国家自然科学基金(30270057)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
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- 马尾松毛虫CPV基因组S7的序列分析及部分序列的原核表达被引量：2
- 2003年
- 马尾松毛虫质多角体病毒(湖南株)基因组S7节段(AY180908)cDNA克隆及序列分析结果表明:S7由1501个碱基组成,编码由448个氨基酸组成的分子量为49.8 kDa的多肽P50。5′末端和3′末端具有5′-AGTAA-3′和5′-GTTAGCC-3′末端保守序列。该基因组与舞毒蛾质多角体病毒1型和家蚕质多角体病毒1型S7节段有很高的同源性,核苷酸序列同源性分别为97.2％和87.0％,氨基酸序列同源性分别为98.7％和92.8％。P50多肽与人型支原体的DnaK样蛋白在C-末端有相似性。本文报道了编码P50C259的cDNA序列的克隆并作了原核表达,当用1.0 mmol/L IPTG诱导2h,分子量约为37.3 kDa的融合蛋白在大肠杆菌BL21中得到大量表达。
- 洪靖君张海元赵淑玲段家龙彭辉银
- 关键词：马尾松毛虫原核表达
- 文山松毛虫质型多角体病毒S8片段cDNA克隆与原核表达被引量：3
- 2004年
- 文山松毛虫质型多角体病毒(DpwCPV)S8 片段被克隆和测序,该片段全长 1332bp,编码 390 个氨基酸组成的分子量大约为 43kDa 的蛋白 P44。根据本实验室测定出的马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV )基因组全序列,设计引物,扩增出文山松毛虫质型多角体病毒 S8 部分片段,并亚克隆出 p44 基因序列,然后将 p44 基因序列 cDNA克隆到表达载体 pET-28a 中,构建成表达质粒 pET-S8,用 IPTG 诱导大肠杆菌 BL21,经 SDS-PAGE 证明 p44 基因在大肠杆菌中获得成功表达,并对其编码蛋白序列进行了分析。
- 段兵赵淑玲张海元张小霞肖宇宙汤显春彭辉银
- 关键词：CPV基因组分析原核表达
- 马尾松毛虫质型多角体病毒S4的cDNA克隆及序列分析被引量：12
- 2003年
- 从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化第四片段S4,经RT-PCR扩增得到了S4的cDNA克隆并测定了其全序列。结果表明,S4全长由3262个碱基组成,包含一个编码1058个氨基酸的完整开放阅读框架。Blast同源分析显示,DpCPV s4与LdCPV S4、BmCPV S4和RRSV S2编码蛋白氨基酸的同源性分别为94％、92％和22％。另外,氨基酸序列部分区域与Methanosarcina mazei Goel的甲基化转移酶有同源性,且序列中含有鸟苷酸转移酶活性位点。
- 赵淑玲梁昌镛洪靖君彭辉银
- 关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒CDNA克隆
- 马尾松毛虫质多角体病毒NS5蛋白的表达和功能初步分析被引量：2
- 2006年
- 马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株第9个片段编码非结构蛋白NS5,利用pET-32a(+)载体带有组氨酸标记的重组蛋白进行表达,获得纯化的重组蛋白。利用凝胶电泳阻滞检测试验(EMSA)检测蛋白和核酸的结合作用,结果表明NS5蛋白能与病毒基因组dsRNA结合。
- 张万菊赵淑玲张小霞汤显春肖宇宙梅春蕾孙修炼彭辉银
- 关键词：原核表达
