国家自然科学基金(30570688)
- 作品数：9 被引量：21H指数：3
- 相关作者：李俐马颖哲张家颖张桂荣张蒙更多>>
- 相关机构：吉林大学生物化学教研室更多>>
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- 低渗培养对LLC-PK1细胞pICln蛋白分布的影响
- 2006年
- 目的探讨低渗条件下LLC-PK1细胞pIC ln蛋白的分布变化。方法分别用等渗和50%低渗培养基对LLC-PK1细胞进行培养,用抗pIC ln血清抗体对细胞可溶性和不溶性成分的pIC ln进行W estern b lot检测,同时进行细胞的荧光抗体染色。结果W estern b lot显示等渗培养时LLC-PK1细胞可溶性成分中pIC ln免疫反应带的密度为(51±3)%;50%低渗培养时明显增多到(69±3)%,两者比较有统计学意义(P<0.01)。荧光抗体染色也显示了pIC ln在胞质中明显增多。结论pIC ln对低渗是敏感的,它可能作为胞质调节蛋白、低渗时在胞质中分布增多能促进胞内渗透性物质的运出,参与调节细胞体积而对抗低渗。
- 马颖哲王丽华张桂荣马岩张蒙韩智冲
- 关键词：低渗
- 乙肝患者血清IL-12、IL-18、及γ干扰素水平变化及病毒含量测定的临床意义被引量：2
- 2008年
- 李俐李晓林李晓梅魏征人
- 关键词：IL-12IL-18血清乙肝患者病毒含量Γ干扰素
- 老年支气管哮喘患者IL-18、IL-12水平的变化及临床意义被引量：9
- 2011年
- 目的探讨老年支气管哮喘患者外周血白细胞介素18(IL-18)和IL-12的变化及其在哮喘发病机制中的作用。方法采用ELISA法检测42例老年支气管哮喘患者及26例正常对照组检测血清中IL-18及IL-12水平。结果支气管哮喘发作期患者的血浆IL-12明显高于正常对照组(P<0.01),IL-18明显高于正常对照组(P<0.01)。结论 IL-18、IL-12参与了老年支气管哮喘发作期的发病机制,IL-18、IL-12在Th1/Th2细胞因子网络失衡的发病机制中起重要的调节作用。
- 李俐杨成君陆艳娟武广恒
- 关键词：支气管哮喘白细胞介素12白细胞介素18
- 抗重组人白细胞介素12单克隆抗体的制备及其生物学特性
- 2007年
- 目的:以纯化的重组人白细胞介素12(rhIL-12)蛋白为抗原,制备具有生物活性的rhIL-12单克隆抗体(McAb),并对其特性进行研究鉴定,为肿瘤及免疫相关性疾病的诊断与治疗提供具有实用价值的研究工具。方法:以纯化的rhIL-12p70免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术,用间接ELISA法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞及多次克隆化,培养制备杂交瘤细胞系,用clutathione sepharose 4B进行纯化。采用间接ELISA及Western blotting等方法对McAb的Ig亚类(型)腹水效价及特异性进行鉴定。结果:建立了3株持续分泌rhIL-12p70McAb的杂交瘤细胞株,3株细胞染色体数目均为100条左右,证实为杂交瘤细胞,所分泌的抗体为2株IgG1亚类及1株IgG2a亚类,轻链属k型,小鼠腹水效价测定分别为1∶5.9×106、1∶2.9×107、1∶3.6×107,亲和力依次为EM5>EM6>EV9。结论:成功地制备了3株能稳定分泌抗rhIL-12p70的杂交瘤细胞株,产生的McAb特异性好,亲和力高。
- 李俐马颖哲张桂荣
- 关键词：白细胞介素12单克隆抗体杂交瘤
- pICln蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2008年
- 目的:制备特异性的抗pICln蛋白的单克隆抗体(McAb),为pICln的纯化及检测等提供必要的工具。方法:以pICln的合成肽为免疫原,对BALB/c小鼠注射免疫,将免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞NS-1进行细胞融合,用显微镜下挑选单个克隆的克隆化方法克隆化,用间接ELISA检测法进行筛选。单抗的效价、亚型及特异性用ELISA、免疫双向扩散实验和Western blot等检测。结果:获得了稳定的分泌型杂交瘤细胞株大2B7和4A3,2B7培养上清液单抗效价为1∶64,属IgG1亚型,其腹水抗体效价及纯化抗体的效价分别为1∶1.28×104、1∶6.4×103,Western blot及免疫耗竭实验呈现一条约40kD的特异性带,免疫组织化学染色显示在细胞核和细胞质中呈现阳性反应。结论:本次制备的单抗具有特异性、高效价,可应用于pICln蛋白的纯化及检测等研究。
