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Rheb过表达在白血病细胞株HL-60和K562中的作用被引量：1: 2013年; mTOR信号通路是细胞内重要的生命活动枢纽,它通过抑制细胞凋亡,促进细胞增殖来调控细胞生命活动。Rheb可以激活mTOR信号通路,进而参与多种肿瘤的发生发展。本研究以髓系白血病细胞株为研究对象,探讨Rheb在HL-60和K562中的作用及相关机制。本研究利用逆转录病毒技术使髓系白血病细胞株HL-60和K562过表达Rheb;利用Western blot和Real-Time PCR分别检测HL-60和K562细胞中Rheb的蛋白表达水平及mRNA表达水平;利用CCK-8法检测细胞活力;利用Annexin V-PE和7-AAD双染检测细胞凋亡。结果表明:成功构建了Rheb过表达的HL-60和K562细胞株,并发现Rheb过表达可以促进细胞生长;进一步研究发现,Rheb过表达加快细胞进入G2/M期(P<0.01),但不影响细胞凋亡。结论:Rheb通过加快细胞周期进程促进HL-60和K562细胞增殖。; 徐乔竹汪晓敏王放放高亚男张英驰鞠振宇程涛袁卫平刘汉芝; 关键词：RHEB AML HL-60 K562

PI3K/AKT信号通路在急性白血病中调控机制的初步研究被引量：10: 2012年; 本研究探讨PI3K/AKT通路中的PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR、FOXO1基因在急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中与正常人中表达的差异,以期查明PI3K/AKT通路在白血病中是否存在通路失调。随机收集16例骨髓标本,其中白血病12例(AML 6例,ALL 6例),正常骨髓标本4例。用实时定量RT-PCR方法检测PI3K/AKT通路中的PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR、FOXO1基因的表达变化;以管家基因GAPDH为内参,按2-△△Ct法计算目的基因相对表达量。结果表明:PTEN、mTOR、RICTOR在AML、ALL中总体呈低表达趋势,PTEN在12例标本中有10例低表达,mTOR在12例标本中9例低表达,RICTOR在12例标本中7例低表达;FOXO1,CCND1在AML、ALL中则呈高表达趋势,FOXO1在12例标本中有9例高表达,CCND1在12例标本中7例高表达。结论:PI3K/AKT信号通路基因在白血病细胞中被激活。; 王伟丽张英弛曾慧敏华春兰魏蔚许静竺晓凡程涛袁卫平; 关键词：PI3K/AKT AML ALL 白血病

细胞周期抑制剂PD0332991对小鼠造血干／祖细胞生物学活性的影响被引量：1: 2014年; 目的探讨细胞周期抑制剂PD0332991（C24H29N702）对造血干／祖细胞（HSPC）生物学行为的影响。方法利用多抗体标记，再分别用Hoechst 33342染色和FITC-AnnexinW7-AAD标记流式细胞术检测PD0332991作用前后小鼠骨髓造血干细胞（HSC，Lin-C-kit＋Sca-1＋表型细胞）及造血祖细胞（HPc，Lin-C-kit’细胞）的周期分布及细胞凋亡率；利用实时荧光定量PCR法分析PD0332991作用后HSC细胞周期相关基因、凋亡相关基因及自我更新相关基因mRNA表达水平；利用极限稀释培养法检测PD0332991作用前后HSC自我扩增水平的变化；用半固体培养法观察PD0332991对小鼠正常HPC集落形成能力的影响。结果与未处理组相比，PD0332991处理后小鼠骨髓HSC的G。期细胞明显增多，由76．3％增加至89．5％（P〈0．05），S、GYM期明显减少，由20．5％降低至7．3％（P〈0．05）；HPC的G。期细胞也明显增多，由74％增加至87．4％（P〈0．05），S、G：／M期细胞明显减少，由25．4％降低至11．6％（P〈0．05）。PD033299处理的小鼠骨髓HSPC早期凋亡率均为7％左右，与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。小鼠骨髓HSC经PD0332991处理后，细胞周期相关基因CDKl、CyclinA2、CyclinF、p18、p19、p27表达水平与对照组相比分别降低了58．8％、66．4％、56．3％、62．2％、32．3％和36．5％，CDK7表达上调27．3％（P〈0．05），凋亡相关基因及自我扩增相关基因表达均无明显变化。与对照组相比，PD0332991处理过的小鼠骨髓HSC与自我扩增相关的鹅卵石样区域形成细胞出现频率明显下降、HPC的造血集落形成能力下降。结论PD0332991可明显阻滞正常小鼠HSPC的细胞周期进程，抑制其自我扩增，但对其凋亡没有明显影响。; 纪庆祁瑞哲张丽艳张宇许静袁卫平程涛高瀛岱; 关键词：造血干细胞细胞周期抑制剂细胞周期

