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siRNA沉默P_2X_4表达对永生化小鼠小胶质细胞活化的抑制效应被引量：1: 2009年; 目的:探讨特异性P2X4 siRNA对永生化小鼠小胶质细胞活化的抑制效果.方法:体外培养永生化小鼠小胶质细胞,随机分为空白对照组、阴性对照组、转染siRNA-F1组.空白对照组未进行任何干预;阴性对照组转染Ncontrol siRNA;转染siRNA-F1组转染先前筛选出来的1条特异性siRNA.3组细胞分别用50μmol/LATP刺激,采用激光扫描共聚焦显微镜检测胞内钙离子浓度([Ca2+]i);P2X4R/OX42免疫荧光双标染色观察细胞形态.结果:转染siRNA-F1组ATP活化小胶质细胞后,胞内钙离子释放较阴性对照组和空白对照组减少;P2X4R/OX42免疫荧光双标染色显示转染siRNA-F1组细胞存在活化态小胶质细胞和静息态小胶质细胞,而空白对照组和阴性对照组只存在活化态小胶质细胞.结论:siRNA-F1能部分抑制永生化小鼠小胶质细胞的活化.; 彭伟张咸伟姚文龙邓乾伍源田玉科; 关键词：细胞内钙离子浓度小胶质细胞激光扫描共聚焦显微镜神经病理性痛

嘌呤和嘧啶受体与神经病理性疼痛: 2010年; 嘌呤和嘧啶受体（receptors for purines and pyrimidines, P受体）包括P1和P2受体。P1受体又称为腺苷受体，属于G-蛋白耦联型受体；P2受体包括P2X和P2Y受体，其中P2X受体是细胞膜上的离子型通道，并为细胞外三磷酸腺苷（A11P）所门控，P2Y受体为G-蛋白耦联型受体。; 彭伟张咸伟; 关键词：神经病理性疼痛嘌呤 P2X受体 P2受体 G-蛋白三磷酸腺苷

永生化小鼠小胶质细胞P_2X_4siRNA靶点的筛选被引量：5: 2008年; 目的筛选永生化小鼠小胶质细胞特异性P2X4siRNA。方法转染FAM-siRNA16h后,激光扫描共聚焦显微镜检测永生化小鼠小胶质细胞转染效率;将3条特异性siRNA经lipofectamine2000介导转染永生化小鼠小胶质细胞;72h后半定量RT-PCR观察干扰前后P2X4基因mRNA水平表达,比较对应不同位点的三对siRNA片段对P2X4基因的干扰效果,分析RNA干扰的特异性,从中筛选出特异性最高的一条siRNA;转染该序列72h后Western blot检测P2X4基因蛋白表达。结果激光扫描共聚焦显微镜显示转染效率达80%;三对siRNA片段中siRNA-F1的沉默效率最高,最大干扰效率达72.2%;Western blot显示转染siRNA-F1后P2X4基因蛋白表达下调。结论siRNA-F1可有效下调永生化小鼠小胶质细胞中P2X4基因mRNA表达水平,并且能明显下调P2X4蛋白表达。; 彭伟张咸伟田学愎邓乾姚文龙曹菲田玉科; 关键词：小胶质细胞 RNA干扰

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湖北省自然科学基金(2004ABA241)