国家自然科学基金(30400483)
- 作品数：14 被引量：63H指数：6
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- 无镁诱导惊厥后发育中皮层神经元γ-氨基丁酸A受体α1亚单位的变化
- 2009年
- 目的研究无镁诱导对惊厥后发育中皮层神经元表达γ-氨基丁酸A受体（GABAAR）α1亚单位的影响。方法以原代培养的大鼠大脑皮层神经元无镁诱导的反复惊厥样放电为模型，根据对培养6d皮层神经元的不同处理分为正常细胞外液组和无镁细胞外液组。神经元在上述2种液体中孵育3h，然后恢复正常DMEM培养液继续培养，1、7及12d后应用流式细胞技术、免疫细胞化学技术及实时荧光定量PCR测定2组大鼠皮层神经元GABAARα1亚单位表达的变化。结果应用流式细胞技术发现无镁损伤后12d时无镁组GABAARα1阳性细胞率较对照组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）；应用免疫细胞化学方法发现无镁损伤后7d、12d时实验组GABAARα1蛋白表达较对照组明显下降，差异有统计学意R（P〈0．05）；应用实时荧光定量PCR发现无镁损伤后1d时，无镁组GABAARα1mRNA表达较对照组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论早期无镁细胞外液处理可以诱导发育中大鼠皮层神经元GABAARα1表达的改变。
- 里健毛定安薄涛李杏芳易璐易著文
- 关键词：惊厥Γ-氨基丁酸A受体神经元发育
- 新生大鼠反复惊厥对脑内γ-氨基丁酸A受体α1和γ2亚单位表达的长期影响被引量：9
- 2006年
- 目的：研究新生期反复惊厥对大鼠脑内γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）A受体α1和γ2亚单位表达的长期影响，及成年期记忆功能和惊厥阈的长期改变。方法：将生后7天（postnatal 7d，P7）的SD大鼠随机分成两组，每组16只，惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次，每次持续30min，连续6d；对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。两组大鼠于出生后第61～65天（P61～P65）行Morris水迷宫实验，于P75时给予大鼠腹腔注射戊四唑测定大鼠的惊厥阈。随即处死大鼠，分别采用免疫组化方法和RT-PCR方法观察大鼠大脑皮层及海马GABAA受体（GABAAR）α1和γ2亚单位表达的变化。结果：惊厥组大鼠在P64的寻找水下平台时间[（82424±35622）ms]较对照组[（40712±29467）ms]明显延长（P=0．001）。在P65，惊厥组大鼠120s内穿越原平台位置次数[（1．2±0．9）次]较对照组[（3．1±1．3）次]明显减少（P〈0．001）。惊厥组大鼠注射戊四唑后发生惊厥的潜伏期[（1487±662）s]与对照组[（1841±648）s]比较差异无统计学意义（P=0．137）。惊厥组大鼠GABAARα1亚单位免疫化学累积光密度在顶叶及海马CA1、CA2和CA4区较对照组明显降低（P〈0．05）；惊厥组大鼠GABA。R12亚单位免疫化学累积光密度在额叶和海马CA4区较对照组明显降低（P〈0．05）。惊厥组大鼠大脑皮层GABAARγ2亚单位和海马区α1亚单位mRNA的表达较对照组明显减少（P〈0．05）。结论：新生大鼠反复惊厥可造成脑内GABA。Rα1和γ2亚单位表达的长期改变，这种改变可能与新生期反复惊厥导致的成年期记忆障碍相关。
- 薄涛陈勇毛定安李艳芳朱晓华
- 关键词：惊厥
- 川芎嗪注射液对大鼠惊厥性脑损伤海马白细胞介素-18、白细胞介素-1β表达的影响被引量：6
- 2006年