Interleukin-12 supports in vitro self-renewal of long-term hematopoietic stem cells: 2019年; Hematopoietic stem cells(HSCs)self-renew or differentiate through division.Cytokines are essential for inducing HSC division,but the optimal cytokine combination to control self-renewal of HSC in vitro remains unclear.In this study,we compared the effects of interleukin-12(IL-12)and thrombopoietin(TPO)in combination with stem cell factor(SCF)on in vitro self-renewal of HSCs.Single-cell assays were used to overcome the heterogeneity issue of HSCs,and serum-free conditions were newly established to permit reproduction of data.In single-cell cultures,CD150^(+)CD48^(-)CD41^(-)CD34^(-)c-Kit^(+)Sca-1^(+)lineage^(-)SCs divided significantly more slowly in the presence of SCF+IL-12 compared with cells in the presence of SCF+TPO.Serial transplantation of cells from bulk and clonal cultures revealed that TPO was more effective than IL-12 at supporting in vitro self-renewal of short-term(<6 months)HSCs,resulting in a monophasic reconstitution wave formation,whereas IL-12 was more effective than TPO at supporting the in vitro selfrenewal of long-term(>6 months)HSCs,resulting in a biphasic reconstitution wave formation.The control of division rate in HSCs appeared to be crucial for preventing the loss of self-renewal potential from their in vitro culture.; Shanshan ZhangMaiko MoritaZhao WangJun OoeharaSen ZhangMiner XieHaitao BaiWenying YuXiaofang WangFang DongJinhong WangShihui MaSatoshi YamazakiHideo Ema; 关键词：INTERLEUKIN-12 SELF-RENEWAL

新一代测序技术对白血病基因组研究的推动及面临的挑战: 2012年; 自人类第1例白血病患者白血病细胞全基因组测序完成两年以来，研究者相继发现了大量与白血病及肿瘤相关的变异基因。这不但可促进白血病及其他各类恶性肿瘤发病机制的研究，也将极大推动白血病及其他恶性肿瘤诊断及个性化治疗的发展。我们就新一代测序技术对白血病发病机制研究的推动及其面临的挑战作一综述。; 周全全程涛; 关键词：白血病细胞全基因组测序测序技术个性化治疗变异基因

