国家自然科学基金(31060281)
- 作品数：18 被引量：52H指数：5
- 相关作者：申红王俊刚高明明王志涛何晓辉更多>>
- 相关机构：石河子大学河南科技学院北京市水生野生动植物救护中心更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生政治法律更多>>
- 黄粉虫抗菌肽对耐药粪肠球菌抑菌效果的研究被引量：5
- 2016年
- 【目的】探究黄粉虫抗菌肽对耐药粪肠球菌抑菌效果。【方法】用浓度为1×108CFU/m L的粪肠球菌菌液与麸皮混合饲喂诱导黄粉虫幼虫,在24 h后提取黄粉虫抗菌肽,用考马斯亮蓝法(Bradford法)测定黄粉虫抗菌肽粗提液浓度,采用试管稀释法测定青霉素、庆大霉素对粪肠球菌的最小抑菌浓度(MIC),用多步诱导法筛选出青霉素和庆大霉素耐药的粪肠球菌,用Kirby Bauer法测定黄粉虫抗菌肽对耐青霉素和庆大霉素的粪肠球菌的抑菌活性。【结果】经粪肠球菌诱导24 h后提取的黄粉虫抗菌肽浓度,显著高于未用粪肠球菌诱导的对照组(P<0.05),其抑菌活性也显著高于对照组(P<0.05),并且诱导黄粉虫抗菌肽组对耐青霉素、庆大霉素粪肠球菌的抑菌效果显著高于抗生素组(P<0.05)。【结论】黄粉虫抗菌肽对耐药粪肠球菌具有显著的抑菌效果。
- 何晓辉王立霞方琴王俊刚申红
- 关键词：黄粉虫粪肠球菌抗菌肽耐药菌抑菌
- 蝇蛆抗菌肽粗提的优化及其抑菌活性研究被引量：8
- 2016年
- 为了提高蝇蛆抗菌肽粗提成功率,探讨其抑菌活性,本试验采用不同方法进行蝇蛆抗菌肽的提取,对大肠杆菌和沙门菌诱导的抗菌肽粗提液的抗菌活性及其在-20℃和-80℃下的抑菌效果进行了测定。结果显示,大肠杆菌和沙门菌诱导的蝇蛆抗菌肽浓度和抑菌圈直径均大于庆大霉素对照组;-20℃浸提匀浆液和-80℃冷冻保存过上清的蝇蛆抗菌肽对各种菌的抑菌效果显著高于其他温度。提示,经大肠杆菌和沙门菌诱导蝇蛆活体、-20℃浸提匀浆液和-80℃冷冻保存蝇蛆抗菌肽粗提液等条件均能明显提高蝇蛆抗菌肽的获得率和抑菌活性。
- 王志涛王旭东刘玉王俊刚申红
- 关键词：蝇蛆抗菌肽抑菌
- 黄粉虫抗菌肽的提取及其生化特性的研究被引量：4
- 2015年
- 【目的】测定黄粉虫Tenebrio molitor Linnaeus幼虫抗菌肽提取液的浓度、抑菌活性及其部分生化特性和凝血效应。【方法】本实验用浓度为1×108 CFU/m L大肠杆菌Escherichia coli诱导5龄黄粉虫幼虫,分别在诱导12、24、36、48、60和72 h后提取其中的抗菌肽,并用考马斯亮兰法测定抗菌肽粗提液蛋白的浓度,并用滤纸片法测定其抑菌活性,同时对其热稳定性、反复冻融稳定性、蛋白酶稳定性及不同p H对其活性的影响等生化特性及凝血效应进行了探究。【结果】经大肠杆菌诱导的黄粉虫抗菌肽粗提液的蛋白浓度均显著高于未诱导的黄粉虫组(P<0.01),且在诱导48 h时产生的抗菌肽提取液蛋白的浓度最高,产生的抑菌圈直径也显著高于未诱导的黄粉虫组(P<0.05),生化特性的测定结果显示,黄粉虫抗菌肽有较好的热稳定性、酶稳定性及酸碱稳定性,反复冻溶后对其抑菌活性影响不大,并且无凝血效应。【结论】大肠杆菌可以刺激黄粉虫的免疫系统,增加抗菌肽的表达量,使其产生浓度高、活性强的抗菌肽,且生化特性较稳定。本研究对黄粉虫抗菌肽作为绿色抗生素用于畜牧养殖业的进一步开发与利用提供了科学的理论依据。
- 朱小奇谢彩云聂荷敏赵肖陈小娜何晓辉宋欢王俊刚申红
- 关键词：黄粉虫抗菌肽抑菌活性生化特性
- 白痢鸡粪培养蝇蛆抗菌肽对白痢沙门菌感染雏鸡的疗效观察被引量：9
- 2015年
