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层黏连蛋白和纤维连接蛋白对传代人晶状体上皮细胞生长和Cx43表达的影响被引量：3: 2006年; 目的:观察层黏连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)对传代培养的人晶状体上皮细胞(hLECs)形态学和连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:以层黏连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)处理培养皿表面,以倒置显微镜观察第3代培养的hLECs生长的形态,MTT法记录其生长曲线,免疫荧光法检测Cx43表达,比较两组表达阳性率的变化。结果:在层黏连蛋白处理组,传代细胞以典型的六角形上皮细胞形态为主,而纤维连接蛋白处理组则表现为以梭形的成纤维细胞为主。MTT实验显示,传代后4～7d纤维连接蛋白处理组细胞数多于层黏连蛋白处理组(P<0.05)。免疫荧光反应中,两组Cx43表达的阳性率有明显差别(23/28vs16/28,P<0.05)。结论:层黏连蛋白可以提供适宜hLECs保持上皮细胞状态的体外培养微环境,而纤维连接蛋白可以促进hLECs的增殖和分化。; 王欣玲张国刚于韬阎启昌张劲松; 关键词：层黏连蛋白纤连蛋白类晶状体连接蛋白

bFGF对人晶状体上皮细胞中FAK表达的影响被引量：5: 2007年; 目的:观察不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)引起体外培养的人晶状体上皮细胞迁移和黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)mRNA水平的动态变化。方法:体外培养的第3代人晶状体上皮细胞,建立细胞划痕损伤模型,经0,5,10,15μg/LbFGF作用8～16h后,电脑图像法测定细胞迁移距离,RT-PCR法检测0,1,4,8,16hFAK mRNA水平,免疫荧光法检测整合素β1和增殖细胞核抗原表达阳性率的变化。结果:与对照组比,5μg/L组细胞迁移距离和FAKmRNA表达显著增加(P<0.05);10μg/L组细胞整合素β1表达阳性率显著增加(P<0.05);15μg/L细胞迁移距离和FAKm RNA显著降低(P<0.05)。结论:bFGF引起人晶状体上皮细胞迁移距离和FAK mR-NA表达的变化。; 王欣玲于韬张国刚阎启昌张劲松; 关键词：碱性成纤维细胞生长因子上皮细胞晶状体黏着斑激酶

桑白皮抗病毒有效成分的提取分离及体外抗病毒活性研究被引量：40: 2005年; 目的研究桑白皮中化学成分的抗病毒作用。方法利用细胞病变方法进行体外抗病毒筛选试验。结果桑白皮中分离得到的化合物1和化合物3在体外有较好的抑制副流感病毒、流感病毒的致病作用;化合物1具有抗呼吸道合胞病毒作用,延缓腺病毒Ⅲ、HSV Ⅰ致病作用;化合物2和化合物5也有部分抗病毒作用;化合物4能抑制腺病毒Ⅲ、柯萨奇病毒B3 、HSV Ⅰ、副流感病毒的致细胞病变作用。结论桑白皮提取物对呼吸道常见病毒有抑制作用。; 张国刚黎琼红叶英子博张洪霞李凡; 关键词：桑白皮抗病毒活性

桑白皮药材质量控制研究被引量：12: 2006年; 目的:研究桑白皮药材质量控制方法。方法:用紫外分光光度法测量总黄酮的含量。结果:回收率为98.20%,相对标准偏差为2.1%,相关系数为0.9999。该法测定桑白皮中总黄酮的含量,操作简便、结果稳定、重复性好,可作为质量检验的一个定量方法。; 徐世义张国刚张洪霞; 关键词：桑白皮总黄酮

层黏连蛋白对人翼状胬肉成纤维细胞生长的抑制作用被引量：1: 2007年; 目的:探讨层黏连蛋白对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响。方法:体外培养的第3代翼状胬肉成纤维细胞,接种于层黏连蛋白包被培养皿(Ln组)和空白培养皿(对照组)中,倒置显微镜观察细胞生长状态,MTT法检测细胞增殖状态,作出生长曲线;免疫荧光法检测α-SMA在细胞内的表达;RT-PCR法检测TGF-β1和cytokeratin mRNA的表达水平。结果:Ln组成纤维细胞数量少于对照组;3～7d,Ln组A570明显低于对照组(0.20vs0.28,0.22vs0.30,0.28vs0.34,0.31vs0.36,0.33vs0.36,P<0.05);α-SMA在对照组细胞内表达良好,在Ln组的表达受到抑制;与对照组相比,Ln组TGF-β1mRNA的表达下降,cytokeratin mR-NA表达增加。结论:层黏连蛋白能抑制翼状胬肉中成纤维细胞的增殖。; 王欣玲于韬张国刚阎启昌张劲松; 关键词：层黏连蛋白翼状胬肉成纤维细胞

层黏连蛋白体外对人虹膜色素上皮细胞的影响: 2007年; 目的:研究不同浓度的层黏连蛋白对体外培养的人虹膜色素上皮细胞(IPE)的作用。方法:采用酶辅助的显微分离法对成人眼进行IPE的原代和传代培养,观察其形态;以不同浓度的层黏连蛋白(0,1,5,10mg/L)处理第3代IPE细胞,MTT法作出生长曲线,免疫荧光法检测细胞角蛋白1(CK1)表达的变化。结果:原代培养的IPE细胞内色素丰富,而传代培养后色素显著减少;低浓度层黏连蛋白(5mg/L)明显促进IPE细胞增殖(0.187vs0.151,0.236vs0.176,0.245vs0.215,0.261vs0.238,0.279vs0.254;P<0.05);高浓度(10mg/L)明显抑制细胞增殖(0.121vs0.151,0.081vs0.176,0.094vs0.215,0.065vs0.238,0.078vs0.254;P<0.05);CK1染色均为阳性,高浓度层黏连蛋白(10mg/L)使IPE细胞聚集,CK1表达明显增强。结论:层黏连蛋白对IPE细胞具有双重作用,低浓度的层黏连蛋白适于IPE细胞的体外培养。; 王欣玲于韬张国刚阎启昌张劲松; 关键词：层黏连蛋白虹膜色素上皮细胞

维甲酸对晶状体上皮细胞的作用: 2005年; 目的通过观察维甲酸(RA)对传代培养的人晶状体上皮细胞(hLECs)生长特性的影响,探讨RA抑制晶状体后囊混浊形成(PCO)的细胞学机制.方法选取第2～5代hLECs,利用倒置显微镜观察RA对细胞形态的影响;MTT法观察RA对细胞增殖的影响,计算RA对细胞增殖的抑制率;间接免疫荧光法观察RA对整合素β1表达阳性率和波形蛋白形态的影响.结果倒置显微镜下,1×10-8～1×10-6mol·L-1组上皮细胞增多,成纤维细胞减少,1×10-5mol·L-1组2种细胞都减少;MTT法显示,1×10-7～1×10-5mol·L-1组细胞增殖受抑制,抑制作用呈剂量、时间依赖性(F检验,P＜0.05),抑制率在10.8%～32.0%.1×10-6～1×10-5 mol·L-1组整合素β1表达明显增高(x2检验,P＜0.05),1×10-7～1×10-5 mol·L-1组波形蛋白在细胞内铺展较均匀.结论RA具有抑制传代细胞增殖的作用,但表现为抑制成纤维细胞和促进上皮细胞二者作用的总和,只是抑制作用远远大于促进作用.RA抑制PCO的功能,可能是通过整合素途径来实现的.; 王欣玲张劲松张国刚于韬丁立成; 关键词：维甲酸晶状体细胞增殖整合素

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中国博士后科学基金(2003033282)