常州市卫生局科技项目(ZD200912)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 肠道病毒71型外壳蛋白VP1的可溶性表达、纯化及活性鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的克隆、表达和鉴定肠道病毒71型(EV71)VP1基因,得到可溶性的蛋白VP1,为制备EV71的抗体和诊断试剂的开发打下基础。方法优化EV71VP1蛋白基因,克隆并构建重组表达质粒pET15b/VP1,转化大肠杆菌BL21。使用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Westernblotting检测目的蛋白。以重组蛋白VP1为抗原,ELISA检测抗原活性。结果重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量为36000,与预计大小一致。ELISA实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。结论本研究成功克隆和表达了EV71VP1蛋白,并得到可溶性的蛋白,对肠道病毒71型诊断试剂的开发有进一步潜在的应用价值。
- 周亚萍史伟峰朱荫昌曹利民朱思梅史梅李坤姜庆波
- 关键词：肠道病毒71型可溶性抗原