- 目的探讨发育期大鼠反复惊厥后海马IL-18、IL-1β表达及川芎嗪对其表达的影响。方法20日龄健康SD大鼠162只随机分为正常对照组、惊厥组及川芎嗪组。通过三氟乙醚反复吸入(连续6次,1次/d;对照组除外)制作发育期大鼠惊厥动物模型。其中川芎嗪组大鼠在每次惊厥后予腹腔注射川芎嗪(50 mg/kg),每12 h注射1次,连用6 d;惊厥组及对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水,连用6 d。RT-PCR方法检测各组反复惊厥后6 h,1、3、7 d海马IL-18、IL-1βmRNA表达,ELISA方法检测各时间点海马IL-18和IL-1β蛋白表达,观察脑含水量变化和光镜下海马区神经元病理改变。结果川芎嗪组各时间点海马IL-18、IL-1βmRNA及其蛋白表达较惊厥组显著下调(P<0.05,0.01),脑含水量(7 d除外)较惊厥组显著降低(P<0.01),海马神经元水肿、变性坏死较惊厥组明显减轻。结论川芎嗪能有效减轻惊厥性脑水肿和海马神经元病理损伤,其机制可能与抑制海马IL-18、IL-1β异常表达有关。
- 刘利群毛定安刘洁明薄涛熊洁
- 关键词：白细胞介素-18白细胞介素-1Β脑损伤脑发育海马惊厥川芎嗪
- 川芎嗪对发育期大鼠惊厥性脑损伤后海马caspase-1 mRNA表达的影响被引量：10
- 2006年
- 目的:探讨发育期大鼠反复惊厥后海马caspase 1 mRNA表达及川芎嗪对其表达的影响。方法:162只20日龄健康SD大鼠随机分为对照组、惊厥组及川芎嗪组。采用三氟乙醚反复吸入(连续6次,每日1次)方法制作发育期大鼠惊厥模型。逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测各组动物反复惊厥后6 h及1、3、7 d时海马组织caspase 1 mRNA的表达,同时观察脑含水量的变化和光镜下海马区神经元病理改变,并对脑损伤进行病理半定量积分。结果:川芎嗪干预组各时间点caspase 1 mRNA表达较惊厥组均显著下调,脑含水量(7 d时除外)和脑损伤积分显著降低(P均<0.01),海马神经元水肿、变性、坏死均明显减轻。结论:川芎嗪能有效减轻惊厥性脑水肿和海马神经元病理损伤,其机制可能与抑制海马caspase 1 mRNA异常表达有关。
- 刘利群毛定安薄涛白海涛熊洁
- 关键词：CASPASE-1脑损伤脑发育惊厥川芎嗪
- 川芎嗪对幼鼠惊厥性脑损伤脂质过氧化及抗氧化水平的影响被引量：12
- 2008年
- 目的:观察川芎嗪对幼鼠反复惊厥后海马丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(super oxidedis-mutase,SOD)活性、总抗氧化能力(total antioxidative capability,T-AOC)及脑含水量变化的影响。方法:162只20日龄健康Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组:对照组、惊厥组及川芎嗪干预组。通过三氟乙醚反复吸入(连续6次,qd)制作发育期大鼠惊厥动物模型。取海马组织匀浆,检测各组动物反复惊厥后6h,1,3,7d海马组织MDA含量,SOD活性、T-AOC水平变化,同时观察脑含水量变化和光镜下海马区神经元病理改变,并对脑损伤进行神经病理半定量积分。结果:川芎嗪干预组各时间点MDA含量均较惊厥组显著降低,SOD活性及T-AOC水平显著增高(P<0.01);脑含水量及脑损伤病理积分显著降低(P<0.01);海马神经元水肿、变性坏死明显减轻。结论:川芎嗪对幼鼠惊厥性脑损的保护机制可能与提高海马SOD活性及T-AOC水平、降低MDA含量有关。
- 刘利群毛定安薄涛熊洁
- 关键词：总抗氧化能力惊厥脑损伤川芎嗪
- 新生大鼠反复惊厥对脑内γ-氨基丁酸A受体α1和β2亚单位表达的短期影响被引量：6
- 2008年
