似的血清学反应性。; 李燕冯珍如Sin Wan Yee杨小昂董学员徐国宾谢雍王月丹陈慰峰; 关键词：冠状病毒 S蛋白

纤维介素基因hfgl2启动子的SARS冠状病毒核心蛋白反应元件初步分析: 2007年; SARS冠状病毒核心蛋白对hfgl2纤维介素基因有激活作用,采用实时荧光定量PCR和Western印迹已验证了hfgl2基因在mRNA和蛋白水平的表达.为进一步明确在SARS冠状病毒核心蛋白刺激下,hfgl2纤维介素基因5′端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列,构建了一系列hfgl2基因启动子荧光素酶报告基因质粒,将其与SARS冠状病毒核心蛋白真核表达质粒共转染CHO细胞.结果表明,转染前3个质粒hfgl2p(-1334)LUC、hfgl2p(-997)LUC、hfgl2p(-816)LUC的细胞的相对荧光素酶活性无显著改变;但转染hfgl2p(-468)LUC质粒的细胞荧光素酶的活性较前明显降低,说明在hfgl2基因启动子-816位至-468位(相对于转录起始点)之间存在着激活该基因的调控序列.本研究在一定程度上从分子水平揭示了SARS冠状病毒蛋白与宿主纤维介素基因之间的关系.; 姚华宁韩梅芳严伟明习东罗小平宁琴; 关键词：SARS冠状病毒核心蛋白基因表达调控

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国家重点基础研究发展计划(2003CB514100)