国家高技术研究发展计划(2002BA711A01-07)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：刘勇林守清邱贵兴黄曼婷郑睿敏更多>>
- 相关机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胎儿骨膜全长cDNA文库的构建及测序被引量：5
- 2007年
- 目的构建人胎儿的骨膜组织的全长cDNA文库,了解该组织表达谱的特征。方法以胎儿胫骨骨膜为材料,运用末端模板转换技术(SMART)构建cDNA文库,测定库容量并应用菌落PCR的方法确定平均插入片段长度,随后大规模测序并进行生物信息学处理分析。结果所构建的cDNA文库的库容量为5.2×106,平均插入片段的长度为1.2kb。随机测序了25000余个克隆的序列,拼接后为5230个聚类群(contigs)和4714个独立EST(singleton),Blast比对分析得到骨膜基因表达谱的概况,发现了23个候选的新基因。结论构建的骨膜组织的cDNA文库质量满足后续工作的需要,骨膜组织基因表达谱及一些新基因的获得为今后寻找骨膜组织特异性的基因从而研究骨相关疾病的发病机制、发现具有药物开发靶点的功能基因奠定了基础。
- 王绍海刘勇宫伟雁郑睿敏林守清
- 关键词：全长CDNA文库DNA测序生物信息分析
- 17β-雌二醇对骨外膜来源成骨样细胞增殖及基因表达的影响
- 2007年
- 目的探讨17β-雌二醇（17β-E2）对骨外膜来源成骨样细胞增殖及基因表达的影响。方法6周龄雌性Wistar大鼠颅骨骨外膜来源的成骨样细胞分别在含有0．01、0．05、0．1、0．25、0．5、0．75、1、5、10nmol／L9种浓度17β-E2的成骨诱导培养液中培养，用MTF法测定3、6、9、12d时细胞的增殖情况。用RT—PCR法测定7d时细胞Ⅰ型胶原蛋白仅。链（COLLI）、骨桥接素（OPN）、骨保护素（OPG）及RANKL基因的表达。结果17β-E2作用6、9d时，雌激素组的增殖水平显著高于对照组（P〈0．05）；12d时，0．05nmol／L及以上组的增殖水平显著高于对照组（P〈0．05），各雌激素组的增殖水平的差异无统计学意义（P〉0．05）。（1）COLLI：对照组的表达水平显著高于雌激素组（氏0．05）；在雌激素组中0．5nmo／／L组的表达水平最高，0．75nmol／L组次之，二者皆显著高于其他各组（P〈0．05）。（2）OPN：0．1nmol／L及以上组的表达水平显著高于对照组（P〈0．05）。（3）OPG和RANKL：OPG表达阴性，RANKL在对照组及雌激素组中均有较高水平的表达。结论雌激素对骨外膜成骨样细胞的调节可能以促进增殖，抑制分化为主。骨外膜来源成骨样细胞对破骨细胞的调节可能以促进其祖细胞分化为主。
- 黄曼婷刘勇林守清邱贵兴
- 关键词：雌二醇骨膜成骨细胞
- 17β-雌二醇调控骨外膜来源成骨样细胞雌激素受体及相关受体α基因表达被引量：1
- 2006年
- 目的探讨雌激素受体(estrogenreceptors,ER)及雌激素相关受体α(estrogenrelated-re-ceptorα,ERRα)基因在骨外膜来源成骨样细胞的表达及其与雌激素调控的关系。方法6周龄、雌性Wistar大鼠颅骨骨外膜来源的成骨样细胞分别在含有0.01、0.05、0.1、0.25、0.5、0.75、1、5、10nmol/L9种浓度17β-雌二醇(17β-E2)或对照的成骨诱导培养液中培养7d,提取细胞总RNA,采用RT-PCR法分析ER及ERRα基因的表达情况。结果ERα基因表达阴性,ERβ基因呈弱表达。从0～0.25nmol/L范围内可以看到ERβ的表达水平有上升趋势。5nmol/L和10nmol/L雌激素组ERβ的表达水平显著低于其他雌激素组(P<0.01)。ERRα表达阳性,各雌激素组的表达水平均显著高于对照组(P<0.01)。0.25nmol/L组的ERRα表达水平最高、0.5nmol/L组次之,两组的表达水平显著高于其他雌激素组(P<0.05);10nmol/L组表达水平显著低于其他雌激素组(P<0.05)。结论雌激素上调了骨外膜来源成骨样细胞ERRα的表达水平,低水平的雌激素有可能上调ERβ的表达水平。血清17β-E2水平维持在早、晚卵泡期的生理浓度有可能获得最佳的骨保护疗效。
- 黄曼婷刘勇林守清邱贵兴
- 关键词：雌二醇骨膜