- 李晓梅李俐马颖哲郗艳丽张蒙
- 关键词：合成肽单克隆抗体WESTERNBLOT
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染脱色方法的应用被引量：3
- 2015年
- 目的探讨建立聚丙烯酰胺凝胶电泳的无毒性染色和快速脱色的方法。方法在染色和脱色时分别10%的三氯醋酸代替高浓度的醋酸,用乙醇替代有毒性的甲醛,同时用微波加热染色、脱色。结果与传统方法比较,在不影响检测灵敏度的情况下,减少了有毒性有机溶剂使用,大大缩短分析所需时间,且降低实验成本。结论改良方法具有染色背景浅、省时、降低成本、安全低毒等优点,是一种便于推广的好方法。
- 李建伟李俐陆陪信李晓林张家颖
- 关键词：电泳聚丙烯酰胺
- pICln蛋白在不同细胞中的分布
- 2007年
- 目的检测pICln蛋白在不同细胞中的分布。方法制备抗pICln蛋白的合成肽血清,并用Western blot对E1等细胞pICln蛋白的表达及猪和大鼠肾脏细胞中pICln蛋白的分布进行检测。结果E1等8种细胞均在相对分子质量约40000的位置出现免疫反应带。猪肾脏pICln主要分布在可溶性胞质中,大鼠肾脏pICln蛋白主要分布在不溶性的膜结构中。结论pICln蛋白在组织、细胞中普遍表达,为其实施某种功能作用奠定基础。
- 马颖哲李俐王丽华马岩韩智冲张蒙
- 关键词：合成肽
- 乙肝患者血清IL-2、sIL-2R水平与肝损程度、HBV DNA含量的变化被引量：7
- 2008年
- 目的探讨乙型肝炎患者血清IL-2、sIL-2R含量与肝损程度和HBV DNA含量的相关性及临床意义。方法收集急、慢、重型乙肝患者血清标本共93例,28例健康人血清标本作为对照组,采用ELISA法检测各型乙型肝炎患者血清中IL-2、sIL-2R。HBV DNA定量采用荧光定量PCR法。结果各型乙肝患者血清中IL-2均有所下降,sIL-2R均高于正常对照组(P<0.05),并随肝损伤程度加重,含量随之增加。慢性肝炎患者血清sIL-2R水平与HBV DNA含量呈正相关系。结论乙型肝炎患者血清IL-2、sIL-2R水平及HBV DNA含量可作为判断感染乙肝病毒后机体免疫水平和细胞受损程度的参考指标。
- 李俐张家颖刘剑凯杨成君吴山力马颖哲
- 关键词：乙型肝炎HBVDNA白细胞介素
- 猪肾脏组织plCln蛋白分布的研究
- pICln(p-protein,I-current,Cl-chloride,n-nucleotide-sensitive.)是一种对核苷酸敏感的氯离子通道‘候选’蛋白,其广泛存在于各种组织细胞中,它在细胞体积调节上发挥重...
- 郗艳丽马岩马颖哲李贺李晓梅
- 文献传递
- 抗重组人白细胞介素-12单克隆抗体的制备及初步应用
- 2008年
- 目的制备抗重组人白细胞介素-12(rhIL-12)单克隆抗体(McAb),并建立检测IL-12的双抗体夹心ELISA方法。方法以纯化的rhIL-12(p70)免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法,检测胃癌患者术前、术后血清IL-12水平的变化。结果筛选出3株稳定分泌抗rhIL-12的单抗杂交瘤细胞株,纯化后单抗纯度达95%以上。免疫球蛋白亚类2株为IgG1,1株为IgG2a,轻链属!型,相对亲和力依次为EM5>EM6>EV9。Western blot及ELISA交叉试验表明,单抗具有良好的特异性。建立的双抗体夹心ELISA方法检测rhIL-12的最低检出限为20pg/ml,线性范围为25～3200pg/ml。应用此法检测胃癌患者术前血清IL-12水平较正常对照组明显降低,术后10d明显升高。术后给予免疫增强型NE组IL-12水平较未给予组明显升高。结论制备的抗rhIL-12单克隆抗体,能够用于IL-12的体内外免疫学检测,为IL-12的研究、检测及临床应用奠定了基础。
- 李俐马颖哲张家颖张桂荣
- 关键词：单克隆抗体双抗体夹心ELISA胃癌
