贵州省农业科技攻关项目(NY[2011-3105])
- 作品数：16 被引量：84H指数：6
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- 相关机构：贵州大学贵州省动物疫病研究室贵州省动物疫病预防控制中心更多>>
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- 应用荧光定量PCR筛选绵羊肺炎支原体最适生长培养基被引量：3
- 2013年
- 为筛选绵羊肺炎支原体(Mo)最适生长培养基,针对Mo 16S rRNA基因设计特异性引物FQs/FQa,建立可定量检测Mo 16S rRNA基因FQ-PCR方法,通过检测不同培养时间各Mo培养液中Mo Y98株核酸含量,比较Mo于不同培养基中培养特性,以筛选Mo最适生长培养基。结果,以Broth-ame与TSB1培养Mo 7,10和14 d时Mo核酸检测值较高,较Frey-ame、PPLO-ame更适合Mo生长。本研究为后续Mo生物学特性分析奠定了基础。
- 张双翔程振涛周碧君文明王开功李泽民覃岚崔亚兰王慧
- 关键词：荧光定量PCR绵羊肺炎支原体
- 山羊痘重组沙门菌S7207/pVAX1-P32疫苗株的安全性及稳定性研究被引量：1
- 2012年
- 对山羊痘重组沙门菌S7207/pVAX1-P32疫苗株的安全性、稳定性及S7207/pVAX1-P32在动物体内散布规律进行测定。选择60只小鼠,随机分为4组,1组为生理盐水对照组,2组～4组为试验组,用上述沙门菌株S7207以108、109、1010cfu的剂量口服免疫小鼠,2周后相同剂量加强免疫,通过在不同时间段称量小鼠体重显示,试验组小鼠生长情况与对照组无明显差异,不同组别小鼠大体及内脏器官也未发生病变,说明S7207/pVAX1-P32安全性良好;通过PCR方法检测P32基因在体内各组织分布情况,在7d后体内各组织中都检测出目的基因,说明DNA在小鼠体内广泛分布。体外传代含pVAX1-P32和不含pVAX1-P32菌株,含质粒菌株经60代传代后含重组质粒菌的比例在50%以上,传代至120代时仍在10%以上,而不含质粒菌株明显低于含质粒菌株,结果证明含质粒菌株稳定性较好。研究结果提示,利用减毒沙门菌为载体传递S7207/pVAX1-P32疫苗具有良好的安全性和稳定性,其质粒在小鼠体内分布广泛,对未来口服疫苗的使用提供了参考依据。
- 朱时杰周碧君文明王开功程振涛殷俊磊
- 关键词：山羊痘安全性稳定性
- 绵羊肺炎支原体贵州株16SrRNA基因的克隆与序列分析
- ：通过绵羊肺炎支原体(Mo)贵州分离株的遗传进化特征分析,为贵州省采取针对性措施防控CCPP爆发流行提供科学依据. 材料方法：采用分子克隆技术对所分离支原体进行分子鉴定,从Mo贵州分离TZ株与WN株的DNA中扩增1...
- 周碧君程振涛肖超能文明王开功张双翔陈军义江楠崔亚兰
- 关键词：绵羊肺炎支原体核糖核酸基因克隆
- 贵州省山羊流产主要病原菌分离鉴定及致病性试验被引量：2
- 2013年
- 研究了贵州省山羊流产主要病原菌的组成、分布和致病情况,为贵州省山羊流产细菌的防控提供理论参考。对贵州省6个地(州、市)10个规模养羊场91只流产山羊的胎儿、子宫与母羊的阴道棉拭子进行细菌样本的采集并分离,通过革兰氏染色和生化试验鉴定,并对山羊阴道棉拭子中分离鉴定的4种主要优势菌株作小白鼠致病性试验。在贵州省山羊生殖系统中共分离到13种(科、属)细菌共计159株,其中在流产山羊中分离到的细菌种类显著多于健康山羊;4种主要优势菌株对小鼠均存在一定致病性,对小鼠致死率高低依次为溶血巴氏杆菌、化脓链球菌、腐生葡萄球菌和大肠埃希氏菌,分别为83.3%、50%、8.3%和8.3%。
- 罗意周碧君李涛张元鑫张华王开功文明程振涛李世静
- 关键词：山羊流产主要病原菌致病性试验
- 山羊传染性胸膜肺炎并发流产病例诊断
- 为对贵州省某规模养羊场临床表现咳嗽、消瘦及流产症状病死山羊进行病因确定性诊断,采用分子生物学方法对病死山羊进行山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)病原与山羊流产衣原体核酸检测。结果,从病死母羊肺组织中检测到绵羊肺炎支原体(Mo...