- 目的γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)作为脑内最重要的抑制性受体在脑功能中起重要作用。该实验通过研究新生期反复惊厥对大鼠脑内GABAARα1和β2亚单位表达的短期影响,探讨其与发育中脑损伤的关系。方法生后7d的Sprague-Dawley大鼠随机分成两组,每组32只,惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次,每次持续30min,连续6d;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。分别于反复惊厥后1d和7d每组各处死16只大鼠,每个时间点分别采用免疫组化方法和Western blot方法观察大鼠大脑皮层及海马GABAARα1和β2亚单位表达的变化。结果反复惊厥后1d时,在惊厥组大鼠顶叶及海马齿状核、CA3和CA4区GABAARα1亚单位免疫化学累积光密度(AOD)较对照组明显增高(P<0.05),反复惊厥后7d时,在惊厥组大鼠顶叶及海马齿状核、CA1至CA4区GABAARα1亚单位免疫化学AOD较对照组明显增高(P<0.05),反复惊厥后1d和7d时,在惊厥组大鼠大脑皮层和海马区GABAARα1亚单位蛋白表达均明显高于对照组(P<0.01)。反复惊厥后7d时,在惊厥组大鼠海马CA1、CA2区GABAARβ2亚单位免疫化学AOD明显高于对照组(P<0.05),在丘脑区明显低于对照组(P<0.05),惊厥组大鼠海马区GABAARβ2亚单位蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。结论新生大鼠反复惊厥造成脑内GABAARα1和β2亚单位表达的短期改变,这种改变可能参与发育期惊厥性脑损伤。
- 薄涛王团美朱晓华里健李杏芳陈勇毛定安
- 关键词：惊厥
- 新生大鼠反复惊厥对脑内γ-氨基丁酸B1受体表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的发育期脑损伤能通过改变神经递质受体表达造成脑功能长期障碍，该研究通过观察新生期反复惊厥对大鼠脑内γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）B1受体（GABAB1R）表达的影响及成年期记忆功能和惊厥阈的长期改变，探讨其间可能存在的相关性。方法生后7d（P7）新生SD大鼠48只，随机分入惊厥组和对照组，每组24只，惊厥组仔鼠通过吸人三氟乙醚诱导惊厥，每天1次，连续6d。于反复惊厥结束后7d，每组各随机处死12只大鼠，应用RT—PCR及免疫组织化学方法检测大鼠大脑皮层及海马的GABAB1R mRNA及蛋白表达的近期改变。剩余大鼠于P61～P64行Morris水迷宫实验，检测大鼠的学习记忆功能。于P75时给予大鼠腹腔注射戊四唑测定大鼠的惊厥阈后，即刻处死大鼠取脑，用RT-PCR及免疫组织化学方法检测大鼠大脑皮层及海马的GABAB1R mRNA及蛋白表达的长期变化。结果①在反复惊厥后7d及P75时，惊厥组大鼠大脑皮层中GABAB1R mRNA及蛋白的表达较对照组均显著下调（P〈0．05）；②惊厥结束后7d时，惊厥组大鼠海马区中GABAB1R mRNA表达较对照组无明显改变（P〉0．05），但在齿状核GABAB1R蛋白表达明显降低（P〈0．001）；P75时惊厥组大鼠海马区GABAB1R mRNA及其在齿状核GABAB1R蛋白表达较对照组差异无显著性（P〉0．05）；③Moms水迷宫实验显示惊厥组大鼠在P64的寻找平台时间为98533．8±27205．4ms较正常对照组的46723．3±40666．5ms明显延长（t=3．66，P〈0．05）；④惊厥组大鼠注射戊四唑后发生惊厥的潜伏期为1415．1±428．5s与对照组1156．0±308．9s比较差异无显著性（t=1．70,P〉0．05）。结论新生期大鼠反复惊厥后，大脑皮层和海马GABAB1R表达持续减少，可能参与新生期惊厥后脑损伤的病理过程，与新生期反复惊厥导致的成年期记忆障碍相关。
- 薄涛毛定安殷群陈勇朱晓华李艳芳陈平洋
- 关键词：惊厥Γ-氨基丁酸受体新生大鼠
