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Daxx研究进展被引量：3: 2006年; Daxx(death dom ain assoc iated prote in)是一种多功能的核蛋白,能与Fas死亡结构域结合,激活Jun氨基端激酶通路诱导细胞凋亡。Daxx也具有抗凋亡作用。Daxx与细胞内的转录因子和转录相关蛋白结合,发挥转录调控的作用。Daxx与多种病毒蛋白相互作用,调节病毒的复制周期和感染性。; 李金丽万艳平; 关键词：细胞凋亡转录调控

GFP-hDaxx融合蛋白高表达下调活化巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β: 2003年; 目的　研究GFP hDaxx融合蛋白瞬时高表达对活化巨噬细胞分泌活性的影响。方法构建GFP hDaxx融合蛋白真核细胞表达载体pEGFP/hDaxx。将其质粒转染巨噬细胞 ,用荧光显微镜观察GFP hDaxx融合蛋白或GFP的表达与定位 ,并利用Westernblot检测表达产物。通过GFP hDaxx融合蛋白在巨噬细胞内的瞬时高表达 ,在LPS诱导激活巨噬细胞后 0 .5h、4h、12h时 ,测定活化巨噬细胞分泌细胞因子TNF α和IL 1β的含量。结果　GFP hDaxx融合蛋白在巨噬细胞内瞬时高表达且定位于细胞核 ,GFP定位于细胞核与细胞浆。GFP hDaxx融合蛋白在巨噬细胞内的高表达 ,使LPS诱导活化的巨噬细胞分泌TNF α和IL 1β量明显降低 (在 4h及 12h时与对照组差异有显著性 ,P <0 .0 0 1)。结论　hDaxx瞬时高表达可下调活化巨噬细胞分泌细胞因子TNF α和IL 1β。; 万艳平谭立志刘安元余敏君占利生粟盛梅; 关键词：活化巨噬细胞分泌 TNF-Α IL-1Β

Brd4在HPV E2蛋白转录调节中的作用: 2009年; 人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)引起的宫颈癌患者日益增加,而HPV E2蛋白在宫颈癌发生和发展过程中起着重要作用,对其功能尚在研究中,本文就近年对Brd4在HPV E2蛋白转录调节中的作用研究作一综述。; 张琴万艳平; 关键词：人乳头瘤病毒 E2蛋白转录调节

腺病毒12型E1B55kD蛋白增强hDaxx转录抑制活性: 2004年; 目的　研究腺病毒 1 2型E1B 5 5kD蛋白 (Ad1 2E1B)对hDaxx转录调控的影响作用。方法　利用酵母双杂交法分析hDaxx与Ad1 2E1B的相互作用 ;共免疫沉淀试验和Westernblotting测定两种蛋白质在细胞内外的结合反应 ;通过虫荧光素酶报道基因系统 ,分析hDaxx对其转录活性的影响。结果hDaxx在细胞内外直接与Ad1 2E1B结合 ,并与全序列Ad1 2E1B发生相互作用 ;Ad1 2E1B显著增加hDaxx的转录抑制活性 (P <0 .0 1 )。结论　Ad1 2E1B与hDaxx相互作用并增强hDaxx的转录抑制活性。; 钟飞万艳平石君肖政粟盛梅唐双阳; 关键词：HDAXX 转录

GFP-hDaxx融合蛋白高表达抑制活化巨噬细胞分泌TNFα: 2003年; 目的　研究GFP -hDaxx融合蛋白 (GFP -hDaxx)即时高表达对激活巨噬细胞分泌TNFα的影响。方法　将GFP -hDaxx真核细胞表达载体pEGFP hDaxx转染巨噬细胞 ,用荧光显微镜观察GFP -hDaxx在巨噬细胞内的表达与定位。通过hDaxx在巨噬细胞内的即时高表达 ,测定LPS诱导激活巨噬细胞后 ,在 0 .5、4、1 2h时 ,活化巨噬细胞分泌细胞因子TNFα的含量。结果　GFP -hDaxx在巨噬细胞内即时高表达且定位于细胞核。GFP -hDaxx在巨噬细胞内的高表达 ,使LPS诱导活化的巨噬细胞分泌TNFα量明显降低 (在 4h及 1 2h时与对照组差异有显著性 ,P <0 .0 0 1 )。结论　hDaxx即时高表达降低活化的巨噬细胞分泌TNFα。; 何爱桃唐旭红周艺杨露清刘安元万艳平; 关键词：巨噬细胞 TNFΑ

