广东省科技攻关计划(2006B19901014)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：卢筱华杨冬华叶刚汤绍辉丁世华更多>>
- 相关机构：暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省名医工程研究项目广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 特异性抗肝癌单链抗体的表达及意义被引量：1
- 2008年
- 目的优化表达条件,获取有生物活性的特异性抗肝癌单链抗体。方法以ITPG诱导大肠杆菌HB2151表达可溶性抗肝癌单链抗体;利用HiTrap Anti-ETag亲和层析柱对阳性克隆表达的单链抗体进行纯化;纯化后的单链抗体进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,以Bradford检测法测定其浓度,ELISA法及免疫组化法鉴定其生物学活性;结果在培养基中加入0.4M蔗糖,以IPTG 1mmol/L于30℃诱导12h,抗肝癌scFv可溶性表达量较多,纯化后可溶性抗肝癌scFv含量为325μg/L。纯化的抗肝癌scFv与肝癌组织、肝癌细胞抗原特异性结合,与肝硬化、正常肝组织无阳性结合。结论成功获得具有生物活性的特异性抗肝癌单链抗体,为肝癌靶向诊断及治疗的开发与应用奠定了基础。
- 丁世华杨冬华卢筱华汤绍辉叶刚
- 关键词：肝细胞癌单链抗体纯化
- 特异性抗肝癌单链抗体的优化表达与纯化及其生物学活性鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:制备有生物活性的特异性抗肝癌单链抗体。方法:以ITPG诱导大肠埃希菌HB2151表达可溶性抗肝癌单链抗体;利用HiTrap抗ETag亲和层析柱对阳性克隆表达的单链抗体进行纯化;纯化后的单链抗体进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,以Bradford检测法测定其浓度,ELISA法及免疫组化法鉴定其生物学活性。结果:在培养基中加入0.4mol/L蔗糖,以IPTG1mmol/L于30℃诱导12h,抗肝癌scFv可溶性表达量较多,纯化后可溶性抗肝癌scFv含量为325mg/L,相对分子质量为29×103。与肝癌细胞结合效价为1:64,与肝癌组织结合阳性率为75%,具有良好的生物学活性。结论:成功获得具有生物活性的特异性抗肝癌单链抗体,为肝癌靶向诊断及治疗的开发与应用奠定了基础。
- 丁世华杨冬华卢筱华汤绍辉叶刚
- 关键词：大肠埃希菌
