天津市应用基础与前沿技术研究计划(11JCYBJC12900)
- 作品数：14 被引量：78H指数：7
- 相关作者：于泳浩谢克亮陈红光刘玲玲王国林更多>>
- 相关机构：天津医科大学总医院天津市环湖医院天津市职业病防治院更多>>
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- 氢气对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响被引量：7
- 2012年
- 目的评价氢气对脂多糖（LPS）诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。方法离体培养人脐静脉内皮细胞株HUVEC-12，以1×104／ml接种于96孔培养板（每孑L200m）或以1×106／ml接种于6孔培养板（每孔2ml）。采用随机数字表法，将细胞随机分为4组（n=30）;正常对照组（C组）、氢气组（H2组）、LPS组和LPS＋H2组。C组和LPS组用正常培养基培养；H2组和LPS＋巩组用含饱和氢气的培养基培养，同时LPS组和LPS＋H2组加入LPS1μg/ml，而C组和地组加入等容量的生理盐水。孵育24h后用MrrT法检测细胞活力，流式细胞术测定细胞凋亡情况；采用ELISA法测定细胞上清液中HMGBl浓度。结果与C组和H2组比较，LPS组和LPS＋H2组细胞活力降低，细胞凋亡率和细胞上清液中HMGBl浓度升高（P〈O．05）；与LPS组比较，LPS＋H2组细胞活力升高，细胞凋亡率和细胞上清液中HMGBl浓度降低（P〈0．05）。结论氢气可有效减少LPS诱导人脐静脉内皮细胞凋亡，其机制与抑制HMGBl释放有关。
- 韩焕芝谢克亮陈红光刘大全张利军于泳浩
- 关键词：氢脂多糖类脐静脉内皮细胞细胞凋亡
- Nrf2在氢气治疗严重脓毒症肠损伤中的作用被引量：18
- 2014年
- 目的 探讨Nrf2在氢气治疗严重脓毒症肠损伤中的作用.方法 将152只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为假手术组、氢气对照组、脓毒症组和氢气治疗组4组,每组38只.采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型,假手术组和氢气对照组不进行CLP,其他操作相同.氢气对照组和氢气治疗组于假手术或CLP后1h、6h分别吸入2％氢气1h.每组取20只小鼠,观察术后7d内的生存率.每组剩余18只小鼠,分别于术后6、12和24 h各处死6只,取部分肠组织,用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测Nrf2、高迁移率族蛋白B1 （HMGB1）的蛋白表达;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Nrf2 mRNA表达;于术后24 h取部分中段空肠,行苏木素-伊红（HE）染色,光镜下观察肠组织损伤程度.结果 假手术组和氢气对照组各指标差异均无统计学意义.脓毒症组小鼠7d生存率较假手术组明显降低（0比100％,P＜0.05）;氢气治疗组小鼠7d生存率较脓毒症组明显升高（55％比0,P＜0.05）.与假手术组比较,脓毒症组术后6、12和24 h肠组织Nrf2的蛋白表达（灰度值）和mRNA表达均明显升高（Nrf2蛋白6 h：1.973±0.350比1.000±0.000,t=4.411,P=0.002; 12 h：2.367±0.186比1.000 ±0.000,t=10.210,P=0.000; 24 h：2.517±0.280比1.000±0.000,t =9.521,P=0.000;Nrf2 mRNA 6 h：1.606±0.271比1.000 ±0.000,t=3.631,P=0.002; 12 h：1.692±0.399比1.000±0.000,t=3.233,P=0.005;24 h：1.784±0.341比1.000±0.000,t=3.894,P=0.001）,术后24 h肠组织HMGB1表达（灰度值）明显升高（1.507±0.220比1.000±0.000,t=3.948,P=0.004）.