河北省应用基础研究计划(08965505D)
- 作品数：13 被引量：49H指数：5
- 相关作者：王冬梅陈琰刘刚侯春燕张洁更多>>
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- 发文基金：国家自然科学基金河北省应用基础研究计划河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 植物抗病防卫反应中的特异性钙信号被引量：4
- 2008年
- 在植物细胞中,钙离子是普遍存在的第二信使,参与多种信号途径。大量研究表明,钙信使系统参与植物与病原菌互作的信号转导过程。近些年来,特异性钙信号在抗病中的作用越来越受到关注。文章综述了近年来在植物表达防卫反应过程中特异性钙信号的形式及其形成的生理机制的研究进展。
- 张蓓刘刚王冬梅
- 关键词：钙信号防卫反应钙通道
- 小麦洛夫林10悬浮细胞系培养条件的优化与筛选
- 2011年
- [目的]优化和筛选小麦洛夫林10悬浮细胞系培养的条件。[方法]以成熟胚为外植体,探讨了附加不同浓度KT对愈伤组织诱导和继代培养的影响,并通过调整2,4-D、KT和蔗糖的浓度及初始接种量对悬浮细胞系的培养条件进行了优化筛选。[结果]小麦洛夫林10愈伤组织的诱导培养基中不宜加入KT;初始接种量为1.5 g,液体培养基中添加1.00~2.00 mg/L 2,4-D、0.05~0.10 mg/L KT和30.00g/L蔗糖,最有利于小麦洛夫林10悬浮细胞系的稳定。[结论]为以悬浮细胞系为材料深入开展小麦抗病机制的研究奠定了基础。
- 陈琰张洁王冬梅
- 关键词：小麦成熟胚愈伤组织
- 钙调素参与小麦抵抗叶锈菌侵染的信号转导过程的研究
- ＜正＞钙调素（calmodulin,CaM）是一种重要的Ca2﹢结合蛋白,参与介导了众多生理过程的调控。近年来利用分子生物学手段对CaM基因及其表达进行研究发现,在植物体中存在着多种CaM基因,它们编码相同或相似的
- 侯春燕王冬梅
- 关键词：钙调素实时定量PCR
- 文献传递
- TaCDPK2基因在小麦与叶锈菌互作过程中的表达分析被引量：2
- 2012年
- 在本实验室前期构建的非亲和互作的SSH文库基础上,从叶锈菌侵染的小麦叶片中发现在接种后8 h表现高表达量的CDPK2-EST。CDPKs即钙离子依赖蛋白激酶,是植物细胞应对各种生物和非生物胁迫过程中承接Ca2+流变化的重要因素。为进一步研究CDPK2在小麦与叶锈菌互作过程中的表达特性,采用RT-PCR和Western-Blotting技术分别在mRNA水平和蛋白质水平对小麦受叶锈菌侵染后不同亲和性组合中CDPK2的表达谱进行了检测。结果表明,小麦CDPK2基因受叶锈菌侵染诱导,不亲和组合在接种后4 h无论在mRNA水平还是蛋白质水平该基因均表现上调表达,而转录水平的表达量在接种后16 h降至对照水平;而在蛋白水平其表达量在接种16 h达到最大,之后又恢复至对照水平。亲和组合中该基因在接种后8 h在mRNA水平略有表达,在蛋白水平其表达量在接种后8 h和16 h有上调表达但其表达量低于不亲和组合,之后又趋于对照水平。这一结果表明,小麦CDPK2基因参与了小麦与叶锈菌的互作过程,并在该过程中对提高小麦抗叶锈能力有一定作用。这一结果为深入探讨小麦CDPK2基因在小麦抵抗叶锈菌侵染中的作用及作用机制奠定了基础。
- 程子义魏凤菊闫爱华张蕴玮王冬梅
- 关键词：叶锈菌小麦
- 小麦ATG8的原核表达及其抗血清制备被引量：3
- 2013年
- 提取小麦品种L10的总RNA,进行反转录,其产物用于探究自噬基因ATG8的生物学功能。用PCR方法克隆ATG8,将克隆的ATG8亚克隆至表达载体PMD19-T,酶切后切胶回收,然后把产物测序鉴定,转化宿主菌E.coliRosetta-gami B(DE3),构建原核表达系统,将融合蛋白纯化后制备其兔抗血清,然后利用Western Blotting技术对兔抗血清进行检测,鉴定了该抗血清的结合特异性。ATG8抗体的成功制备,为小麦中ATG8基因和自噬功能的研究奠定了基础。
- 吴洪波刘刚张路路王冬梅
- 关键词：免疫印迹抗血清融合蛋白原核表达
- 小麦自噬标志分子ATG6的原核表达及其抗血清制备
- 2011年
- 克隆小麦(Triticum aestivum L.)品种‘洛夫林10’(L10)中的ATG6(动物同源物为Beclin1)基因,并构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,经纯化后制备其兔抗血清。结果表明:从小麦品种L10中克隆获得1个ATG6的片段,长为1326 bp,利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,实现了对ATG6片段在原核系统的特异性表达。经蛋白纯化后,制备了其兔抗血清并通过Western blot鉴定了其特异性。ATG6抗体制备的成功,为小麦中ATG6基因和自噬功能的研究提供了研究基础。
- 刘刚吴洪波王冬梅
- 关键词：免疫印迹抗血清融合蛋白原核表达
- 受叶锈菌侵染的小麦细胞间隙液中抗病相关蛋白的研究
- 小麦叶锈菌(Puccinia triticina)属活体营养型寄生菌,具有高度的寄生专化性,它所引起的小麦叶锈病是一种世界性病害。分析鉴定感染叶锈菌的小麦叶片细胞间隙液(Intercellular washing flu...
