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Rad51同系物与DNA重组修复被引量：10: 2003年; 真核细胞 Rad5 1蛋白质与原核细胞 Rec A蛋白质具有结构及功能同源性 ,是促使细胞有丝分裂及减数分裂过程中DNA同源重组的关键性蛋白质。已在酵母细胞中鉴定出 Rad5 5和 Rad5 7两种 Rad5 1同系物 ,从脊椎动物细胞中鉴定出 5种Rad5 1同系物 ,即 Rad5 1 B、Rad5 1 C、Rad5 1 D、Xrcc2和 Xrcc3。这些 Rad5 1同系物与 Rad5 1之间及各同系物之间共享 2 0 %～30 %的序列同一性 ,这些 Rad5 1同系物与 Rad5 1蛋白质共同作用而在受损; 陈汉春彭兴华; 关键词：DNA 同源重组 DNA修复

可调控重组腺相关病毒对MCF-7细胞基因转染效率及表达的研究: 2007年; 目的探讨Tet调控下自杀基因HSVtk重组腺相关病毒载体(rAAV/HSVtk/Tet-On)对人乳腺癌细胞株(MCF-7)的作用。方法将HSVtk和Tet-On基因分别定向克隆入腺相关病毒质粒pAAV MCS中,构建重组腺相关病毒载体pAAV/TRE/HSVtk/Tet-On,与辅助质粒pAAV-RC、pHelper和包装细胞293进行包装、纯化。用β半乳糖苷酶原位染色法检测报告基因rAAV/LacZ在MCF-7中的表达,计算其基因转染效率。采用斑点杂交、RT-PCR检测MCF-7细胞基因组中HSVtk基因整合、病毒滴度及其表达。结果rAAV/HSVtk/Tet-On病毒滴度为2.38×1011particle/ml,LacZ基因在感染的MCF-7中能持续表达,感染效率为20%～30%。纯化后的重组腺相关病毒感染MCF-7后,能将目的基因转移到靶细胞中,并在Dox诱导下,使GCV对rAAV感染的MCF-7细胞具有明显的杀伤作用。结论HSVtk/Tet-On自杀基因调控系统可通过重组腺相关病毒载体成功转染人乳腺癌细胞株MCF-7,使其HSVtkmRNA表达增加,在Dox诱导下,GCV对rAAV(≥104v.p/cell)感染的MCF-7细胞具有明显的杀伤作用。; 曾赵军李子博胡维新罗赛群陈迁; 关键词：腺相关病毒乳腺肿瘤基因治疗

Tet-On在乳腺癌自杀基因治疗中诱导细胞凋亡的实验研究被引量：1: 2006年; 目的:构建Tet调节的自杀基因HSVtk重组逆转录病毒,探讨其治疗乳腺癌的作用机制。方法:构建重组逆转录病毒RevTRE/HSVtk与RevTet-On感染乳腺癌细胞株MCF-7,Southern杂交检测细胞中HSVtk基因的整合。应用倒置荧光显微镜、流式细胞术、TUNEL、苔盼蓝排斥试验观察分析在Tet调控下,重组病毒对感染的乳腺癌细胞杀伤作用机制。以MCF-7细胞构建裸鼠乳腺癌模型,观察Tet调控下病毒对肿瘤细胞的杀伤作用,并对瘤体进行病理分析。结果:重组病毒感染乳腺癌细胞株MCF-7后,乳腺癌细胞随着DOX浓度的增高和GCV作用后,细胞死亡增加并呈现细胞凋亡等特征。乳腺癌裸鼠在DOX诱导7天GCV治疗30天后与对照组比较,在Tet调控下乳腺癌裸鼠肿瘤体积减小并可诱导乳腺癌细胞凋亡。结论:重组逆转录病毒在DOX诱导GCV作用下对病毒感染的MCF-7细胞具有诱导细胞凋亡的作用,能有效地杀伤肿瘤细胞。; 曾赵军胡维新李子博罗赛群; 关键词：乳腺癌基因治疗凋亡逆转录病毒

人乳腺癌裸鼠移植瘤的体外抗生素诱导基因治疗被引量：1: 2006年; 目的探讨Tet调控下体外抗生素诱导基因治疗人乳腺癌裸鼠移植瘤的可行性。方法构建人乳腺癌BALB/C裸鼠移植瘤模型,制备有感染活性的重组逆转录病毒RevTRE/HSVtk与RevTet-On。观察体外强力霉素(Dox)诱导,丙氧鸟苷(GCV)和逆转录病毒作用后移植瘤生长的变化及组织病理改变,分析其对乳腺癌裸鼠移植瘤的调控性治疗作用。结果乳腺癌裸鼠治疗后,肿瘤体积明显减小,生长受抑,生存周期延长,组间比较有显著性差异(P<0.05)。瘤体HE染色显示治疗组肿瘤局部有炎性细胞浸润和强嗜酸性细胞。RT-PCR结果显示Dox诱导后瘤体组织HSVtk表达较明显。结论通过逆转录病毒介导Tet调控,可以在体外抗生素Dox诱导下对人乳腺癌裸鼠移植瘤模型进行基因治疗,杀伤肿瘤细胞。; 曾赵军胡维新李子博罗赛群; 关键词：乳腺癌基因治疗裸鼠逆转录病毒基因调控

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美国中华医学基金会项目(99-698)