广西医学科学实验中心开放基金(KFJJ2011-28)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：广西医科大学第一附属医院广西医科大学湖南省益阳市中心医院更多>>
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- 胰岛β细胞体外保护方法研究进展
- 2015年
- 胰岛移植是新兴的糖尿病治疗方法,但人为提取过程中常出现胰岛β细胞损伤。目前,常用的胰岛β细胞体外保护方法主要有化学药物和激素等药物保护方法、睾丸支持细胞和骨髓间充质干细胞等细胞共培养方法、微囊化技术和基因治疗方法等,各种方法均有一定成效,但均存在一定不足。
- 韩小乐田磊
- 关键词：胰岛Β细胞胰岛移植
- 小鼠胰岛分离纯化后肾被膜下胰岛移植动物模型的建立被引量：4
- 2014年
- 目的：探讨一种分离纯化小鼠胰岛细胞的优良新型方法,经同种异体糖尿病小鼠肾被膜下胰岛移植建立动物模型.方法：（1）胰岛分离及检测：采用胆总管内胶原酶逆行灌注消化胰腺的方法分离胰岛,淋巴细胞分离液单一密度梯度离心法纯化胰岛.利用双硫腙对胰岛进行特异性染色来计算胰岛产量及纯度,台盼兰染色鉴定胰岛细胞的活性,以葡萄糖刺激胰岛素释放来检测胰岛功能.（2）胰岛移植：空白对照组（n =12）,糖尿病鼠组（n=12）,对糖尿病鼠组行同种异体鼠肾被膜下胰岛移植,观测血糖及生命体征变化.结果：每只小鼠可获得150～200个高质量胰岛,纯度及活性均高于90 ％,葡萄糖刺激后胰岛素释放量明显增加（SI=3）.糖尿病小鼠经胰岛移植后,1～3 d内,血糖均降至11.1 mmol/L以下.结论：采用新改进的分离纯化胰岛方法,可获得高质量、高功能的胰岛细胞.经同种异体糖尿病小鼠肾被膜下胰岛移植动物模型的成功建立,为进行人胰岛小鼠移植及人胰岛同种异体移植提供重要试验价值.
- 夏小林田磊韩小乐糜亮亮肖慧敏
- 关键词：淋巴细胞分离液胰岛移植小鼠动物模型
- 生长抑素减轻小鼠胰岛移植过程中胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤被引量：2
- 2015年
- 目的 观察与探讨生长抑素减轻小鼠胰岛移植过程中胰腺外分泌细胞对移植胰岛的损伤及其机制.方法 （1）体外实验：选取20只雄性BALB/C小鼠,采用随机数字表法分为生长抑素组和生理盐水组,每组10只.在获取胰岛手术麻醉前30 min,生长抑素组小鼠腹腔注射生长抑素10μg/g,生理盐水组注射等体积的生理盐水,然后分别收集两组小鼠的胰腺外分泌细胞及胰岛细胞,流式细胞仪检测两种细胞凋亡情况.（2）体内实验：获取小鼠胰岛及胰腺外分泌细胞,并对胰岛进行纯度及活性检测.应用链脲佐菌素建立小鼠糖尿病模型,然后进行胰岛移植,分别于小鼠左肾被膜上、下级同时移植胰岛250个及等体积的胰腺外分泌细胞.采用随机数字表法将成功建立胰岛移植模型的40只小鼠平均分为2组,实验组术后腹腔注射生长抑素,连续28 d,对照组术后注射等体积生理盐水,连续28 d.同时两组小鼠分别腹腔注射5乙炔基-2＆#39;-脱氧尿苷（EDU）5 μg/g,连续28 d.术后连续监测小鼠血糖;术后第8天,两组小鼠均进行葡萄糖耐量实验（IPGTT）;术后10和28 d两组各随机选取10只小鼠分别切除左肾,采用免疫组织化学法检测左肾包膜下抗淀粉酶抗体的表达,采用免疫荧光染色法检测移植胰岛β细胞增殖情况.