国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-26-13)
- 作品数：9 被引量：59H指数：6
- 相关作者：古勤生彭斌刘珊珊吴会杰施艳更多>>
- 相关机构：中国农业科学院郑州果树研究所河南农业大学河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金NSFC-河南人才培养联合基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 瓜类新病毒病害(三):甜瓜黄化斑点病被引量：7
- 2012年
- 介绍了我国最新发现的瓜类病毒病害——甜瓜黄化斑点病(图版见彩色插页第26页)的症状、分布、病原及基因组、寄主范围、传播途径、病毒检测及防治等内容。
- 古勤生吴会杰彭斌刘丽锋
- 关键词：瓜类
- 瓜类褪绿黄化病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备被引量：3
- 2013年
- 根据已报道的瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR方法从感病甜瓜中扩增得到长度为753 bp的CP基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-3上,获得重组载体pGexCP,在大肠杆菌BL21菌株中诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了CCYV外壳蛋白的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,当CP蛋白浓度为2.5μg/mL时,血清效价高达5.12×105。Western blot分析表明制备的抗体检测CCYV侵染的甜瓜叶片得到特异性的条带,表明该抗体的特异性较好。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甜瓜病样的检测。本试验为CCYV的快速检测提供了重要的研究材料。
- 施艳袁媛孙虎古勤生刘珊珊王振跃
- 关键词：外壳蛋白基因原核表达抗血清
- 济南地区倒瓤西瓜CGMMV的检测被引量：4
- 2012年
- 山东省济南地区2011年嫁接西瓜严重发生倒瓤,通过实地调查,初步判断为病毒侵染引起,经对采集的80份西瓜病样进行ELISA(Enzyme-Linked Immuno-Sorbnent Assay)和RT-PCR(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)验证。结果表明:经ELISA检测80份西瓜样本中有70份感染了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaicvirus,CGMMV),证明山东省济南地区嫁接西瓜严重发生倒瓤是由CGMMV引起的。
- 刘颖彭斌杨晓红李向东古勤生
- 关键词：西瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒ELISART-PCR
- 我国嫁接西瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒的防控对策被引量：11
- 2013年
- 根据近几年来对于西瓜病毒病害的跟踪监测,可以推测,几乎所有嫁接西瓜产区都存在黄瓜绿斑驳花叶病毒（CGMMV）发生或暴发的隐患。如何有效防控？韩国种子协会的预防要领值得我们借鉴。
- 古勤生彭斌刘珊珊李俊香申顺善吴会杰
- 关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒嫁接西瓜防控对策病毒病害种子协会产区
- 甜瓜叶片再生体系的研究
- 为了建立高效稳定的甜瓜叶片再生体系，利用田间和无菌条件下培养的材料分别诱导不定芽，探讨了不同植物生长调节剂组合、外植体切割方式、暗培养时间等条件对再生的影响，为利用转基因技术改良甜瓜品质和抗性提供更多的受体材料。
- 刘丽锋张俊红叶志彪古勤生
- 关键词：甜瓜叶片
- 瓜类新病毒病害(二):甜瓜坏死斑点病被引量：7
- 2011年
- 介绍了我国最新发现的瓜类病毒病害——甜瓜坏死斑点病的症状、分布、病原及基因组、寄主范围、传播途径、防治措施,抗性和分子生物学研究等方面的内容。
- 古勤生吴会杰彭斌刘丽锋贾金磊刘珊珊
- 关键词：瓜类
- 新疆、甘肃和河南部分地区甜瓜瓜类蚜传黄化病毒分子变异初步分析被引量：9
- 2017年
- 从新疆鄯善县、甘肃瓜州县和河南通许县采集表现瓜类蚜传黄化病毒(Cucurbit aphid-borne yellows virus,CABYV)症状的甜瓜叶片样品63份,利用反转录PCR(RT-PCR)检测,从阳性样品中选取25个分离物扩增出1.4 kb的片段,并对其序列进行分析。结果表明:63份样品中,36份为CABYV阳性;获得的序列包括部分3′端的依赖RNA的RNA聚合酶(RdRp)基因、非编码区(NCR)和全长外壳蛋白(CP)基因。随机选取25个分离物的CP基因与GenBank中的序列进行比对,其序列相似性为93.2%~100%。通许分离物间序列相似性为98.8%~99.8%,瓜州分离物间序列相似性为98.2%~100%,鄯善分离物间序列相似性为99.2%~100%,组内表现出极高的同源性。基于其部分RdRp基因、NCR及CP基因序列构建的系统进化树表明:25个CABYV分离物与中国及周边地区(泰国、韩国等)的分离物聚为一簇,而与欧洲地区分离物距离较远,说明了该病毒分子变异与分离物的地理分布有关。
- 吴洋刘莉铭彭斌古勤生
- 关键词：甜瓜分子多样性
- 海南省和河南省发生甜瓜褪绿黄化病的分子鉴定被引量：18
- 2013年
- 【目的】为了探明引起海南省和河南省甜瓜褪绿黄化的病因,【方法】提取从海南三亚和河南郑州采集的甜瓜叶片的RNA,用CCYV特异性引物进行外壳蛋白基因的克隆、测序,并与GenBank中同属或同种病毒的cp基因核苷酸序列构建系统进化树。【结果】结果显示,RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,所得条带在880 bp左右,与预期的一致;构建cp基因的系统进化树发现,样品与瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)的亲缘关系很近,属于同一个分枝,而与该病毒同属不同种的南瓜黄矮失调病毒(Cucurbit yellow stunting disorder virus,CYSDV)和大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus,BYDV)的亲缘关系较远,属于不同的分枝。【结论】证实海南省和河南省甜瓜褪绿黄化病是由瓜类褪绿黄化病毒引起。
- 刘珊珊彭斌吴会杰柳唐镜孔祥义施艳古勤生
- 关键词：甜瓜外壳蛋白基因黄化
- 瓜类褪绿黄化病毒p22基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备被引量：5
- 2013年
- 以被瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)侵染的甜瓜叶片为供试材料,采用RT-PCR方法克隆其P22蛋白基因,并将其连接到原核表达载体pGex-4T-3上,PCR验证及克隆测序确定开放阅读框的正确性。将重组载体pGexp22转化大肠杆菌BL21菌株,诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,p22基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达。以表达的蛋白作为抗原,免疫家兔,制备了CCYV P22的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,血清效价高达1.28×105。Western blot检测甜瓜叶片,结果表明抗血清能够特异性地检测CCYV侵染的甜瓜叶片中的CCYV P22蛋白。
- 施艳王振跃袁媛刘珊珊孙虎古勤生
- 关键词：甜瓜P22原核表达抗血清
- 瓜类新病毒病害(一):瓜类褪绿黄化病被引量：16
- 2011年
- 介绍了我国最新发现的瓜类病毒病害—瓜类褪绿黄化病的症状、分布、病害发现历史,病原、寄主范围、传播途径和综合防治措施,并指出未来针对该病害需要开展的研究内容。
- 古勤生彭斌刘珊珊刘英华吴会杰刘丽峰
- 关键词：瓜类
