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复合珊瑚羟基磷灰石人工骨的研制及其成骨效应被引量：10: 2004年; 目的自行研制复合珊瑚羟基磷灰石人工骨并评估其成骨效应。方法取南海澄黄滨珊瑚碳酸钙在特定条件下经过“热液交换反应”,制成单纯珊瑚羟基磷灰石(CorallineHydroxyapatite,CHA)人工骨,并将其与基因重组骨形态发生蛋白(rhBMP2)和几丁糖复合制成了三种复合珊瑚羟基磷灰石(CompositeCorallineHydroxyapatite,CCHA)人工骨,将此三种不同配型的复合人工骨和单纯CHA人工骨分别植入四组24只SD大白鼠肌肉内。手术后2、4、6、8周取材进行组织学观察,计数高倍单位视野内的成骨细胞数量和炎性细胞数量。采用SPSS8.0统计软件处理系统分析。结果术后各时期取材结果显示:B组(CHA+rhBMP2)和D组(CHA+rhBM2P+几丁糖)的单位视野内成骨细胞数量明显多于A组(单纯CHA)和C组(CHA+几丁糖);而C组和D组的单位视野内炎性细胞数量明显少于A组和B组。即D组人工骨的单位视野内的成骨细胞数量多、炎性细胞少。结论rhBMP2-几丁糖/CHA复合人工骨不但具有显著的成骨诱导作用,还具有炎症反应轻及持续的诱导成骨作用,是一良好的骨移植替代物。; 尹庆水张余李兆麟李文张宏斌赖晃文麦小红杨传红詹纯列权日章凯; 关键词：人工骨骨形态发生蛋白珊瑚羟基磷灰石几丁糖诱导成骨

重组人BMP-2的基因克隆及原核表达被引量：1: 2008年; 目的构建重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)的原核表达质粒并在大肠埃希菌中诱导表达。方法采用RT-PCR法,从骨髓细胞总RNA中扩增获得人BMP-2成熟肽cDNA,将其克隆入表达载体pBV220,构建BMP-2的重组原核表达质粒。重组质粒经酶切和测序鉴定后,在大肠埃希菌中诱导表达目的蛋白,表达产物采用Western印迹和ELISA进行鉴定。结果测序表明,重组基因序列与人BMP-2成熟肽基因完全一致。Western印迹和ELISA检测显示,表达产物的相对分子量(Mr)与预期结果相符,与相应抗体有结合活性。结论获得了人BMP-2成熟肽的编码基因,并构建了含有该基因的重组质粒pBV220/BMP-2,在大肠埃希菌中可高效表达人BMP-2。; 张宏斌张余武婕付娜王捷; 关键词：BMP-2 基因克隆原核表达

重组人BMP-2生物活性的鉴定被引量：4: 2009年; 鉴定在大肠杆菌中表达的重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic pro-tein-2,rhBMP-2)的生物学活性。构建重组人BMP-2的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白,纯化复性后,采用细胞及动物实验对其生物活性进行鉴定。细胞实验表明,重组人BMP-2具有诱导MC3T3-E1前成骨细胞向成骨细胞分化的特性。动物实验显示,重组人BMP-2在大鼠肌肉内具有诱导异位成骨功能。制备的重组人BMP-2具有较好的生物学活性。; 张宏斌武婕詹纯列张余付娜王捷; 关键词：人骨形态发生蛋白2 生物活性

顺铂-自制珊瑚人工骨缓释体系的制备及体外实验被引量：4: 2007年; 目的研制顺铂珊瑚羟基磷灰石缓释体,并分析其体外药物缓释对人U-2OS骨肉瘤细胞、骨转移乳腺癌细胞及骨转移前列腺癌细胞的抑制能力。方法通过水热反应合成珊瑚羟基磷灰石人工骨,再通过真空冷冻干燥等处理将顺铂载入形成复合抗肿瘤人工骨缓释体,将复合人工骨浸入模拟体液取得不同时间浸提液。采用四甲基偶氮唑蓝法检测其体外抑瘤作用。结果顺铂分布均匀于复合人工骨孔隙内,除8周浸提液对前列腺癌细胞的抑制率为29.92%外,其余浸提液在体外对肿瘤细胞的抑制率均大于50%。结论该缓释体具有良好的缓释功能,在8周内对骨肿瘤细胞有良好的抑制杀伤作用。; 杨进城尹庆水林骏黄华扬丁焕文张余李剑; 关键词：顺铂珊瑚羟基磷灰石药物缓释系统前列腺肿瘤

