浙江省教育厅科研计划(Y201326738)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 相关作者：李绍堂张培丽吴爱华林飞燕蒋磊更多>>
- 相关机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅科研计划浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HoxB8对结直肠癌细胞生长迁移的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:通过构建过表达Hox B8基因的慢病毒表达载体,研究Hox B8基因对结直肠癌细胞生长迁移的影响。方法:采用PCR技术扩增出人Hox B8基因全长,通过限制性内切酶Eco R I和SAC II双酶切,T4DNA连接酶连接,克隆至慢病毒载体,构建Lenti-Hox B8-GFP重组载体。重组阳性克隆进行PCR和酶切鉴定,测序验证序列正确。将重组载体质粒以及3个辅助质粒共转染人肾上皮细胞(293T)进行慢病毒包装,收集病毒颗粒。然后将病毒颗粒感染结直肠癌细胞RKO,并将RKO细胞分为转染组(转染慢病毒重组质粒LentiHox B8-GFP)、对照组(转染空白质粒Lenti-GFP)和空白对照组。RT-PCR和Western blot法检测病毒感染后 Hox B8在细胞中的表达情况。MTT、平板克隆形成实验和Transwell小孔试验检测过表达Hox B8基因对结直肠癌细胞生长迁移的影响。结果:经鉴定显示重组载体质粒构建成功,测序正确。293T细胞高效包装LentiHox B8-GFP慢病毒,携带Hox B8基因的慢病毒感染RKO细胞后可看到大量绿色荧光,RT-PCR和Western blot法检测分别证实Hox B8基因和蛋白在转染组细胞中呈高表达。实验组细胞的增殖和平板克隆形成能力高于空白组及对照组。Transwell小孔试验结果显示Hox B8高表达能够促进结直肠癌细胞的转移。结论:成功构建Hox B8慢病毒表达载体,过表达Hox B8能够促进结直肠癌细胞的增殖、克隆形成以及迁移。
- 林飞燕吴爱华张培丽蒋磊李绍堂
- 关键词：慢病毒载体结直肠肿瘤实时荧光定量PCR
- 降钙素原指导下肠梗阻预防性抗生素应用的临床价值被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨降钙素原指导下肠梗阻预防性抗生素应用的临床价值。方法:观察80例拟行非手术治疗的肠梗阻患者预防性抗生素应用的效果。80例患者在入院后第1、第3、第5天等隔日抽血检查降钙素原及血常规水平,至研究截点。其中40例患者(试验组)在降钙素原正常(<0.5 ng/mL)后停用抗生素。其余40例患者(对照组)依据传统标准停用抗生素。比较两组患者的治愈时间、感染相关并发症与抗生素应用天数。结果:两组患者治愈时间和感染并发症差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者平均用药时间比较,试验组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:降钙素原指导下肠梗阻预防性抗生素应用要优于传统标准抗生素应用。
- 李绍堂蒋飞照朱恒梁阮小蛟郑晓风
- 关键词：降钙素原肠梗阻抗生素预防性