Daxx亚细胞定位研究进展被引量：5: 2009年; 死亡域相关蛋白(death domain-associated protein,Daxx)是一种高度保守的核蛋白,在转录调控、致癌、抵抗病毒感染等方面有重要作用。Daxx可定位于早幼粒细胞白血病蛋白核体、核质、核仁、胞浆和异染色质。Daxx通过修饰或与其他蛋白相互作用后能在亚细胞区室之间发生转位。应激条件下,Daxx与多种分子相互作用并发生转位,进而影响下游信号通路。本文综述了Daxx在不同条件下的亚细胞定位及在各亚细胞区室之间的转位。; 陈苏芳朱翠明万艳平; 关键词：DAXX 亚细胞定位转位应激

GST-hDaxx蛋白的构建及其原核表达产物的鉴定: 2004年; 目的　构建GST hDaxx蛋白并在原核细胞中诱导表达GST hDaxx融合蛋白 ,并研究其与 p5 3的结合能力。方法　构建GST hDaxx融合蛋白原核细胞表达载体pGEX 4T/hDaxx ,在大肠杆菌 (E .col i)中用异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达。表达产物用亲和层析柱加以纯化后 ,Westernblot鉴定表达产物与纯化物。通过共免疫沉淀反应与Westernblot观察hDaxx与p5 3的结合反应。结果　在原核细胞中成功表达了GST hDaxx融合蛋白 ,hDaxx与 p5 3可发生共免疫沉淀反应。结论　 1.GST hDaxx融合蛋白成功表达 ;2 .hDaxx和 p5 3的相互结合提示它们可能与肿瘤的发生有关。; 唐旭红朱翠明万艳平; 关键词：原核细胞 WESTERN BLOT法融合蛋白 P53蛋白肿瘤生成

HSV-1早早期蛋白0对巨噬细胞凋亡及分泌活性的影响: 2011年; 目的研究人单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)早早期蛋白0(ICP0)对巨噬细胞(MΦ)凋亡及分泌活性的影响,为进一步研究ICP0蛋白在HSV-1致病机制中的作用奠定实验基础。方法将真核表达载体PT7-110转染MΦ,以抗ICP0抗体为一抗作Western blot检测其表达。在转染48 h后以ELISA法分析各组培养基中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)产生水平,并收集MΦ经流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。结果 ICP0能够刺激MΦ产生TNF-α和IL-6,且能诱导MΦ发生凋亡。结论 HSV-1 ICP0高表达可诱导MΦ发生凋亡并上调其分泌细胞因子TNF-α和IL-6。; 黄靓张弛谭立志高勇强王汉群曾谷清; 关键词：TNF-Α IL-6

GFP-HPV18 E2及其突变体融合蛋白在真核细胞内的表达与定位: 2007年; 目的:研究HPV18 E2及其N端(TAD)、C端(DBD)与GFP融合蛋白在巨噬细胞(MΦ)内的表达与定位。方法:将真核表达载体pEGFP-C1/E2、pEGFP-C1/TAD和pEGFP-C1/DBD及pEGFP-C1分别转染MΦ,48h后用倒置荧光显微镜观察荧光情况,以确定GFP及融合蛋白的表达;以抗GFP抗体为一抗作Western blot检测相应蛋白质的表达。结果:在荧光显微镜下,4种质粒转染的细胞,pEGFP-C1组细胞内均有荧光;pEGFP-C1/E2组荧光主要在细胞核,但细胞浆也有;pEGFP-C1/DBD仅在细胞核有荧光,pEGFP-C1/TAD仅在细胞浆有荧光。Western blot检测到GFP-HPV18 E2及其突变体融合蛋白在细胞内的表达。结论:GFP-E2及其突变体融合蛋白均能在巨噬细胞内表达,且GFP-E2主要定位于细胞核,GFP-DBD定位于细胞核内,GFP-TAD定位于细胞浆。; 陈春莲万艳平彭俊; 关键词：人乳头瘤病毒18型 E2蛋白

GFP-ICP0融合蛋白高表达增强活化巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β: 2008年; 目的研究GFP-ICP0融合蛋白瞬时高表达对活化巨噬细胞分泌活性的影响。方法构建GFP-ICP0融合蛋白真核细胞表达载体pEGFP/ICP0。将其转染巨噬细胞,用荧光显微镜观察GFP-ICP0融合蛋白在巨噬细胞内的表达与定位,并利用Westernblot检测表达产物。通过GFP-ICP0融合蛋白在巨噬细胞内的瞬时高表达,在LPS诱导激活巨噬细胞后12、24、48h时,测定活化巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β的含量。结果GFP-ICP0融合蛋白在巨噬细胞内瞬时高表达且定位于细胞核。GFP-ICP0融合蛋白在巨噬细胞内的高表达,使LPS诱导活化的巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β量明显增加(在12、24与48h时与对照组差异有显著性,P<0.01)。结论ICP0即时高表达可上调活化巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β。; 黄靓张弛谭立志; 关键词：巨噬细胞 IL-1Β

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湖南省教育厅科研基金(02C391)

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