与脓毒症组比较,氢气治疗组术后6、12和24 h肠组织Nrf2的蛋白和mRNA表达明显升高（Nrf2蛋白6 h：2.583±0.395比1.973±0.350,t=2.765,P=0.024; 12 h：2.725±0.235比2.367±0.186,t=2.674,P=0.028; 24 h：2.930±0.212比2.517±0.280,t=2.595,P=0.032; Nrf2 mRNA 6 h：2.008±0.400比1.606±0271,t=2.405,P=0.029;12 h：2.188 ±0.475比1.692±0.399,t=2.317,P=0.034;24 h：2.333±0.406比1.78
- 李媛谢克亮陈红光王卫娜王国林于泳浩
- 关键词：NRF2脓毒症氢气肠组织高迁移率族蛋白B1
- 氢气对脓毒症小鼠肠组织Rho/ROCK信号通路的影响被引量：4
- 2015年
- 目的 评价氢气对脓毒症小鼠肠组织Ras同源基因（Rho）/Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶（ROCK）信号通路的影响.方法 雄性ICR小鼠64只,体重20～ 25 g,6周龄,采用随机数字表法,将其分为4组（n=16）：假手术组（SH组）、氢气组（H2组）、脓毒症组（S组）和脓毒症＋氢气组（S＋H2组）.采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制备脓毒症模型.于CLP术后1和6h时H2组和S＋H2组分别吸入2％氢气1h.于CLP术后20 h时取8只小鼠,向胃内灌注异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐（FITC-右旋糖酐）,4h后心脏穿刺取血样,测定血清FITC-右旋糖酐的浓度.于CLP术后24 h时取8只小鼠,取血液、肝脏、脾脏和肾脏进行细菌培养,观察菌群移位情况;取小肠组织,透射电镜下观察肠上皮细胞超微结构,光镜下观察肠组织病理学改变并进行评分,采用Western blot法测定肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达水平.结果 与SH组比较,S组和S＋H2组血清FITC-右旋糖酐浓度和肠损伤评分升高,血液、肝脏、脾脏和肾脏的菌群移位增加,肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达上调（P＜0.05）,H2组上述各指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与S组比较,S＋H2组血清FITC-右旋糖酐浓度和肠损伤评分降低,血液、肝脏、脾脏和肾脏的菌群移位减少,肠组织Rho、ROCK1和ROCK2的表达下调（P＜0.05）,肠组织病理学损伤减轻.结论 氢气减轻脓毒症小鼠肠损伤的机制与抑制Rho/ROCK信号通路激活有关.
- 张红涛于泳浩刘玲玲杨涛马小叶王国林
- 关键词：脓毒症RHO因子RHO相关激酶类肠损伤
- 吸入氢气对脓毒症小鼠急性肺损伤时肺组织Rho／ROCK通路的影响被引量：8
- 2016年
- 目的评价吸入氢气对脓毒症小鼠急性肺损伤时肺组织Rho／Rho激酶（ROCK）通路的影响。方法雄性C57BL／6小鼠40只，体重20～25g，6周龄，采用随机数字表法，将其分为4组（n=10）：假手术组（sh组）、假手术＋吸入氢气组（H：组）、脓毒症组（s组）和脓毒症＋吸入氢气组（S＋H2组）。采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制备脓毒症模型。于CLP术后1和6h时H2组和S＋H2组分别吸入2％氢气，时间分别为1h。于CLP术后24h时处死小鼠，收集支气管肺泡灌洗液（BALF），测定蛋白浓度，进行中性粒细胞（PMN）计数，采用ELISA法检测BALF中TNF-α和IL-1β的浓度。取肺组织，行病理学损伤评分，确定湿重／干重（W／D）比值，测定髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平，并采用Western blot法测定肺组织Rho、ROCK1、ROCK2和活化型caspase-3的表达水平以及肌球蛋白磷酸酯酶目标亚基1（MYPT-1）的磷酸化水平。