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国家自然科学基金(30771390)

作品数:10 被引量:54H指数:4
相关作者:董金皋曹志艳贾慧宋文静郝志敏更多>>
相关机构:河北农业大学更多>>
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相关领域:农业科学轻工技术与工程更多>>

文献类型

  • 10篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 13篇农业科学
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 12篇玉米
  • 12篇玉米大斑病
  • 12篇玉米大斑病菌
  • 12篇斑病
  • 12篇病菌
  • 12篇大斑病
  • 12篇大斑病菌
  • 6篇基因
  • 3篇克隆
  • 3篇黑色素
  • 3篇附着胞
  • 2篇致病力
  • 2篇漆酶
  • 2篇启动子
  • 2篇酶基因
  • 2篇功能分析
  • 2篇合成酶
  • 2篇合成酶基因
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白激酶

机构

  • 13篇河北农业大学

作者

  • 12篇董金皋
  • 10篇曹志艳
  • 4篇刘士伟
  • 3篇温雷蕾
  • 3篇贾慧
  • 2篇郝志敏
  • 2篇张鑫
  • 2篇宋文静
  • 1篇李坡
  • 1篇郭丽媛
  • 1篇王茜
  • 1篇朱显明
  • 1篇牛安莉
  • 1篇王青
  • 1篇郭欣欣
  • 1篇詹旭
  • 1篇赵巍
  • 1篇藏金萍
  • 1篇韩建民
  • 1篇吴敏

传媒

  • 5篇中国农业科学
  • 2篇植物病理学报
  • 1篇植物保护学报
  • 1篇华北农学报
  • 1篇河北农业大学...
  • 1篇中国植物病理...

