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人胎盘微血管内皮细胞的分离培养及鉴定被引量：2: 2014年; 背景:建立高纯度的人胎盘微血管内皮细胞体外培养体系对研究胎盘功能是十分必要的。目前,国内外研究多采用三步酶消化法结合免疫磁珠法分离胎盘微血管内皮细胞,然而步骤过于繁琐且对细胞损伤较大。因而,如何简化人胎盘微血管内皮细胞分离步骤,同时又能提高目标细胞纯度的体外培养方法成为研究热点。目的:探索一种简便高效的从早期绒毛组织中分离人胎盘微血管内皮细胞的体外培养方法,观察细胞生长状态并进行鉴定。方法:利用健康孕6-8周孕妇行人工流产后的绒毛组织,经两步酶消化法和非连续Percoll密度梯度离心得到人胎盘微血管内皮细胞,传代时利用胰酶消化法和反复贴壁法对细胞进行纯化。结果与结论:实验成功获取人胎盘微血管内皮细胞,原代培养的人胎盘微血管内皮细胞在培养24 h后基本完全贴壁,第10天进入对数生长期,第12至13天细胞浓度达80%,传代细胞较原代细胞生长活跃,培养5-7 d可长满培养瓶底,呈"铺路石样"排布。免疫荧光化学结果显示,培养的细胞中FⅧ因子与CD31相关抗原双荧光染色呈阳性,细胞阳性率达100%。MTT法测得培养第5代人胎盘微血管内皮细胞的生长曲线呈倒"S"形。结果证实,应用两步酶消化法、非连续Percoll密度梯度离心法分离细胞,并利用胰酶消化法和反复贴壁法纯化细胞,可获得大量高纯度的人胎盘微血管内皮细胞。; 张慧丽杜培丽方元龙张镜何玉甜孙斌肖雪孙雯周燕媚陈敦金; 关键词：细胞鉴定胰酶消化 CD31 MTT法

279例不明原因自发性早产的发生与季节的关系被引量：5: 2015年; 目的探讨不明原因自发性早产的发生与季节的关系,并分析其母儿近期结局。方法收集2003年1月至2012年12月在广州医科大学附属第三医院治疗的不明原因自发性早产的孕产妇279例及同期广州气温进行回顾性分析。结果 279例不明原因自发早产中春季发病57例,夏季发病89例,秋季发病69例,冬季发病64例。在平均气温最高时(7月),不明原因自发性早产的发病率也达到高峰(1.07%)。夏季不明原因自发性早产发病率(1.05%)高于春季(0.75%)和秋季(0.70%),差异有统计学意义(P<0.05)。各季节气候的早期早产组、中型早产组、轻型早产组的发病率之间差异无统计学意义(P>0.05)。秋季出生的新生儿转科率高于春季、夏季和冬季(P<0.05)。而各季节发病的孕产妇的情况及新生儿出生的性别,体重及1、5 min的Apgar评分差异无统计学意义(P>0.05)。结论不明原因自发性早产的发病具有季节性,以夏季发病率最高。建立该病发病的季节模式,有助于预防早产的发生,降低新生儿死亡率,减轻家庭与国家的经济及医疗负担。; 汤雯婷匡丽云杜培丽张慧丽孙斌孙雯周燕媚肖雪陈敦金

十溴联苯醚母源性暴露影响仔鼠学习记忆能力的机制: 2014年; 目的探讨母鼠妊娠期及哺乳期十溴联苯醚暴露对仔鼠学习记忆能力影响的可能作用机制. 方法将妊娠第1天的10周龄雌性SD大鼠40只随机分为5组,每组8只.A组：空白对照组（正常饲养）;B组：精炼花生油灌胃5 ml/（kg·d）;C组、D组及E组分别予1、5、10 mg/ （kg·d）十溴联苯醚灌胃（溶于等量精炼花生油）.B组、C组、D组及E组母鼠自妊娠第1天至仔鼠断乳（分娩后28d）每日按上述剂量灌胃.灌胃结束后每组随机选取20只仔鼠（雌雄各半）,用Morris水迷宫对其学习记忆能力进行检测;Morris水迷宫测试结束后,每组上述仔鼠取海马组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应法和蛋白质印迹法检测海马组织丝切蛋白-1（Cofilin-1）及波形蛋白（Vimentin） mRNA及蛋白表达水平.采用析因方差分析、单因素方差分析、独立样本f检验、秩和检验、Kruskal-Wallis检验进行统计学分析. 结果与A组比较,D组及E组仔鼠平均逃避潜伏期时间延长（P＜0.05）;与A组（1.000±0.000）比较,C组、D组及E组仔鼠海马组织Cofilin-1 mRNA的相对定量值[（0.888±0.045）、（0.787±0.041）及（0.610±0.021）]均下降（f值分别为-2.904、-4.555及-3.131,P值均＜0.05）;与A组（1.000±0.000）比较,C组、D组及E组仔鼠海马组织Vimentin mRNA的相对定量值[（0.634±0.031）、（0.428±0.022）及（0.291±0.034）]均下降（t值分别为-20.168、-45.852及-36.457,P值均＜0.01）;与A组（1.60±0.37）比较,D组及E组仔鼠海马组织Cofilin-1蛋白表达水平[（0.88±0.14）及（0.37±0.13）]均下降（f值分别为3.152及5.432,P值均＜0.05）;与A组（1.52±0.20）比较,D组及E组仔鼠海马组织Vimentin蛋白表达水平[（0.51±0.22）及（0.22±0.18）]均下降（f值分别为5.884及8.368,P值均＜0.01）. 结论妊娠期及哺乳期母鼠十溴联苯醚暴露导致仔鼠学习记忆能力下降,其机制可能与海马组织Cofilin-1及Vimentin mRNA及蛋白�; 杜培丽张慧丽周燕媚孙雯肖雪何玉甜孙斌余艳红陈敦金; 关键词：波形蛋白

607例伴或不伴胎膜早破早产的妊娠结局分析被引量：9: 2015年; 目的探讨早产伴胎膜早破对母儿结局的影响。方法收集2003年1月至2013年12月广州医科大学附属第三医院607例伴或不伴胎膜早破的无其他明显诱因早产病例,将其分为伴或不伴胎膜早破两组,比较两组母婴结局。结果早产伴胎膜早破组(n=369)产妇剖宫产率明显大于不伴胎膜早破组(n=238)(18.43%vs11.76%,P<0.05);平均住院天数明显高于不伴胎膜早破组(6.3 d vs 5.5 d,P<0.05);新生儿的感染发生率明显高于不伴胎膜早破组(20.51%vs 11.32%,P<0.05);新生儿呼吸窘迫综合征发生率明显高于不伴胎膜早破组(9.23%vs2.83%,P<0.05),差异均有统计学意义。结论早产伴胎膜早破会增加早产产妇的剖宫产率,以及早产儿和围产儿致病率和死亡率,尽早发现并恰当处理胎膜早破对降低早产发生率和早产儿发病率、死亡率有重要意义。; 匡丽云汤雯婷杜培丽张慧丽孙雯周燕媚肖雪潘乐乐陈敦金; 关键词：胎膜早破早产早产儿

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广东省自然科学基金(S2012010008932)

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