- 【目的】用白痢鸡粪培养蝇蛆,探究蝇蛆抗菌肽对鸡白痢沙门菌感染雏鸡的治疗效果。【方法】用鸡白痢沙门菌感染雏鸡,收集雏鸡粪便培养蝇蛆,粗提蝇蛆抗菌肽,测定其含量和抑菌活性,试验同时设健康鸡粪便培养的蝇蛆抗菌肽作为对照。分别用白痢鸡粪和健康鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽治疗白痢病鸡,测定其肠道细菌数量和治愈率,试验同时设抗生素组(恩诺沙星)和未治疗对照组。【结果】白痢鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽含量显著高于健康鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽(P<0.05);2种鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽对大肠埃希菌、沙门菌和葡萄球菌均有抑制作用,但白痢鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽的抑菌活性显著高于健康鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽(P<0.05);蝇蛆抗菌肽治疗白痢病鸡后,白痢鸡肠道细菌数量显著低于对照组(未治疗组)(P<0.05),稍高于抗生素治疗组(P>0.05),但白痢鸡肠道细菌数量均达到健康鸡的标准范围。白痢鸡粪培养蝇蛆抗菌肽组的治愈率为43.33%,与健康鸡粪培养蝇蛆抗菌肽组和抗生素组差异不明显。【结论】白痢鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽对沙门菌感染的鸡白痢病具有治疗作用。
- 刘玉赞哈尔何晓辉朱小奇申红王俊刚
- 猪链球菌乳酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的反应原性研究
- 2015年
- 为了验证双向电泳筛选出的7型猪链球菌WH分离株免疫相关蛋白乳酸脱氢酶的反应原性,本实验采用克隆表达的方法对其进行研究。根据质谱鉴定的NCBI登录号查找乳酸脱氢酶基因序列,并设计特异性引物,对乳酸脱氢酶基因进行扩增,克隆入p ET30a载体,构建重组质粒p ET30a-LDH,测序后转化入大肠埃希氏菌中。用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。SDS-PAGE分析结果显示表达的重组融合蛋白相对分子量为41ku;Western blot分析结果显示该重组蛋白可与7型猪链球菌WH分离株多克隆抗体发生特异性血清学反应。这表明表达的重组LDH蛋白具有良好的反应原性,为预防和控制猪链球菌病提供有效的疫苗候选分子奠定基础。
- 高明明王淑杰王俊金家民张璐刘永刚李爱东陶冶李莉姜成刚王刚申红
- 关键词：猪链球菌乳酸脱氢酶反应原性原核表达
- 亚洲飞蝗抗菌肽的提取及其部分理化特性的研究被引量：1
- 2015年
- 为了研究大肠杆菌、葡萄球菌以及混合菌(大肠杆菌和葡萄球菌)对亚洲飞蝗抗菌肽的诱导效果及其部分理化特性,本试验采用浓度为1×108CFU/m L的大肠杆菌、葡萄球菌、混合菌分别诱导亚洲飞蝗幼虫,诱导24 h后粗提抗菌肽,用考马斯亮蓝法测定抗菌肽提取液的浓度,并对其热稳定性、反复冻融稳定性及不同p H对其活性的影响进行了研究。结果显示:用细菌诱导的亚洲飞蝗幼虫产生抗菌肽的浓度均显著高于未诱导的亚洲飞蝗组(P<0.05),并且具有较好的热稳定性(100℃时,抑菌率为82.65%)和耐受酸碱的稳定性(p H 1-7时,抑菌率均在92.97%以上)以及反复冻融与低温保存性(冻融6次以内的抗菌肽与未经冻融组差异不显著(P>0.05))。
- 宋欢王贝贝赵宁王海霞孙艳梅王俊刚申红
- 关键词：亚洲飞蝗抗菌肽理化特性
- 大肠杆菌刺激蝇蛆产生抗菌肽浓度和抑菌活性的测定被引量：2