- 银杏叶提取物对幼年期大鼠惊厥后海马caspase-3FasL表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的研究幼年大鼠反复惊厥后海马组织caspase-3、FasL表达的变化及银杏叶提取物干预对其的影响。方法108只20日龄健康SD大鼠随机分为三组:正常对照组、惊厥组及银杏叶提取物干预组,通过三氟乙醚反复吸入(每天1次,连续6d),制作幼年大鼠惊厥动物模型。用免疫组化(SP)法检测各组动物反复惊厥结束后1、3、7d海马组织中caspase-3和FasL蛋白的表达,RT-PCR方法检测各时相点海马组织中caspase-3mRNA的表达。结果反复惊厥结束后1、3、7d海马组织均有caspase-3、FasL的表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。银杏叶提取物干预组海马各时间点caspase-3mRNA及caspase-3、FasL蛋白的表达均较惊厥组显著下调(P<0.05)。结论caspase-3、FasL参与了幼年期惊厥性脑损伤。银杏叶提取物对幼年期惊厥性脑损伤的保护机制,可能与抑制海马caspase-3、FasL的异常表达有关。
- 谭传梅毛定安薄涛刘利群李家财刘一岑
- 关键词：惊厥CASPASE-3银杏叶提取物
- 幼年大鼠惊厥性脑损伤白细胞介素-1β和白细胞介素-18的表达及川芎嗪干预的影响被引量：5
- 2007年
- 目的探讨幼年大鼠反复惊厥后IL-1β和IL-18的表达及川芎嗪对其表达的影响。方法144只20日龄健康SD大鼠随机分为3组：对照组、惊厥组及川芎嗪干预组。通过三氟乙醚反复吸入(连续6次,每天1次)制作幼鼠惊厥动物模型。RT-PCR方法检测各组动物反复惊厥后6 h、1 d、3 d、7 d脑组织中IL-1β、IL-18 mRNA的表达,ELISA方法检测各时相点脑组织中IL-1β和IL-18蛋白表达,同时观察脑含水量变化。结果川芎嗪干预组各时间点脑组织IL- 1β、IL-18 mRNA和IL-1β、IL-18蛋白的表达较惊厥组显著下调(P＜0．05或P＜0．01),脑含水量较惊厥组显著降低(P＜0．01)。结论川芎嗪对幼鼠惊厥性脑损伤具有保护作用,其机制可能与抑制IL-1β、IL-18 mRNA及其蛋白的异常表达有关。
- 毛定安刘利群薄涛刘洁明白海涛熊洁
- 关键词：脑损伤惊厥川芎嗪白细胞介素-1Β白细胞介素-18
- 川芎嗪对发育期大鼠惊厥性脑损伤海马ATP酶与脑含水量变化的影响被引量：5
- 2006年
- 目的观察发育期大鼠反复惊厥后海马ATP酶与脑含水量的动态变化及川芎嗪干预对其的影响。方法162只20日龄健康SD大鼠随机分为3组:对照组、惊厥组及川芎嗪干预组。通过三氟乙醚反复吸入(连续6次,每天1次)制作发育期大鼠惊厥动物模型。取海马组织匀浆,检测各组动物反复惊厥后6 h1、d、3 d、7 d海马组织中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性变化,同时观察脑含水量变化和光镜下海马区神经元病理改变。结果反复惊厥后6 h1、d3、d海马Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性均较对照组显著降低(P<0.01),伴随脑含水量显著升高(P<0.01),第7天三者与对照组相比较差异均无统计学意义(P>0.05)。脑含水量变化与海马Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性变化均呈显著负相关(前者r=-0.711,后者r=-0.673,P均<0.01)。川芎嗪干预组海马神经元水肿、变性坏死明显减轻,各时间点Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性较惊厥组显著升高(P<0.05或P<0.01),脑含水量显著降低(P<0.01)。结论Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性降低与惊厥性脑水肿和海马神经元迟发性损害密切相关,川芎嗪对发育期惊厥性脑损伤的保护作用可能与提高海马Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性有关。
- 刘利群毛定安薄涛白海涛莫双红熊洁
- 关键词：ATP酶脑含水量惊厥海马川芎嗪