年份

  • 1篇2012
  • 7篇2011
  • 1篇2010
  • 4篇2008
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
玉米大斑病菌黑色素合成酶基因4HNR的克隆及其启动子预测被引量:2
2008年
4HNR(1,3,6,8-tetra-HN reductase)gene of melanin biosynthesis in Setosphaeria turcica had been cloned successfully by RT-PCR in this study.Both sequences of DNA and cDNA of 4HNR were 807 bp and there was no intron in the sequences.This gene only had single copy in genome through Southern blotting analysis.A 2 285 bp for the flanking sequence of 5’ had been obtained and it had promoter structure through the software analysis.
温雷蕾曹志艳董金皋
关键词:玉米大斑病菌黑色素合成酶基因启动子克隆附着胞
玉米大斑病菌REMI体系的建立及突变体分析被引量:4
2011年
【目的】建立高效的玉米大斑病菌REMI遗传转化体系,进而利用该技术创制突变体,为克隆病菌生长发育和致病性相关的基因奠定基础。【方法】摸索玉米大斑病菌原生质体制备的菌龄、酶系统及酶解条件、原生质体收集方式、转化子最适潮霉素B筛选浓度以及转化使用的质粒,建立该病菌高效的REMI转化体系;利用PCR技术对潮霉素B抗性转化子进行筛选并对部分突变体进行分析。【结果】培养20 h的幼嫩菌丝,用浓度分别达到1.25%的Lyallzyme、Snailase和Drislase 3种酶混和液酶解4 h、离心速度为3 000 r/min时原生质体产量最大;当潮霉素B浓度为50μg·mL-1时,野生型菌株的分生孢子萌发和菌落生长完全受到抑制,可选用该浓度作为转化子的筛选浓度;使用pAN7-1转化效率较高,对利用该体系转化获得的大量转化子进行PCR检测中筛选出了部分产孢量和致病力变化的突变菌株。【结论】建立了玉米大斑病菌的REMI遗传转化体系,将为玉米大斑病菌突变体库的建立和致病相关基因的克隆奠定基础。
李坡谷守芹刘丽华牛安莉吴敏董金皋
关键词:玉米大斑病菌原生质体
植物病原真菌产漆酶菌株的筛选被引量:8
2011年
【目的】从常见植物病原真菌中筛选具有漆酶活性的病原菌,对相对酶活力较高的菌株进行漆酶致病力测定,为深入研究漆酶在植物病原真菌致病过程中所发挥的作用及病菌的扩展机理奠定基础。【方法】以2,2’-连氮-双[3-乙基苯并噻唑-6-磺酸](ABTS)为底物,通过平板显色反应筛选得到产漆酶的病原菌,同时利用苯胺蓝(Azure-B)脱色法确定目标菌株降解木质素作用,采用分光光度计法在420 nm下测定漆酶活性,最后利用组织病理学分析漆酶对病原菌致病力的影响。【结果】从20种重要植物病原真菌中筛选得到10种产漆酶的病原菌,且均具有降解木质素的作用,对其中6种颜色变化不同的病原菌进行漆酶活力测定,发现玉米大斑病菌的胞内漆酶活力最高,为18.984 U·mL-1,小孢拟盘多毛孢的胞外漆酶活力最高,为0.919 U·mL-1。致病力测定表明,在玉米大斑病菌的致病过程中,漆酶可以氧化玉米叶片并能够促进病原菌在寄主组织中的扩散。【结论】在产漆酶的植物病原真菌中,漆酶大多以胞内酶形式存在,并具有降解木质素的作用,漆酶可以促进玉米大斑病菌在寄主组织中扩展。
詹旭曹志艳邢继红董金皋
关键词:真菌漆酶酶活力致病力
玉米大斑病菌孢子萌发和附着胞形成的影响因素研究被引量:9
2008年
Factors of influence on conidium germination and appressorium formation of Setosphaeria turcica,such as light condition,conidial concentration,nutrient resources and pH value of conidial suspension were studied.There was no significant difference among light treatments.The optimal pH for conidium germination and appressorium formation was 5.0 to 7.0.The exogenous nutrient sources were not the indispensable factors for conidium germination,but 5% sugar solution were more favorable for appressorium formation than the others.Low conidial concentration in suspension(conidia ≤104/mL)was propitious to conidium germination and appressorium formation,which were inhibited significantly in higher concentration.It was suggested that the phenomenon was due to the self-inhibitor,a kind of lipophilic substance,existing in the site of conidium germination.