范可尼贫血肿瘤相关通路的基因集富集分析被引量：2: 2012年; 目的探讨范可尼贫血（FA）患者高肿瘤易感性的潜在机制与原因。方法采用基因集富集分析（Genesetenrichmentanalysis，GSEA）对NCBIGEO数据库中21例FA患者和11例健康志愿者的骨髓单个核细胞基因表达谱进行比较研究，分析其在肿瘤相关通路及肿瘤相关基因集中的富集特征与核心富集基因。然后利用对基因本体学（Geneontology）生物过程和结构基因组相关基因集的富集分析，进一步阐释了该病高肿瘤易感性的潜在原因。结果FA患者在抗Bcl-2抑制剂相关基因集和成纤维细胞生长因子、胰岛素及胰岛素样生长因子（IGF）信号通路介导的肿瘤基因集中有显著富集特征。其中核心富集基因D4S234E、SST、FGF、IGF、FGFR和IGFBP等的高表达与促进肿瘤形成及耐药相关。在生物学过程上，FA患者细胞外分子的生物合成和结构与对照组具有显著差异。在结构基因组相关分析中发现，包含上述IGF2在内的转录起始位点附近具有模体RRCAGGTGNCV及CCT-NTMAGA的基因集具有富集特征，其中前者与肿瘤发生的关键转录因子TCF3匹配。结论FA患者的高肿瘤易感性与其体内在关键转录因子介导下的肿瘤相关细胞因子、激素等内环境变化密切相关。; 周全全王晓娟竺晓凡袁卫平程涛; 关键词：范可尼贫血肿瘤易感性基因表达谱

成体干细胞衰老的研究进展: 2010年; 随着社会的进步，人民生活水平和医疗水平的提高，长寿已经在全世界成为一种普遍的现象。这对社会进步、经济发展和医疗服务等领域都产生了深远的影响。; 鞠振宇张俊玲; 关键词：细胞衰老成体社会进步经济发展生活水

p18^INK4C 调控小鼠T细胞的发育及功能被引量：1: 2014年; p18INK4C属于细胞周期蛋白激酶抑制剂,其突变或缺失与某些肿瘤的发生密切相关,如T细胞白血病,但目前关于p18调控T细胞发育及功能的研究还鲜有报道,其调控机制仍不明确.本研究利用p18基因敲除(p18KO)小鼠,系统地研究了胸腺中T细胞的早期发育及成熟T细胞的增殖和活化功能,并利用逆转录病毒的方法在Lin?造血干祖细胞上过表达p18,移植4个月后检测其对T细胞的影响.结果表明,p18的缺失对胸腺T细胞的早期发育影响不明显,但随着p18KO小鼠周龄的增加会促进CD4+CD8+双阳性T细胞的数量,此外,p18还通过影响CD3+成熟T细胞的细胞周期进程及IFN-?,GATA3,Tbx21和Foxp3等的表达增强脾脏T细胞的增殖和活化;进一步在造血干祖细胞上过表达p18后会影响T细胞的发育和成熟,进而纠正T细胞在数量上的异常.本研究阐释了p18在T细胞早期发育及后期活化中的调控机制,并证实可通过在干祖细胞水平改变p18的表达进而影响T细胞的分化,这对p18调控T细胞功能异常及参与T细胞白血病的发生提供了新的理论依据和重要的研究价值.; 郝莎董芳王娅婕程辉袁卫平程涛; 关键词：酶抑制剂 T细胞细胞周期

NKT细胞与移植物抗宿主病被引量：3: 2013年; NKT细胞(自然杀伤T细胞)是一种免疫T细胞,同时表达传统T细胞和自然杀伤细胞的表面标志,经特异抗原刺激后能够分泌大量细胞因子,调节Th1/Th2平衡,在预防和治疗移植物抗宿主病方面发挥重要作用。与此同时,NKT细胞能够发挥抗肿瘤和抗感染效应,进而加大了NKT细胞在异基因造血干细胞移植方面的应用,帮助患者重建移植后免疫。因此,进一步了解NKT细胞生物学和免疫学特征及其具体免疫调节机制,对运用NKT细胞防治移植中出现移植物抗宿主病有重要的指导意义。本文就NKT细胞的生物学特征、分类、分化发育,免疫活化及NKT细胞与GVHD(包括机制)、NKT细胞与肿瘤、NKT细胞与感染和NKT细胞与临床GVHD研究进行综述。; 赵蕾郝莎袁卫平程涛; 关键词：自然杀伤T细胞移植物抗宿主病细胞因子异基因造血干细胞移植

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国家重点基础研究发展计划(2011CB964801)

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