- 王慧王开功张双翔周碧君文明程振涛龙冲冲尹鑫罗意
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎流产病例
- 文献传递
- 丝状支原体山羊亚种贵州株的分离与鉴定被引量：6
- 2013年
- 为确定贵州毕节地区某养殖场疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)的病原,通过分子生物学方法对疑似CCPP山羊肺组织进行病原核酸检测,并进行病原分离及初步鉴定。结果显示:从疑似CCPP山羊肺组织中检测到丝状支原体山羊亚种(Mmc)核酸,并从肺组织中分离到具有典型煎蛋样菌落的菌株,命名为GZ-DF;分离菌株进行生化试验,结果与参考株PG3相符;同源性分析及进化树比较结果显示,分离株GZ-DF与Mmc参考株PG3(Mmc PG3)、丝状支原体大菌落型(MmmLC Y-goat)、丝状支原体小菌落型(MmmSC PG1)同源性高达99%,且与MmcPG3共同形成基因树的一个分支;动物回归试验成功复制出CCPP的典型症状和病例剖解变化。结果表明:本次疫情应为Mmc感染羊群所致,研究结果为疫情控制提供方向。
- 王慧周碧君张双翔罗成波贺纛孔令萍文明尹鑫程振涛王开功
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎丝状支原体山羊亚种分子生物学鉴定
- 绵羊肺炎支原体DnaK B细胞抗原表位预测及其蛋白结构分析被引量：3
- 2014年
- 以绵羊肺炎支原体(Mo)热休克蛋白Hsp70(DnaK蛋白)氨基酸序列为基础,运用DNAStar软件和在线服务器等生物信息学分析工具,在同源性分析的基础上,通过Jameson-Wolf法、Kyte-Doolittle法、Emini法、Karplus-Schulz法及Welling法分别预测其抗原指数、亲水性、柔韧性、表面可极性等参数,综合分析、预测了该蛋白的B细胞抗原表位,并进行了蛋白的二级结构预测和3D结构模拟。结果表明,Mo贵州分离株的Hsp70蛋白与其它可致羊发病支原体的Hsp70蛋白同源性较低,说明该蛋白具有良好的特异性;Mo Hsp70蛋白整体抗原性较好,同时呈现较规则的空间结构,其中以C末端较稳定,区域也最大(第394-598区段),为优势B细胞抗原表位区域。
- 王慧罗成波贺纛孔令萍周碧君文明程振涛王开功
- 关键词：绵羊肺炎支原体蛋白结构B细胞抗原表位
- 绵羊肺炎支原体热休克蛋白Hsp70的生物信息学分析被引量：6
- 2014年
- 本试验旨在了解绵羊肺炎支原体(Mo)标准Y98株Hsp70基因生物学特性,以期利用该基因表达蛋白建立ELISA方法。本研究应用DNAStar、Bioedit 7.0、ClustalX 3.0、Mega 4.0软件与Protparam、TMpred、IEDB在线工具对Hsp70蛋白的理化参数、跨膜结构、信号肽、二级结构、B细胞表位及与其他支原体Hsp70蛋白进化关系进行了比对分析。结果显示,Mo Y98株Hsp70蛋白理论分子质量为66.14ku,pI值为5.08,为稳定的可溶性蛋白。该蛋白无跨膜结构,不分泌信号肽,存在多处具有免疫原性的肽段,具有形成抗原表位的优势结构,是建立免疫学方法较为理想的靶蛋白。与多种支原体Hsp70基因进化关系分析结果表明,该蛋白与Mo进化关系最近,与丝状支原体簇成员亲缘关系较远,为进一步分析Mo致病机理提供了理论依据。
- 张双翔程振涛唐宇冉隆仲李涛周碧君文明王开功王慧
- 关键词：绵羊肺炎支原体HSP70基因生物信息学
- 山羊传染性胸膜肺炎继发流产病例的诊断被引量：1
- 2012年
- 为对贵州省某规模养羊场临床表现咳嗽、消瘦及流产症状病死山羊进行病因确定性诊断,采用分子生物学方法对病死山羊进行山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)病原与山羊流产衣原体核酸检测。结果表明,从病死母羊肺组织中检测到绵羊肺炎支原体(Mo)核酸,未检测到丝状支原体山羊亚种(Mmc)核酸,病死母羊子宫组织中山羊流产衣原体检测均为阴性,病例确诊为CCPP。序列分析显示Mo感染可能与流产症状有关。研究结果将为贵州省预控此类疫病流行暴发提供技术支持。
- 王慧王开功张双翔周碧君文明程振涛龙冲冲尹鑫罗意
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎流产病例
- 正安县山羊主要疫病血清抗体检测报告被引量：1
- 2012年
- 为了解正安县山羊主要疫病的发展趋势,通过虎红平板凝集试验、正向间接血凝试验、酶联免疫吸附试验等方法对正安县引进山羊进行布鲁氏杆菌病、O型口蹄疫、AsiaⅠ型口蹄疫、山羊传染性胸膜肺炎、山羊痘等主要疫病血清抗体的检测。结果表明,O型口蹄疫、AsiaⅠ型口蹄疫和山羊痘免疫抗体阳性率分别为79.42%、81.18%和99.58%,未免疫的布鲁氏杆菌病、羊传染性胸膜肺炎的丝状支原体山羊亚种和绵羊肺炎支原体未免疫抗体阳性率分别为0%、0%和3.81%。监测结果为山羊健康的引进、培育和扩繁提供了一些基础数据,对指导养羊生产有一定的意义。
- 朱小飞周碧君程振涛文明王开功崔亚兰罗意
- 关键词：布鲁氏杆菌病羊传染性胸膜肺炎山羊痘血清学调查
