国家自然科学基金(30972603)
- 作品数：4 被引量：42H指数：2
- 相关作者：周伯平刘映霞杨桂林刘威龙陈圆圆更多>>
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- 肠道病毒71型手足口病的疫苗筛选和观察被引量：1
- 2014年
- 目的 筛选安全有效新型EV71候选疫苗,为将来EV71疫苗开发应用奠定基础.方法 以重组蛋白VP1为疫苗设计靶点,不同候选疫苗包括灭活疫苗、DNA疫苗、VP1蛋白疫苗在0、2周、4周分别按照不同剂量和肌内注射途径免疫BALB/c雌性小鼠,在0、2周、4周、6周、8周、10周、16周分别采集小鼠尾静脉血,16周处死小鼠,收集小鼠脾脏细胞,检测小鼠体液免疫和细胞免疫功能,筛选评价候选疫苗的疗效和安全性.结果 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗免疫小鼠2周后IgG抗体滴度即开始升高,4周后明显升高,8周后达高峰,至少维持16周以上;IgG亚类以IgG2a和IgG1为主.三种疫苗能诱导以γ-IFN和IL-4为主的细胞免疫反应.灭活疫苗疗效优于其他候选疫苗,未发现疫苗相关不良反应.结论 灭活病毒疫苗、VP1 DNA质粒疫苗、VP1蛋白疫苗均能诱导持久的特异性细胞免疫和中和抗体反应,以灭活病毒疫苗疗效较好,需要将来攻毒实验可进一步验证其免疫力.
- 姚思敏杨桂林刘威龙方木通周伯平
- 关键词：肠道病毒属手足口病
- 应用枯草芽孢杆菌表达系统制备肠道病毒71型VP1蛋白
- 2013年
- 目的利用枯草芽孢杆菌系统表达肠道病毒71型（EV71）病毒VPl蛋白。方法使用基因特异性引物扩增VPl开放读码框（ORF），构建包含VP1完整开放读码框的pSac—VPl穿梭载体。根据枯草芽孢杆菌表达系统双交叉同源重组的特点，将EV71的结构抗原基因VPl整合在枯草芽孢杆菌sacA染色体，并经测序鉴定。使用VPl特异性抗体，通过蛋白印记（Western—Blot）鉴定枯草芽孢杆菌中VPl蛋白的表达情况。结果成功克隆EV71的VPl基因，长度1361bp，并将其克隆入穿梭载体pSae—Kan。测序结果显示VPl基因成功整合如sacA染色体。Western．Blot证实VPl抗原在枯草芽孢杆菌的成功表达，相对分子质量约35×10^3。结论利用枯草芽孢杆菌表达系统成功制备EV71病毒VPl抗原，为后续EV71诊断试剂、疫苗研发奠定基础。
- 张国良刘威龙詹森林刘映霞陈圆圆杨桂林聂广周伯平
- 关键词：肠道病毒属病毒包膜蛋白质类
- 基于枯草芽孢杆菌系统制备的EV71VP1重组抗原诱导小鼠免疫应答的研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察基于枯草芽孢杆菌系统制备的EV7lVPl重组抗原诱导BALB／c小鼠产生的免疫应答反应。方法通过建立BALB／c小鼠动物模型，分别将前期构建的基于枯草芽孢杆菌系统制备的EV71重组抗原（rVPl）、灭活EV71病毒免疫组（EV71）和空白对照组（PBS），经鼻腔接种6～8周龄BALB／c小鼠，ELISA方法检测免疫后不同时间产生的特异性IgG、IgA以及IgGl和IgG2a水平。结果EV71重组抗原可以有效诱导小鼠产生高水平的体液免疫和明显的黏膜免疫应答，且能够诱发均衡的Th1、Th2免疫调节。结论肠道病毒71型重组VPl抗原可诱发小鼠产生明显的特异性体液免疫和黏膜免疫应答。
- 刘威龙吴伟刚陈圆圆张国良陈心春杨桂林周伯平刘映霞
- 关键词：肠道病毒属抗体生成
- 肠道病毒71相关性手足口病新进展被引量：39
- 2010年
- 刘映霞周伯平
- 关键词：肠道病毒71型手足口病EV71常见病因HFMD