结果与Sh组比较，S组和S＋H2组BALF蛋白浓度、PMN计数、TNF—α和IL—1β浓度、肺损伤评分、肺组织W／D比值、MPO和MDA水平升高，肺组织SOD活性降低，肺组织Rho、ROCK1、ROCK2和活化型caspase-3表达上调，肺组织MYPT-1磷酸化水平升高（P〈0．05），H2组上述指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；与S组比较，S＋H，组BALF蛋白浓度、PMN计数、TNF-α和IL-1β浓度、肺损伤评分、肺组织W／D比值、MPO和MDA水平降低，肺组织SOD活性升高，肺组织Rho、ROCK1、ROCK2和活化型caspase-3表达下调，肺组织MYPT-1磷酸化水平降低（P〈0．05）。结论吸入氢气减轻脓毒症小鼠急性肺损伤的机制与抑制Rho／ROCK通路激活有关。
- 张红涛刘玲玲于洋谢克亮梁禹于泳浩
- 关键词：脓毒症呼吸窘迫综合征RHO因子
- 氢对脓毒症小鼠肠组织ROCK1和mDia1表达的影响
- 2017年
- 目的评价氢对脓毒症小鼠肠组织Rho相关激酶1（ROCK1）和哺乳动物Dia相关蛋白1（mDial）表达的影响。方法雄性C57BL／6小鼠90只，体重20～25g，6周龄，采用随机数表法，将其分为3组（n=30）：对照组（c组）、脓毒症组（s组）和脓毒症＋氢组（SH组）。采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制备脓毒症模型。SH组于CLP后1和6h时吸入2％氢气1h。取20只小鼠观察7d生存情况；于CLP术后24h时处死10只小鼠，心脏取血，测定血清二胺氧化酶（DAO）活性，并行血液细菌培养并计数菌落数。取小肠组织，行肠损伤评分，采用免疫组织化学染色法测定ROCK1和mDial阳性细胞率，并计算ROCK1与mDial阳性细胞率的比值（ROCK1／mDial比值）；采用免疫荧光染色法测定肠上皮细胞钙粘附蛋白E的表达。结果与c组比较，S组和SH组生存率降低，血清DAO活性、血液培养菌落数及肠损伤评分升高，肠组织ROCK1阳性细胞率和mDial阳性细胞率升高，钙粘附蛋白E表达下调，s组ROCK1／mDial比值升高（P〈0．05），SH组ROCK1／mDial比值差异无统计学意义（P〉0．05）；与s组比较，SH组生存率升高，血清DAO活性、血液培养菌落数及肠损伤评分降低，肠组织ROCK1阳性细胞率降低，mDial阳性细胞率升高，ROCK1／mDial比值降低，钙粘附蛋白E表达上调（P〈0．05）。结论氢改善脓毒症小鼠肠屏障功能的机制可能与下调ROCK1表达，上调mDial表达，纠正ROCK1，mDial比例失衡有关。
- 张红涛姜连浩刘玲玲张素品梁禹于泳浩
- 关键词：氢脓毒症RHO相关激酶类PA肠粘膜
- 富氢液对神经病理性痛大鼠坐骨神经及脊髓炎性反应的影响被引量：3
- 2015年
- 目的 评价富氢液对神经病理性痛大鼠坐骨神经及脊髓炎性反应的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠90只,体重180～220 g,采用随机数字表法分为3组（n=30）：假手术组（S组）、神经病理性痛组（NP组）和富氢液组（H组）.采用结扎坐骨神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型.H组于结扎坐骨神经后腹腔注射富氢液（0.6 mmol/L）10 ml/kg,2次/d,共7d,S组和NP组给予等容量生理盐水.分别于结扎坐骨神经后7、10和14 d时测定机械痛阈和热痛阈,随后处死大鼠取脊髓和结扎侧坐骨神经,采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β和高迁移率族蛋白1（HMGB1）的含量.结果 与S组比较,NP组和H组各时点机械痛阈和热痛阈降低,坐骨神经和脊髓TNF-α、IL-1β和HMGB1含量升高（P＜0.05）;与NP组比较,H组各时点机械痛阈和热痛阈升高,坐骨神经和脊髓TNF-α、IL-1β和HMGB1含量降低（P＜0.05）.结论 富氢液通过抑制坐骨神经及脊髓炎性反应,减轻大鼠神经病理性痛.