宋文静董金皋
关键词:玉米大斑病菌附着胞形成孢子萌发寄主植物玉米生产叶肉细胞
利用基因敲除技术对玉米大斑病菌PKS基因的研究
DHN 黑色素是许多植物病原真菌的致病相关因子,而聚合酮合成酶(Polyketide synthase,PKS)是玉米大斑病菌 DHN 黑色素合成途径中的关键酶之一。Southern blotting 结果表明,PKS ...
刘士伟曹志艳董金皋
关键词:玉米大斑病菌黑色素基因敲除
文献传递
DHN黑色素与玉米大斑病菌附着胞膨压形成的关系被引量:15
2011年
【目的】探讨玉米大斑病菌胞内DHN黑色素在附着胞膨压产生过程中的作用,明确玉米大斑病菌的侵入机理。【方法】通过诱导玉米大斑病菌附着胞产生,确定附着胞形成的最佳条件,利用溶质排斥技术及incipient-cytorrhysis技术对玉米大斑病菌野生型菌株01-23和黑色素缺失突变体△St3hnr附着胞细胞壁孔径大小和膨压进行测定。【结果】野生型菌株01-23细胞壁孔径范围是2.1—2.7 nm,膨压在5.4 MPa左右;黑色素缺失突变体△St3hnr细胞壁孔径范围是2.7—3.3 nm,膨压在4.1 MPa左右;缺乏黑色素的附着胞不能形成高膨压,丧失了穿透能力。【结论】黑色素层对溶质分子外渗的阻挡作用导致了附着胞高膨压的产生,膨压产生的机械穿透力在玉米大斑病菌穿透基质平面的过程中发挥了重要作用。
曹志艳贾慧朱显明董金皋
关键词:玉米大斑病菌附着胞膨压
玉米大斑病菌蛋白激酶C基因的克隆及表达规律分析被引量:4
2011年
【目的】克隆蛋白激酶C基因(PKC)及其启动子,验证该基因拷贝数,同时对PKC的表达规律进行研究,了解该基因在信号转导途径中的激活条件,为进一步研究该基因的功能奠定基础。【方法】首先通过简并引物PCR法获得PKC的同源片段,再利用Genome walking技术克隆片段的3′端和5′端侧翼序列,采用RT-PCR法扩增基因全长,并对基因结构和上游调控元件进行生物信息学分析。利用Southern blotting验证基因拷贝数。最后,利用半定量RT-PCR技术研究玉米大斑病菌在不同碳源、氮源培养以及非生物胁迫条件下,PKC的表达量的变化规律。【结果】获得PKC全长序列及其上游部分启动子区,生物信息学分析表明,PKC全长DNA序列为3 837 bp、cDNA序列为3 516 bp。由7个外显子和6个内含子组成,编码产物包含1 171个氨基酸残基。在1 380 bp的上游侧翼序列中包含CAAT-box及TATA-box,并且存在热激转录因子(HSF)结合元件和SP1、AP1等结合元件。PKC在玉米大斑病菌基因组中以单拷贝形式存在。半定量RT-PCR结果表明:在以蔗糖为碳源时PKC表达量高于其它碳源,铵态氮为氮源时PKC的表达明显受到抑制。重金属离子Mn2+、Cu2+、Zn2+显著抑制PKC表达。在高渗胁迫环境中下,山梨醇抑制PKC表达,且抑制程度与浓度成正相关;而高浓度NaCl造成高渗胁迫时,PKC由低浓度NaCl时的低丰度表达状态中被激活,表达量迅速增加。【结论】玉米大斑病菌PKC及其启动子的成功克隆与该基因的表达规律丰富了植物病原真菌的生物信息学资源,为深入了解植物病原真菌信号转导途径奠定了基础。
赵巍王茜郝志敏王青宋文静韩建民董金皋
关键词:玉米大斑病菌蛋白激酶C启动子半定量RT-PCR
玉米大斑病菌黑色素合成酶基因3hnr的克隆与功能分析
玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)是引起玉米大斑病的一种重要的丝状病原真菌,主要通过产生附着胞利用机械压力穿透植物组织侵入寄主。玉米大斑病菌附着胞壁中沉积的 DHN 黑色素可以保证附着胞积累足够的膨...
曹志艳温雷蕾刘士伟董金皋
文献传递
玉米大斑病菌聚酮体合成酶基因(StPKS)的RNAi分析
玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)是引起玉米大斑病的一种丝状病原真菌,主要通过附着胞的高膨压产生侵入钉侵染寄主。黑色素(melanin)作为有效的选择透过性屏障,沉积在成熟附着胞的细胞壁和细胞膜之间...
张鑫曹志艳刘士伟董金皋
文献传递
玉米大斑病菌聚酮体合成酶基因StPKS功能分析被引量:15
2011年
【目的】利用RNA干扰技术探讨玉米大斑病菌聚酮体合成酶基因StPKS的功能。【方法】将玉米大斑病菌StPKS基因片段连接到pSilent-1载体中,构建StPKS的RNA干扰载体pSilent-StPKS1-2。利用聚乙二醇(PEG)介导的方法将之转入玉米大斑病菌野生型菌株01-23的原生质体中,通过潮霉素筛选得到转化子,采用半定量RT-PCR方法分析转化子中StPKS的表达情况,显微观察转化子与野生型菌丝形态的差异。【结果】本研究构建了StPKS RNA干扰载体并进行了成功转化,经潮霉素抗性筛选和PCR验证最终获得了9个阳性转化子,其中5个转化子菌落颜色变浅。对转化子进行半定量PCR分析发现,5株转化子的StPKS表达量均有所下降;黑色素产量显著降低;菌丝呈不规则状,发生了膨大、变形、分枝等现象。【结论】StPKS在DHN黑色素合成途径中起作用,其表达量下降会减少黑色素的产生。
张鑫曹志艳刘士伟郭丽媛董金皋
关键词:玉米大斑病菌RNA干扰
共2页<12>
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