- 吕术超侯春燕刘刚王冬梅
- 关键词：小麦叶锈菌细胞间隙液防卫反应双向电泳Β-1,3-葡聚糖酶
- 文献传递
- 小麦悬浮细胞应答激发子刺激的过敏性反应中Ca^(2+)和NO的动态变化及其相互作用被引量：3
- 2015年
- 以感染叶锈菌的小麦(Triticum aestivum)叶片细胞间隙液IWF-260作为激发子,刺激小麦品种洛夫林10和郑州5389的悬浮细胞,探讨由激发子引发悬浮细胞过敏性反应中Ca2+和NO的变化及相互作用。以荧光分子探针Fluo-3AM和DAF-FM DA分别对细胞内Ca2+和NO进行标记,利用激光共聚焦扫描显微镜对其动态变化进行实时监测,通过药物学实验对Ca2+和NO的产生机制及其可能存在的相互关系进行探讨。结果表明,2个小麦品种悬浮细胞的[Ca2+]cyt水平对激发子刺激的反应表现出明显的差异,对叶锈菌小种表现不亲和的洛夫林10悬浮细胞分别在激发子刺激后330秒和700秒出现2个钙峰;而对该小种表现亲和的郑州5389悬浮细胞在激发子刺激后[Ca2+]cyt水平稍有波动但变化不明显。药物学实验证明,[Ca2+]cyt的升高依赖于胞外钙离子内流,钙离子与激发子刺激诱发的过敏性防卫反应紧密相关。同样,在激发子刺激后,洛夫林10悬浮细胞出现1个NO峰,而郑州5389悬浮细胞胞质NO变化不明显。药物学实验初步证明,NO的产生与胞外钙离子内流密切相关。由此推测,在小麦悬浮细胞应答激发子刺激诱发的过敏性反应中,NO可能在钙的下游发挥作用。
- 乔妹孙嘉炜陈琰韩胜芳侯春燕刘刚王冬梅
- 关键词：CA2+激发子NO悬浮细胞
- 小麦与叶锈菌互作过程中的H_2O_2与HR被引量：19
- 2008年
- 以小麦品种洛夫林10为材料,与叶锈菌生理小种165和260分别组成亲和组合和不亲和组合,以荧光探针DCFHDA标记H2O2的变化,并借助荧光显微镜原位地直观显现了叶锈菌侵染过程中小麦叶片中H2O2的动态变化。结果表明,亲和组合中H2O2爆发表现为单峰曲线,峰值出现在接种后12h;不亲和组合中表现为双峰曲线,峰值分别出现在接种后12h和20h,第二个峰比第一个高约一倍,且不亲和组合中H2O2爆发的强度远远大于亲和组合。另外,通过药理学试验,采用活体注射法对小麦叶片在接种叶锈菌小种260之前分别预注射抗氧化药物AsA、DTT以及NADPH氧化酶抑制剂DPI和咪唑,观察这些药物对不亲和组合中寄主叶片产生的H2O2和HR的影响。结果表明,抗氧化药物和NADPH氧化酶抑制剂均使寄主叶片中H2O2爆发的强度降低,表现在两个H2O2峰均受到抑制,其中第二个峰受抑制的程度更明显,同时寄主细胞发生HR的面积减小。
- 祁艳刘刚侯春燕王冬梅
- 关键词：小麦叶锈菌H2O2
- IWF诱导小麦悬浮细胞产生NO及其与Ca^(2+)的关系被引量：5
- 2011年
- 【目的】以感染叶锈菌的小麦叶片细胞间隙液IWF-260作为激发子,刺激小麦洛夫林10悬浮细胞,探讨悬浮细胞受激发子刺激引发的NO变化情况及其产生的可能分子机制。【方法】采用Greiss试剂法及荧光分子探针DAF-2DA标记法检测胞内NO的动态变化,同时借助药物学试验探讨Ca2+和NO的关系。【结果】IWF-260能诱导小麦悬浮细胞产生NO,NO在IWF-260刺激诱发的细胞死亡过程中发挥重要作用。药物学抑制剂试验证明NOS和NR及胞外钙离子内流均与IWF-260刺激小麦悬浮细胞产生的NO有密切关系,且在NO的产生途径中,NR途径为主要途径。【结论】IWF-260能够诱导小麦悬浮细胞产生NO,NOS、NR及胞外Ca2+内流参与了此过程。
- 陈阳辉刘静陈琰侯春燕王冬梅
- 关键词：NO细胞间隙液一氧化氮合酶硝酸还原酶钙