- 2013年
- [目的]确定大肠杆菌菌液刺激蝇蛆产生浓度高、活性强的抗菌肽时间和蝇蛆饲喂家禽的安全性。[方法]采用不同浓度的大肠杆菌菌液分别与麸皮混合饲喂蝇蛆,于10、24、48 h分别收集存活蝇蛆并对其粗提取抗菌肽,通过考马斯亮蓝法和抑菌试验分别测定各试验组抗菌肽粗提液的浓度和抑菌力,同时用CFU计数法测定细菌培养的家蝇幼虫的细菌含量以确定其作为绿色抗生素的安全性。[结果]浓度为3.0×107cfu/ml的大肠杆菌作用24 h的蝇蛆组产生的抗菌肽浓度最高、活性最强,且蝇蛆体内细菌含量为1.6×105cfu/g,低于国家规定的饲料细菌标准含量最低值(2×106cfu/g)。[结论]为进一步利用动物死尸、畜禽粪便生物转化蝇蛆产生大量安全、浓度高且活性强的蝇蛆抗菌肽作为绿色抗生素运用于禽类养殖业奠定了基础。
- 武玉飞刘海燕高明明周钢王俊刚申红
- 关键词：蝇蛆大肠杆菌抗菌肽抑菌活性
- 昆虫抗菌肽的研究进展被引量：4
- 2015年
- 昆虫抗菌肽是昆虫受到刺激或感染后由体内血淋巴产生的一类小分子碱性多肽,具有广谱抗菌活性、分子量小、容易合成、不易形成耐药性等特性,可作为新一代抗菌制剂,具有良好的应用前景。本文对部分昆虫抗菌肽的来源和抗菌机制作了简要概述,并就其应用前景进行阐述,以期为昆虫抗菌肽的深层次研究提供参考。
- 王志涛王俊刚申红
- 关键词：抗菌肽昆虫抗菌
- 多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立被引量：6
- 2015年
- 根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够检测欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV的多重实时荧光定量PCR方法。该方法的重复试验表明其批内和批间的变异系数最高值分别为1.84%和1.76%;灵敏性试验表明其检测下限为10copies/μL;特异性试验表明与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性;临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样本中美洲型及高致病性PRRSV的核酸;此外,本研究用欧洲型PRRSV质粒进一步验证了该方法可以检测出欧洲型PRRSV的目的基因。该方法的建立为不同类型的PRRSV快速检测提供了有效手段,可用于猪繁殖与呼吸综合征疫情的监测及防控。
- 温青娜周玲玲申红杨菊凤林祥群
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 大肠杆菌诱导黄粉虫产生抗菌肽的提取及抑菌活性的测定
- 2014年
- 为了探究大肠杆菌对黄粉虫抗菌肽的诱导效果,采用不同方法处理的大肠杆菌诱导黄粉虫产生抗菌肽,经过诱导的黄粉虫于12、24、36、48、60、72 h时,分别粗提其中的抗菌肽,测定其浓度和抑菌活性,同时,统计了大肠杆菌诱导的黄粉虫体内细菌含量。结果表明：经诱导各个时间点的黄粉虫抗菌肽浓度均显著高于未诱导的黄粉虫组（P〈0.05）,且在诱导48 h时产生的抗菌肽浓度最高,大肠杆菌和灭活大肠杆菌诱导黄粉虫产生的抗菌肽对3种细菌的抑菌直径均显著大于未诱导组,且对大肠杆菌抑菌力高于金黄色葡萄球菌和沙门氏菌（P〈0.05）,大肠杆菌诱导48 h后的黄粉虫中细菌含量为9.5×10~4 CFU/g,低于国家规定标准饲料中细菌总数最低值2×10~6 CFU/g。提示,用大肠杆菌诱导黄粉虫能刺激黄粉虫产生高表达量的抗菌肽,并对大肠杆菌具有较强的抗菌性能且具有一定的安全性。
- 朱小奇赵肖武玉飞谢彩云陈小娜王俊刚申红
- 关键词：黄粉虫抗菌肽抑菌活性
