镇江市科技计划项目(SH2006019)
- 作品数：8 被引量：53H指数：4
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- 相关机构：江苏大学附属医院浙江大学江苏大学附属人民医院更多>>
- 发文基金：镇江市科技计划项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大肠癌组织畸胎瘤衍生生长因子1蛋白表达及临床意义被引量：15
- 2007年
- 畸胎瘤衍生生长因子1（teratocarcinoma-derived growth factor-1，TDGF1）基因是表皮生长因子家族重要成员之一。研究发现，TDGF1基因在许多实体瘤中过度表达，而正常组织表达极低或者不表达。TDGF1基因与某些肿瘤如乳腺癌侵袭有关。但国内目前尚无此项研究，也不清楚TDGF1基因与大肠癌细胞侵袭转移的关系。本研究采用免疫组化方法，
- 范钰张尤历吴莺张宇川王崇强郑树
- 关键词：畸胎瘤生长因子1大肠癌组织衍生生长因子生长因子家族
- 榄香烯乳对胃癌细胞人端粒酶反转录酶及其启动子的影响被引量：13
- 2006年
- 目的:观察榄香烯乳对胃癌细胞株SGC7901人端粒酶反转录酶(hTERT)表达及其启动子的影响,以深入了解榄香烯乳的抗癌机制。方法:以榄香烯乳处理胃癌细胞,分别采用实时定量PCR和免疫荧光标记法检测癌细胞hTERT mRNA和蛋白水平的表达。采用脂质体转染法将携带hTERT启动子和报告基因的质粒转染至胃癌细胞株SGC7901细胞中,2 h后加入不同浓度的榄香烯乳,孵育48 h后,分别检测其报告基因萤虫素酶活性。结果:榄香烯乳处理后,胃癌SGC7901细胞hTERT mRNA和蛋白水平呈浓度和时间依赖性下调。榄香烯乳处理组萤虫素酶活性下降,且呈浓度依赖性。结论:榄香烯乳可能通过下调hTERT启动子活性,抑制hTERT表达,从而抑制胃癌细胞端粒酶活性。
- 范钰张尤历李华
- 关键词：榄香烯乳胃肿瘤端粒酶人端粒酶反转录酶启动子
- RNAi沉默Cripto基因对结肠癌细胞血管内皮生长因子的抑制被引量：13
- 2008年
- 目的:研究Cripto基因对结肠癌细胞血管内皮生长因子的影响。方法:设计合成针对Cripto基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染结肠癌LS-174T细胞。细胞分4组:空载对照组(对照组)和不同浓度(3.125、6.25和12.5 nmol/L)的siRNA组。分别于转染24、48、72 h后收集细胞,以实时定量PCR检测结肠癌细胞CriptomRNA,分别采用Northern blotting和免疫荧光标记法检测癌细胞VEGF mRNA和蛋白表达。分别收集转染72 h的12.5 nmol/L组和对照组细胞,接种于裸鼠背部。30 d后处死裸鼠,收集裸鼠肿瘤组织,对组织VEGF进行免疫组化染色,计算染色平均强度。结果:实时定量PCR检测显示,转染组CriptomRNA被有效地抑制,且呈浓度和时间依赖性。转染组细胞VEGF蛋白和mRNA明显低于对照组。裸鼠肿瘤免疫组化分析显示,转染组VEGF平均染色强度明显低于对照组。结论:Cripto基因参与了结肠癌组织血管生成的调控。采用siRNA下调Cripto基因表达,可抑制结肠癌组织血管生成。
- 范钰张尤历李华许则丰郑树
- 关键词：结肠肿瘤CRIPTOSIRNA血管内皮生长因子
- RNAi沉默STAT3基因对结肠癌HCT116细胞侵袭的调控被引量：2
- 2007年
- 目的:观察RNA干扰沉默STAT3基因对结肠癌细胞侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法:应用STAT3小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理人结肠癌细胞系HCT116后,采用RT-PCR检测STAT3 mRNA表达,软琼脂集落培养试验检测锚着不依赖性增殖,Boyden小室模型试验检测癌细胞的侵袭性,琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测癌细胞失巢凋亡。结果:STAT3 siRNA可有效抑制结肠癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关。琼脂糖凝胶电泳和TUNEL结果显示,STAT3 siRNA转染可诱导结肠癌细胞失巢凋亡,且与浓度相关。结论:STAT3 siRNA可抑制结肠癌细胞的恶性侵袭,其机制与诱导失巢凋亡有关。
- 范钰张尤历张字川吴莺许则丰万毅刚
- 关键词：小干扰RNA失巢凋亡
- 核因子-κB亚单位p65 siRNA对胃癌细胞端粒酶活性的影响
- 2007年