自制复合抗肿瘤珊瑚羟基磷灰石人工骨体外抗肿瘤实验被引量：5: 2007年; 目的:评价自制复合抗肿瘤珊瑚羟基磷灰石人工骨体外抗肿瘤活性。方法:实验于2006-01/12在解放军广州军区广州总医院骨科及南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室实验室进行。①将南海澄黄海珊瑚礁块制成的珊瑚碳酸钙通过水热反应转变成珊瑚羟基磷灰石人工骨后,再通过真空冷冻干燥等处理将顺铂载入形成复合抗肿瘤珊瑚羟基磷灰石人工骨,将复合人工骨一部分切开后行电镜扫描及能谱分析,以了解顺铂在人工骨孔隙中的分布及比例。②另精确称取复合人工骨1g浸入避光模拟体液50mL中,37℃,30r/min恒温振荡器中浸泡后,取得不同时间浸提液各10mL,将浸提液过滤除菌分装后再真空冷冻干燥制成粉剂低温保存。③以乳腺癌骨转移原代培养细胞(标本取自广州军区广州总医院手术切除标本)、高转移性肺癌SPCA-1细胞株及前列腺癌骨转移pc-3细胞株(购自中国生命科学院上海细胞所)为实验对象,利用MTT法分别检测对照组(单纯羟基磷灰石浸提液)、复合人工骨2,4,6及8周浸提液的体外抑制肿瘤细胞作用(计算肿瘤细胞的抑制率)。结果:①复合人工骨孔隙内顺铂分布均匀,能谱分析示复合顺铂占人工骨的体质量的10.05%。②复合人工骨2,4,6及8周浸提液体外对乳腺癌细胞的抑制率分别为71.83%,68.34%,63.74%及62.35%;对肺癌细胞的抑制率分别为81.59%,80.14%、74.81%及62.89%;对前列腺癌细胞的抑制率分别为85.04%,84.34%,65.66%及29.92%。除8周浸提液对前列腺癌的抑制率为29.92%为低度敏感外,复合人工骨8周内的浸提液在体外对肿瘤细胞的抑制率均>50%,为高度敏感。结论:自制顺铂珊瑚羟基磷灰石复合人工骨具有良好的缓释功能,其缓释液在8周内可抑制及杀伤肿瘤细胞。; 杨进城尹庆水林骏李剑黄华扬张余; 关键词：复合人工骨抗肿瘤生物材料

复合抗肿瘤活性珊瑚羟基磷灰石人工骨抗骨巨细胞瘤的体外实验被引量：5: 2009年; 背景:珊瑚羟基磷灰石人工骨用于修复骨缺损在临床上已很常见,但复合抗肿瘤药物的人工骨还没有应用于临床,关于这方面的基础研究还需进一步深入。目的:研制复合抗肿瘤药物顺铂的珊瑚羟基磷灰石人工骨,并观察其体外缓释浸提液对骨巨细胞瘤原代培养细胞增殖的影响。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-06/11在解放军广州军区总医院骨科研究所及南方医科大学细胞生物学实验室完成。材料:珊瑚羟基磷灰石人工骨由解放军广州军区广州总医院骨科研究所提供,顺铂为济南齐鲁制药厂生产,人骨巨细胞瘤标本由解放军广州军区广州总医院骨科提供。方法:通过真空冷冻干燥等处理将顺铂载入珊瑚羟基磷灰石人工骨,以形成复合抗肿瘤活性人工骨;将复合人工骨浸入模拟体液,收集第2,4,6,8周浸提液。采用四甲基偶氮唑蓝法检测浸提液在体外对骨巨细胞瘤的增殖抑制作用。以未复合顺铂的珊瑚羟基磷灰石人工骨浸提液对照。主要观察指标:肿瘤细胞增殖抑制率。结果:第2,4,6,8周复合顺铂的珊瑚羟基磷灰石人工骨浸提液对骨巨细胞瘤原代培养细胞的增殖抑制率分别为67.9%,48.3%,34.57%和28.4%。同时提取的珊瑚羟基磷灰石人工骨浸提液对骨巨细胞瘤原代培养细胞则无明显抑制作用。结论:该复合抗肿瘤活性人工骨具有良好的缓释功能,在8周内对骨巨细胞瘤细胞仍有较好的增殖抑制作用。; 林骏杨进城; 关键词：珊瑚羟基磷灰石药物缓释系统骨巨细胞瘤

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广东省科技计划工业攻关项目(2003C104004)

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