结果 （1）流式细胞检测结果显示,生长抑素组小鼠胰腺外分泌细胞凋亡率明显高于对照组（P＜0.05）,两组间胰岛细胞凋亡率的差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）获取的小鼠胰岛纯度及活性均高于95％.胰岛移植后,两组小鼠血糖均恢复正常,对照组较实验组血糖恢复正常时间延迟（P＜0.05）,对照组的血糖水平明显高于实验组;IPGTT实验结果显示移植物血糖调节功能正常;术后10d实验组和对照组移植物周围均可见抗淀粉酶抗体阳性颗粒,但实验组阳性颗粒数较对照组减少（P＜0.05）;免疫荧光检测显示,实验组�
- 韩小乐糜亮亮周乐亮张鹏田磊
- 关键词：胰岛移植生长抑素凋亡
- 糖尿病小鼠左肾被膜下胰岛细胞与胰腺外分泌细胞共同移植动物模型的建立
- 2014年
- 目的：建立糖尿病小鼠左肾被膜下同种异体胰岛细胞与胰腺外分泌细胞共同移植动物模型及探讨胰腺外分泌细胞对胰岛移植物的损伤作用.方法：（1）体内实验：采用胆总管内逆行灌注胶原酶联合淋巴细胞分离液的方法来分离纯化胰岛,人工挑取胰岛细胞并收集胰腺外分泌细胞.链脲佐菌素腹腔注射诱导BALB/C小鼠成为糖尿病小鼠.单纯移植组（n=10）每只小鼠于左肾被膜上极移植胰岛细胞250个,共同移植组（n =10）每只小鼠于左肾被膜上下极同时移植胰岛细胞250个和等体积的胰腺外分泌细胞,持续观测血糖及生命体征变化,1个月后切除左肾并继续检测血糖.（2）体外实验：利用双硫腙对胰岛进行特异性染色来计算胰岛产量及纯度,利用台盼蓝染色鉴定胰岛细胞的活性,以及用葡萄糖刺激胰岛素释放实验来检测胰岛功能.结果：（1）胰岛移植后,单纯移植组及共同移植组血糖均逐步降至正常,共同移植组较单纯移植组血糖恢复正常时间延迟,移植术后第2,3,4,5天,单纯移植组受鼠血糖低于共同移植组,差异有统计学意义（P＜0.05）.切除两组受鼠左肾3d后,两组受鼠血糖均＞21 mmol/L.（2）每只小鼠可获得150～200个高质量胰岛,纯度及活性均高于90％,葡萄糖刺激后胰岛素释放量明显增加（SI=2.90）.结论：（1）成功建立糖尿病小鼠左肾被膜下同种异体胰岛细胞与胰腺外分泌细胞共同移植动物模型.（2）胰腺外分泌细胞与胰岛细胞同时移植会延迟植入胰岛功能恢复正常的时间.
- 韩小乐田磊夏小林糜亮亮
- 关键词：胰岛细胞糖尿病
- 胰岛移植研究新进展被引量：2
- 2014年
- 1型糖尿病是一种胰岛β细胞破坏，胰岛素绝对缺乏，使机体产生一系列内分泌代谢障碍的慢性自身免疫性疾病。在临床上通过注射外源性胰岛素来控制血糖成为了1型糖尿病患者的重要疗法，但与此同时也产生不良反应，尤其是日常低血糖的产生，且糖尿病肾病、视网膜病变、神经病变及心血管疾病等并发症也会发生。胰岛移植近来成为了控制1型糖尿病患者糖代谢最有希望的新型方法。人类第1例同种异体胰岛移植发生在1974年［1］，但其在临床上的成功率并不高，直到2000年Edmonton方案的出现，胰岛移植在临床应用中获得了戏剧性突破［2］。然而，由于胰腺供体的有限性、缺乏经验丰富的胰岛分离团队、免疫抑制剂的不良反应及不尽满意的长期疗效，使胰岛移植临床广泛应用依旧受限，为使胰岛移植成为一种常规的、有效的临床治疗糖尿病方法，还需要进一步努力。本文主要阐述胰岛移植治疗糖尿病的近期进展情况。
- 夏小林田磊
- 关键词：胰岛移植慢性自身免疫性疾病1型糖尿病外源性胰岛素