- 陈亚军陈红光于泳浩
- 关键词：神经痛坐骨神经脊髓
- 氢气治疗脓毒症信号通路调节功能研究进展被引量：1
- 2016年
- 背景氢气是一种新型医学气体，最初发现其具有明显的选择性抗氧化作用，近年研究表明氢气能够抑制机体过度的氧化应激和炎症反应并发挥抗细胞凋亡作用从而改善脓毒症相关器官损伤，改善脓毒症的预后。此外，作为气体信号分子，氢气还具有信号通路调节作用。目的探讨氢气治疗脓毒症中的信号通路的调节作用及其与炎症反应、氧化应激和细胞凋亡的关系。内容对氢气治疗脓毒症的器官保护作用机制及其对不同信号通路的调节作用的相关研究进行综述。趋向通过对氢气在脓毒症治疗过程中的信号通路调节作用及其与氢气的抗炎、抗氧化应激和抗凋亡作用之间相互联系的研究，从而全面了解氢气治疗脓毒症的分子机制。
- 张红涛于泳浩王国林
- 关键词：氢气脓毒症信号通路
- 氢气对脓毒症小鼠急性肺损伤的影响被引量：17
- 2012年
- 目的评价氢气对脓毒症小鼠急性肺损伤的影响。方法雄性C57BL／6小鼠112只，体重20～25g，5周龄，采用随机数字表法，将其随机分为4组（n=28）：假手术组（A组）、假手术＋氢气组（B组）、脓毒症组（C组）和脓毒症＋氢气组（D组）。采用盲肠结扎穿孔法（CLP）制备脓毒症模型。B组和D组于CLP或假手术后1、6h时分别吸入2％氢气。每组取20只小鼠，记录CLP后7d内生存情况。每组取8只小鼠，于CLP后24h时处死，采集静脉血样，取肺组织，测定血清及肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及8-异前列腺素F1。（8-iso—PGF2。）水平，测定支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白浓度和肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性，进行肺损伤评分，计算肺湿干重比（W／D）。结果与A组比较，C组生存率、血清和肺组织SOD和CAT活性降低，肺损伤评分、W／D、BALF蛋白浓度、肺组织MPO活性、血清和肺组织8-iso—PGF2。水平升高（P〈0．05）；与C组比较，D组生存率、血清和肺组织SOD和CAT活性升高，肺损伤评分、W／D、BALF蛋白浓度、肺组织MPO活性、血清和肺组织8-iso—PGF2。水平降低（P〈0．05）。结论氢气可减轻脓毒症小鼠急性肺损伤，其机制与抑制氧化应激反应有关。
- 陈红光谢克亮韩焕芝王涛史媛于泳浩王国林刘宏伟
- 关键词：氢脓毒症呼吸窘迫综合征成人
- 氢气吸入对脓毒症相关性脑病小鼠认知功能的影响被引量：4
- 2014年
- 目的：评价氢气吸入对脓毒症相关性脑病小鼠认知功能的保护作用，并初步探讨其相关机制。方法雄性ICR小鼠84只，6～8周龄，体重20～25 g，随机数字表法分为4组：假手术组（ Sham）、假手术＋氢气组（ Sham＋H2）、脓毒症组（ Sepsis）和脓毒症＋氢气组（ Sepsis＋H2）。采用盲肠结扎穿孔法（ CLP）制备小鼠脓毒症模型。氢气治疗组于假手术或CLP后1 h和6 h时分别吸入2％氢气1 h。于假手术或CLP后24 h观察小鼠神经功能改变和脑组织海马CA1区神经元的病理改变，同时检测血清及海马组织中超氧化物歧化酶（ SOD）、过氧化氢酶（ CAT）、丙二醛（ MDA）、人8异前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）的水平。于假手术或CLP后3、5、7、14 d通过Y-迷宫测试和条件恐惧测试检测各组小鼠认知功能的变化。结果与Sham组相比，Sepsis组小鼠神经功能显著下降，海马CA1区神经元明显受损，血清和海马组织中SOD和CAT活性明显降低， MDA和8-iso-PGF2α水平明显升高。 