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广东省自然科学基金(S2012040006975)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：吴炳义曾勇胡子有更多>>
相关机构：南方医科大学南方医院更多>>
发文基金：南方医科大学南方医院院长基金广东省自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇菌体
  • 1篇T4噬菌体
  • 1篇BL21(D...
  • 1篇纯化

机构

  • 1篇南方医科大学...

作者

  • 1篇胡子有
  • 1篇曾勇
  • 1篇吴炳义

传媒

  • 1篇医学分子生物...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
T4噬菌体32蛋白的表达、纯化及鉴定被引量：1
2012年
目的构建T4噬菌体32蛋白的原核表达质粒T4—32-pET28b，并表达、纯化和鉴定重组目的蛋白。方法以T4噬菌体DNA基因组为模板，PCR扩增得到32蛋白基因片段，定向克隆到原核表达载体pET28b中，转化入大肠埃希菌BL21（DE3）中，用IPTG诱导表达目的蛋白，然后进行镍柱纯化和G-25脱盐，获得纯化目的蛋白，并进行核酸酶和细菌基因组污染检测及结合DNA单链能力检测。结果构建的T4-32-pET28b质粒经酶切及测序鉴定正确，在BL21（DE3）成功表达了T4-32蛋白，经镍柱和脱盐纯化获得了高纯度的目的蛋白。结论成功构建了T4噬菌体32蛋白的原核表达载体T4—32-pET28b，并实现高表达和纯化了目的表达产物。
胡子有曾勇吴炳义
关键词：T4噬菌体纯化BL21(DE3)
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