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FasL启动子调控的报告基因表达质粒的构建及活性分析被引量：1: 2006年; 目的扩增FasL启动子并构建带有FasL启动子的荧光素酶报告质粒,并评价在皮质酮(啮齿类动物体内的糖皮质激素)作用的睾丸Leydig细胞中,由FasL启动子调控的荧光素酶的表达活性。本研究将为进一步分析Leydig细胞中FasL启动子转录调控的作用机制奠定基础。方法采用DNA重组技术构建由FasL启动子调控的荧光素酶报告基因的表达质粒。此重组质粒经阳离子脂质体LipofectAMINE介导,瞬时转染入Leydig细胞中,36h后细胞经皮质酮处理,并于48h时收集细胞。测定荧光素酶的相对表达活性。结果(1)酶切及测序证实成功扩增FasL基因启动子并构建了带有FasL基因启动子的报告基因表达质粒；(2)皮质酮处理的Leydig细胞中FasL启动子调控的荧光素酶表达质粒的表达活性显著增高。结论构建成功的带有FasL启动子的荧光素酶报告质粒可准确地评价FasL启动子在凋亡过程中的作用。; 柴蔚然高惠宝; 关键词：报告基因 LEYDIG细胞皮质酮

NFAT2 is implicated in corticosterone-induced rat Leydig cell apoptosis被引量：2: 2007年; 瞄准：为了调查激活的 T 的原子因素的激活，房间(NFAT ) 和它在皮质脂酮(CORT ) 的功能导致了老鼠 Leydig 房间的 apoptosis。方法：在老鼠 Leydig 房间的 NFAT 被组织化学的染色的西方的弄污和免疫检测。Cyclosporin A (CsA ) 被用来在 Leydig 房间的导致 CORT 的 apoptosis 评估 NFAT 的潜在的参与。细胞内部的 Ca^(2+) 用 Fluo-3/AM 在对待 CORT 的 Leydig 房间被监视。在 Leydig 房间为 12 h 加 CsA 与 CORT 或 CORT 被孵化以后，在原子核并且在细胞质的 NFAT2 的层次被半量的西方的弄污测量。在导致 CORT 的 Leydig 房间 apoptosis 的 NFAT2 的角色被在 FasL 表示和 apoptosis 上由 CsA 在表示和 NFAT2 激活的抑制上观察 NFAT2 的效果进一步评估。结果：我们发现 NFAT2 是在 Leydig 房间的占优势的 isoform。CsA 堵住了 Leydig 房间的导致 CORT 的 apoptosis。在 Leydig 房间的细胞内部的 Ca^(2+) 水平显著地在 CORT 处理以后被增加。CORT 在原子核增加了 NFAT2 的水平并且减少它在细胞质的水平。CsA 在 Leydig 房间堵住了 NFAT2 的导致 CORT 的原子 translocation。在老鼠 Leydig 房间的导致 CORT 的 apoptosis 和 FasL 表示被提高由过去 NFAT2 的表示并且由 CsA 反对了。结论：NFAT2 在导致 CORT 的 Leydig 房间 apoptosis 被激活。在表示和 NFAT2 激活的抑制上的 NFAT2 的效果建议 NFAT2 可以潜在地通过 FasL 的起来规定在导致 CORT 的 Leydig 房间 apoptosis 起一个 pro-apoptotic 作用。; Wei-Ran Chai Qian Wang Hui-Bao Gao; 关键词：NFAT 皮质酮

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国家自然科学基金(30570681)

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