CLP后3、5、7、14 d，Sepsis组小鼠在新异臂的时间百分比明显减少，环境相关性僵直时间百分比也明显减少；与Sepsis组相比，Sepsis＋H2组小鼠神经功能显著改善，海马CA1区受损神经元减少，血清和海马组织中SOD和CAT活性明显升高， MDA和8-iso-PGF2α水平明显降低。 CLP后3、5、7、14 d， Sepsis组小鼠在新异臂的时间明显增加，环境相关性僵直时间百分比也明显提高。结论氢气可明显减轻脓毒症相关性脑病小鼠的海马神经元损伤，改善认知功能，其机制可能与提高机体抗氧化水平及降低氧化产物水平有关。
- 刘玲玲谢克亮陈红光东晓晴李媛于泳浩
- 关键词：氢脓毒症氧化性应激
- 氢气吸入对严重脓毒症小鼠血清炎性因子和肠损伤的影响被引量：12
- 2015年
- 目的：探讨氢气吸入对严重脓毒症小鼠血清炎性因子和肠损伤的影响以及作用机制。方法按随机数字表法将176只雄性ICR小鼠分为4组：假手术组、氢气对照组（假手术＋氢气吸入）、模型组（严重脓毒症模型）和氢气治疗组（严重脓毒症模型＋氢气吸入），每组44只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导小鼠严重脓毒症模型；氢气吸入为假手术或制模后1h和6h分别吸入2%氢气1h。各组取20只小鼠观察7d存活率；剩余小鼠分别于制模后6、12、24、48 h心脏取血后各处死6只，测定血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL-6、IL-10）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）水平；光镜下观察小肠组织病理学改变并进行评分，检测肠组织髓过氧化物酶（MPO）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的活性。结果严重脓毒症小鼠7 d存活率为0；氢气治疗组小鼠7 d存活率提升至60%，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。与假手术组比较，模型组制模后各时间点血清TNF-α、IL-6、IL-10、HMGB1含量均明显升高；肠组织损伤严重，且病理评分较高；肠组织MPO和caspase-3活性也均明显增高（均P＜0.05）。与模型组比较，氢气治疗组血清TNF-α、IL-6和HMGB1含量明显降低〔TNF-α（ng/L）：6 h：110.34±9.28比440.55±25.78，12 h：82.29±8.43比448.36±32.54，24 h：79.68±9.04比346.42±22.24，48 h：80.79±10.06比368.94±31.58；IL-6（ng/L）：12 h：58.68±8.55比158.28±16.73，24 h：46.98±7.58比146.74±18.02，48 h：38.67±8.22比136.45±15.45；HMGB1（μg/L）：6 h：15.75±4.32比55.56±10.04，12 h：32.02±9.33比89.65±15.65，24 h：35.87±8.54比86.44±20.33，48 h：23.85±9.83比98.33±18.88，均P＜0.05〕，血清IL-10含量（ng/L）于制模后24 h和48 h明显升高（24 h：135.44±16.43比79.22±12.03，48 h：110.92±12.54比74.47±11.18，均P＜0.05），肠组织损伤减轻，病理评分�
- 张红涛于泳浩马小叶杨涛胡南王国林
- 关键词：氢气脓毒症肠损伤炎性因子小鼠
