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电穿孔法转染人端粒酶逆转录酶至许旺细胞的研究被引量：3: 2010年; 目的利用电穿孔技术，将人端粒酶催化亚基（hTERT）转染至sD大鼠许旺细胞，观察及检测外源性bTERT在许旺细胞内表达及对许旺细胞寿命及增殖能力的影响。方法从食管癌组织中提取hTERT RNA，构建pcDNA3．1-hTERT质粒，利用电穿孔技术，转染许旺细胞，PCR检测hTERT RNA，TRAP—PCR银染法端粒酶活性检测试剂盒检测端粒酶活性，PI-annexin V染色，流式细胞仪测第15代转染及未转染ADSCs细胞凋亡，并且绘制15代转染及未转染细胞传代次数及传代时间曲线。结果成功构建pcDNA3．1-hTERT质粒，转染后，许旺细胞内hTERT RNA表达，并且TRAP端粒酶活性检测结果为阳性，许旺细胞标志物S100阳性，转染后细胞传代能力较未转染细胞显著增强。结论成功构建hTERT-许旺细胞，为构建许旺细胞永生化细胞系打下基础。; 张诚程飚出晓军王会仁陈峥嵘; 关键词：端粒酶许旺细胞电穿孔

许旺细胞诱导下脂肪来源干细胞向神经细胞方向分化的研究被引量：4: 2009年; 目的探讨脂肪来源干细胞（ADSCs）和SD大鼠许旺细胞（Schwann cells）利用Transwell非接触式共培养时生长增殖特性和向神经元样细胞分化的规律。方法取1月龄SD大鼠腹股沟处脂肪组织。按酶原消化法获取脂肪来源干细胞，同时取大鼠坐骨神经按改良植块法获取许旺细胞。取P3代脂肪来源干细胞分三组：A组使用ADSCs和许旺细胞构建Transwell非接触式共培养体系，B组利用β-巯基乙醇（BME）、丁酸酯羟基茴香醚（BHA）作为脂肪来源干细胞诱导因子使其向神经方向诱导，C组脂肪干细胞为对照组。比较各组细胞形态，观察脂肪来源干细胞代谢、轴突生长、免疫荧光染色情况，并做统计学分析。结果A组脂肪来源干细胞部分分化为具有细长突起的细胞，B组诱导培养后，大多数存活的细胞也同样转变为类似于神经元的形态，A组突起长度（11．64±1．64）μm，B组突起长度（13．03±1．35）±m，差异有统计学意义（P〉0．05），细胞生长代谢旺盛。A组B组诱导分化后的细胞NF表达阳性率分别为（54．16±9．35）％和（62．25±8．95）％，两者差异无统计学意义，而GFAP染色阴性。在细胞数量上，A组为（4．08±0．68）×10^7/L，C组（4．20±0．79）×10^7／L，差异无统计学意义（P〉0．05），但明显高于B组（3．23±0．37）×10^7／L（P〈0．05）。结论许旺细胞能促进脂肪来源干细胞向神经方向分化，效果与使用β—BME加BHA试剂诱导的结果相近，并能有效防止脂肪来源干细胞损伤。; 李伯休程飚张诚出晓军陈峥嵘; 关键词：许旺细胞脂肪干细胞神经分化

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上海市卫生局科研基金(2007041)

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