- 目的:采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默胃癌细胞核因子-kappa B(nuclear factor-κB,NF-κB)亚单位p65后,观察其对细胞端粒酶活性的影响。方法:采用p65小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染胃癌细胞后,分别采用western blot和凝胶迟滞电泳检测胃癌细胞p65蛋白水平和NF-κB活性,采用MTT检测胃癌细胞增殖,采用TRAP-ELISA方法检测对胃癌细胞端粒酶活性。结果:转染组细胞p65蛋白和NF-κB活性明显被抑制,且成浓度依赖性。转染组胃癌细胞增殖明显受到抑制,呈浓度依赖性。TRAP-ELISA检测显示,转染组胃癌细胞端粒酶活性明显被抑制,且呈浓度依赖性。结论:针对NF-κB重要亚单位的p65 siRNA可抑制胃癌细胞端粒酶活性。
- 张尤历范钰吴莺张宇川魏金文程兆明何亚龙王银环李华
- 关键词：小干扰RNA核因子P65端粒酶
- siRNA敲除STAT3基因对结肠癌HCT116细胞侵袭的抑制被引量：11
- 2007年
- 目的:了解RNA干扰沉默STAT3基因对结肠癌细胞侵袭的可能作用。方法:根据STAT3基因特点,设计合成STAT3小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),并转染人结肠癌细胞系HCT116后,采用RT-PCR检测STAT3mRNA,采用软琼脂集落培养试验检测癌细胞锚着不依赖性增殖,采用Boyden小室模型试验检测癌细胞的侵袭能力。结果:STAT3 siRNA可有效抑制结肠癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关。结论:STAT3 siRNA可抑制结肠癌细胞的侵袭。
- 范钰张尤历张宇川吴莺魏金文程兆明何亚龙王银环李华
- 关键词：结肠肿瘤STAT3SIRNA
- RNA干扰Bcl-xL基因表达对大肠癌细胞侵袭的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨Bcl-xL基因对大肠癌细胞侵袭的影响及可能机制。方法应用Bcl-xL基因小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)转染处理人大肠癌HT29细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测Bcl-xL基因mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力。另外,采用Western blot方法检测癌细胞尿激酶纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)蛋白变化。结果转染组癌细胞Bcl-xL基因mRNA和蛋白水平明显被抑制,且与时间和浓度相关。与对照组比较,转染组细胞所形成的软琼脂集落数和穿膜细胞数明显减少,且呈浓度依赖性。转染组癌细胞uPA蛋白水平明显下降,且与浓度相关。结论Bcl-xL基因在大肠癌细胞侵袭中起着重要的作用;以si RNA下调Bcl-xL基因表达,可明显抑制大肠癌细胞恶性侵袭,其机制可能与下调uPA表达有关。
- 庞利群范钰蒋鹏程俞力陈坚林庚金
- 关键词：大肠肿瘤尿激酶纤溶酶原激活物
- 促肝细胞再生磷酸酶-3基因对大肠癌细胞侵袭和失巢凋亡的调控被引量：1
- 2009年
- 目的探讨促肝细胞再生磷酸酶(phosphatase of regenerating liver cell-3,PRL-3)基因对大肠癌细胞侵袭的影响及可能机制。方法应用PRL-3基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理人大肠癌HCT116细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测PRL-3 mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力,采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测癌细胞失巢凋亡情况。结果转染组癌细胞PRL-3 mRNA和蛋白水平明显被抑制,且与时间和浓度相关。与对照组比较,转染组细胞所形成的软琼脂集落数和穿膜细胞数明显减少,且呈时间和浓度依赖性。琼脂糖凝胶电泳和TUNEL结果显示,转染组细胞出现明显的凋亡现象:凋亡指数增加,出现明显的DNA条带。结论PRL-3基因siRNA转染可明显抑制大肠癌细胞的锚着不依赖性增殖和恶性侵袭,其机制可能与诱导失巢凋亡有关。
- 范钰钟锡明陈坚林庚金
- 关键词：大肠肿瘤促肝细胞再生磷酸酶-3失巢凋亡
