国家科技重大专项(2011ZX09202-301-02)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：王荣海李增礼储成风倪晓燕董世建更多>>
- 相关机构：安徽安科生物工程(集团)股份有限公司安徽省生物医学研究所安徽中医药大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 重组人干扰素α2b注射液稳定性研究被引量：3
- 2014年
- 目的 考察重组人干扰素α2b注射液的稳定性.方法 按照＆lt;中国药典＆gt;2010年三部的方法进行检测,其中干扰素蛋白纯度采用高效液相法测定,光照试验、振摇试验、冻融试验、加速试验、低温长期留样观察方法均采用药典方法.结果 除了冻融试验中反复冻融8次后和加速试验中（37±2）℃放置3个月,干扰素α2b效价下降至理论值的80%以下,其余试验抽样点均符合质量标准的规定.结论 该品在避光,2~8 ℃密闭的储存条件下性质稳定,贮存期可为2年左右.
- 倪晓燕王荣海宋礼华储成风李增礼周乐春
- 关键词：稳定性
- 聚乙二醇化重组人干扰素α2b位置异构体比例离子交换高效液相色谱测定法的建立及修饰位点分析
- 2021年
- 目的建立聚乙二醇化重组人干扰素α2b(PEGylated recombinant human interferonα2b,PEG-rhIFNα2b)位置异构体比例的离子交换高效液相色谱(ion exchange high performance liquid chromatography,IEC-HPLC)测定法,并对各异构体修饰位点进行分析。方法色谱柱采用Proteomix SCX-NP10(10.0 mm×250 mm,10μm);流动相A为:1.8 mmol/L一水合柠檬酸-3.3 mmol/L十二水合磷酸氢二钠(pH 5.3),流动相B为:30 mmol/L柠檬酸三钠-35 mmol/L二水合磷酸二氢钠(pH 6.0);线性梯度洗脱:0~180 min(0%B→12%B),180~220 min(12%B→15%B);流速为:0.4 mL/min;柱温为:25℃;进样量:不低于100μg。同时对IEC-HPLC法进行专属性及重复性验证。采用建立的方法测定3批PEG-rhIFNα2b的位置异构体比例,并通过SPSS 19.0软件进行分析,拟定5个位置异构体比例质量标准。采用建立的方法富集5个位置异构体的洗脱峰,进行修饰位点定位。结果空白对照和rhIFNα2b原液无色谱峰出现,对PEG-rhIFNα2b位置异构体测定无干扰,PEG-rhIFNα2b可见5个异构体峰,且分离度良好;同批PEG-rhIFNα2b连续测定3 d,峰1、2、3、4和5面积的总RSD分别为1.96%、2.53%、2.54%、1.05%和1.86%,均<3.0%。PEG-rhIFNα2b的5个位置异构体比例质量标准可拟定为:峰1为5%~9%、峰2为14%~21%、峰3为7%~10%、峰4为30%~34%、峰5为31%~39%。PEG-rhIFNα2b位置异构体峰1修饰位点主要为K31,峰2主要为K134,峰3主要为K131和K164,峰4主要为K83,峰5主要为K121,未检测到N-末端PEG修饰。结论建立了PEG-rhIFNα2b位置异构体比例的IEC-HPLC测定法,该方法具有良好的专属性及重复性,可用于PEG-rhIFNα2b位置异构体比例的测定。
- 董世建许培许培李增礼李增礼程婷王荣海
- 关键词：位置异构体
- 聚乙二醇化重组人干扰素α2b注射液中游离聚乙二醇含量的测定被引量：3
- 2019年
- 目的建立测定聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)化重组人干扰素α2b(Peg-IFNα2b)注射液中游离PEG含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测方法,并进行方法的验证。方法以Sepax Bio-C18为固定相,流动相A为0.1%三氟乙酸-水溶液,流动相B为0.1%三氟乙酸-90%乙腈-10%水溶液,梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测不同浓度PEG对照品及Peg-IFNα2b注射液样品,建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法,并对方法进行专属性、线性范围、检测限及加样回收率验证。结果高效液相色谱显示,PEG对照品与混有PEG对照品的Peg-IFNα2b注射液色谱峰分离度良好,且无其他色谱峰干扰;PEG对照品在6.25~100.00μg/mL范围内线性良好,R2=0.9903;最低检测限约为1.56μg/mL;低、中、高3个浓度的PEG对照品加样回收率分别为107.51%、103.52%和95.99%。结论建立的方法简单、准确、快速,可用于测定Peg-IFNα2b注射液中游离PEG含量。
- 陆春燕许培董世建倪晓燕储成风李增礼王荣海
- 关键词：高效液相色谱蒸发光散射检测器
