国家高技术研究发展计划(2002BA711A01-19)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：王露宋泉声朱炳梅李婷周玉玲更多>>
- 相关机构：北京大学北京世纪坛医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CMTM1-v17/CKLFSF1-v17多克隆抗体的制备、亲合纯化与鉴定被引量：2
- 2006年
- 目的：CMTM1-v17是我室克隆的人类新基因，为进一步研究CMTM1-v17的功能，需制备高纯度的CMTM1-v17的抗体。方法：根据生物信息学分析的结果，用PCR法扩增人CMTM1-v17分子C端的cDNA片段（编码118～149位氨基酸），亚克隆到GST融合蛋白表达载体pGEX-4T-2上。将重组质粒pGST-CMTM1-v17导入大肠杆菌BL21，诱导表达GST-CMTM1-v17 C端融合蛋白，经GST亲合层析、凝血酶切割后获得CMTM1-v17 C蛋白作为抗原免疫家兔制备抗血清。抗血清经抗原亲合层析后用Western blot和免疫组化方法进行鉴定。结果：通过重组表达获得抗原蛋白，免疫家兔并纯化抗血清得到特异的抗CMTM1-v17抗体，该抗体能检测到CMTM1-v17超表达和细胞内源性的蛋白。结论：成功制备了抗CMTM1-v17的多克隆抗体，对进一步研究CMTM1-v17的功能提供了一个有用的工具。
- 王京汪立范慧张颖妹王露
- 关键词：基因重组多克隆抗体
- 新的潜在的雄激素受体协同抑制因子CMTM1-v17被引量：3
- 2007年
- 目的:研究CMTM1-v17(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing family 1-variant17)在正常前列腺及前列腺癌来源细胞系中的表达,初步探索CMTM1-v17对雄激素受体(androgen receptor,AR)转录活性的影响及其作用机制。方法:用免疫组织化学和免疫细胞化学染色的方法分析CMTM1-v17在正常人前列腺组织和前列腺癌来源细胞系中的表达。用荧光素酶报告系统研究CMTM1-v17对AR转录活性的影响及作用机制。结果:CMTM-v17在正常前列腺和前列腺癌来源的LNCaP,Du145和PC3细胞均有表达。荧光素酶报告系统的结果提示在二氢睾酮(5α-dihydrotestosterone,DHT)存在的情况下,将空载体对照组的荧光强度设为100,超表达1μgCMTM1-v17后的相对荧光强度仅为70.8,而超表达2μgCMTM1-v17后的相对荧光强度下降到34.7。当细胞用DHT刺激、同时用组蛋白去乙酰转移酶(histone deacetylase,HDAC)的抑制剂曲古菌素A(trichostatin A,TSA)后,则超表达1μgCMTM1-v17后的相对荧光强度和超表达2μgCMTM1-v17后的相对荧光强度分别从70.8和34.7上升至90.9和86.4。结论:CMTM1-v17在正常前列腺中和前列腺癌来源的细胞系中都有较高丰度的表达,它可能是潜在的AR协同抑制因子,并通过募集HDAC发挥其抑制功能。
- 朱炳梅李婷周玉玲宋泉声王露
- 关键词：转录因子
